Содержание

Цефтриаксон

Препарат Цефтриаксон для животных относится к категории антибиотиков и предназначен для парентерального введения. Внешне представляет собой порошок, окрашенный в желтоватый цвет. Основным действующим компонентом является  — цефтриаксон натриевой соли.

Препарат относится к антибиотикам III поколения и обладает антимикробным действием в отношении широкого спектра микроорганизмов.

Механизм действия препарата основан на его способности нарушать проницаемость мембран у микробных клеток, в результате чего наступает гибель патогенна.

В их число входят такие микроорганизмы, как Staphylococcus aureus, Enterobacteraerogenes, N. Meningitidis, Klеbsiеllа sрр., Сlоstrиdium sрр., Pseudomonas aeruginosa и многих других.

Цефтриаксон для животных применяется для лечения собак и кошек, а также других животных, страдающих отитом, менингитом, инфекционными заболеваниями мочеполовой системы,  а также органов дыхания и других заболеваниях.

Способ использования и дозировка

Для лечения собак, флакон с препаратом разбавляется в 1% растворе лидокаина, а для кошек – препарат разбавляют водой для инъекции.

Может вводиться как внутримышечно, так и внутривенно. Для внутривенного введения препарат разбавляется в 9.6 мл воды для инъекций. При введении препарата капельным способом, флакон растворяется в 100-250 мл натрия хлорида, при этом скорость введения должна быть в пределах 70-80 капель в минуту. Длительность введения составляет от 20 до 30 минут.

Необходимое количество вводимого за сутки препарата рассчитывается из нормы – 20-40 мг на 1 кг от массы тела. В зависимости от течения заболевания, препарат может вводиться дважды в сутки в норме 10-20 мг/кг массы тела.

Препарат не может быть использован для лечения животных, с выраженной почечной недостаточностью и во время беременности, а также для имеющих повышенную чувствительность к его компонентам.

 

 

Назад в раздел

порошок для приготовления раствора для инфузий,порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения, 1 г, 2 г — Энциклопедия лекарств РЛС

Наиболее частыми нежелательными реакциями, зарегистрированными на фоне терапии цефтриаксоном в клинических исследованиях, являются эозинофилия, лейкопения, тромбоцитопения, диарея, сыпь и повышение активности печеночных ферментов.

Для описания частоты нежелательных реакций используется следующая классификация: очень частые (≥1/10), частые (≥1/100 и <1/10), нечастые (≥1/1000 и <1/100), редкие (≥1/10000 и <1/1000) и очень редкие (<1/10000), включая единичные случаи.

Нежелательные реакции сгруппированы в соответствии с классами систем органов медицинского словаря для нормативно-правовой деятельности MedDRA.

Инфекционные и паразитарные заболевания:

Нечасто — микозы половых органов; редко — псевдомембранозный колит.

Нарушения со стороны системы крови и лимфатической системы:

Часто — эозинофилия, лейкопения, тромбоцитопения; нечасто — гранулоцитопения, анемия, коагулопатия.

Нарушения со стороны нервной системы:

Нечасто — головная боль и головокружение.

Нарушения со стороны дыхательной системы, органов грудной клетки и средостения:

Редко — бронхоспазм.

Нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта:

Часто — диарея, неоформленный стул; нечасто — тошнота, рвота.

Нарушения со стороны печени и желчевыводящих путей:

Часто — повышение активности печеночных ферментов (аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланинаминотрансферазы (АЛТ), щелочной фосфатазы).

Нарушения со стороны кожи и подкожных тканей:

Часто — сыпь;

нечасто — зуд; редко — крапивница.

Нарушения со стороны почек и мочевыводящих путей:

Редко — гематурия, глюкозурия.

Общие расстройства и нарушения в месте введения:

Нечасто — флебит, боль в месте введения, повышение температуры тела; редко — отеки, озноб.

Влияние на результаты лабораторных и инструментальных исследований:

Нечасто — увеличение концентрации креатинина в крови.

Пострегистрационное наблюдение: ниже описаны побочные явления, наблюдавшиеся при применении цефтриаксона. Определение их частоты встречаемости и наличия связи именно с применением цефтриаксона не всегда возможно из-за невозможности установить точный размер популяции пациентов.

Нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта:

Панкреатит, стоматит, глоссит, нарушение вкуса.

Нарушения со стороны системы крови и лимфатической системы:

Тромбоцитоз, увеличение тромбопластинового и протромбинового времени, уменьшение протромбинового времени, гемолитическая анемия. Описаны отдельные случаи агранулоцитоза (<500 клеток/мкл), причем большинство из них развивались после 10 дней лечения и применения кумулятивной дозы 20 г и более.

Нарушения со стороны иммунной системы:

Анафилактический шок, гиперчувствительность.

Нарушения со стороны кожи и подкожных тканей:

Острый генерализованный экзантематозный пустулез, отдельные случаи тяжелых побочных реакций (экссудативная мультиформная эритема, синдром Стивенса-Джонсона, токсический эпидермальный некролиз (синдром Лайелла)).

Нарушения со стороны нервной системы:

Судороги.

Нарушения со стороны органа слуха и лабиринтные нарушения:

Вертиго.

Инфекционные и паразитарные заболевания:

Суперинфекции.

Известны также следующие нежелательные реакции:

Образование преципитатов кальциевых солей цефтриаксона в желчном пузыре с соответствующей симптоматикой, билирубиновая энцефалопатия, гипербилирубинемия, олигурия, вагинит, повышенное потоотделение, «приливы», аллергический пневмонит, носовое кровотечение, желтуха, ощущение сердцебиения, сывороточная болезнь, а также анафилактические или анафилактоидные реакции.

Описаны отдельные фатальные случаи образования преципитатов в легких и почках по результатам исследования аутопсии у новорожденных, получавших цефтриаксон и кальцийсодержащие растворы. При этом в отдельных случаях был использован один венозный доступ, и образование преципитатов наблюдалось непосредственно в системе для внутривенного введения. Также описан, как минимум, один случай с летальным исходом при различных венозных доступах и в различное время введения цефтриаксона и кальцийсодержащих растворов. При этом по результатам исследования аутопсии у данного новорожденного преципитаты не были обнаружены. Подобные случаи наблюдались только у новорожденных (см. раздел «Особые указания»).

Зарегистрированы случаи образования преципитатов цефтриаксона в мочевыводящих путях, главным образом, у детей, получавших либо большие суточные дозы препарата (≥80 мг/кг в сутки), либо кумулятивные дозы более 10 г, а также имевших дополнительные факторы риска (обезвоживание, постельный режим). Образование преципитатов в почках может протекать бессимптомно или проявляться клинически, может приводить к обструкции мочеточников и постренальной острой почечной недостаточности. Данное нежелательное явление носит обратимый характер и исчезает после прекращения терапии цефтриаксоном.

Общие расстройства и нарушения в месте введения:

Флебит после внутривенного введения. Его можно избежать, вводя препарат медленно в течение 5 минут, предпочтительно в крупную вену.

Влияние на результаты лабораторных анализов:

У пациентов могут отмечаться ложноположительные результаты пробы Кумбса. Как и другие антибактериальные препараты, цефтриаксон может давать ложноположительный результат пробы на галактоземию. Ложноположительные результаты могут быть получены и при определении глюкозы в моче неферментными методами, поэтому при терапии цефтриаксоном глюкозурию, при необходимости, нужно определять только ферментным методом.

Цефтриаксон может вызывать недостоверное снижение показателей гликемии, полученных с помощью некоторых устройств мониторинга содержания глюкозы в крови. См. указания в руководстве по применению используемого устройства. При необходимости следует использовать альтернативные способы определения глюкозы в крови.

Цефтриаксон 1000мг порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения флакон 1 шт.

Стандартный режим дозирования

Внутривенно, внутримышечно.

Взрослые и дети старше 12 лет ?50 кг: по 1-2 г один раз в сутки (каждые 24 часа). В тяжелых случаях или при инфекциях, возбудители которых обла­дают лишь умеренной чувствительностью к цефтриаксону, суточную дозу можно увеличивать до 4 г.

Продолжительность лечения зависит от течения заболевания. Как и всегда при антибиотикотерапии, введение препарата Цефтриаксон следует продол­жать больным еще в течение минимум 48-72 часов после нормализации тем­пературы и подтверждения эрадикации возбудителя.

Обычно курс лечения составляет 4-14 дней; при осложненных инфекциях может потребоваться более продолжительное введение.

Курс лечения при инфекциях, вызванных Streptococcus pyogenes, должен составлять не менее 10 дней.

Введение

Следует использовать только свежеприготовленные растворы.

Для внутримышечного введения: 0,5 г препарата растворяют в 2 мл, а 1 г — в 3,6 мл воды для инъекций или 1 % растворе лидокаина. Для уменьшения боли при внутримышечных инъекциях препарат следует вводить с 1 % рас­твором лидокаина. Препарат следует вводить глубоко внутримышечно в достаточно большую мышцу (ягодица). Не следует вводить более 1 г в одну и ту же мышцу. Раствор, содержащий лидокаин, нельзя вводить внутривенно.

Для внутривенного болюсного введения: 0,5 г препарата растворяют в 5 мл, а 1 г — в 10 мл воды для инъекций. Раствор вводят внутривенно медленно в течение 5 минут, предпочтительно в крупную вену.

Для внутривенной инфузии: раствор вводят в течение не менее 30 минут.

2 г препарата растворяют в 40 мл воды для инъекций или одного из раство­ров, не содержащих в своем составе кальций (например, 0,9 % раствор натрия хлорида, 5 % или 10 % раствор декстрозы, вода для инъекций). Растворы препарата Цефтриаксон нельзя смешивать или добавлять в раство­ры, содержащие другие противомикробные препараты или другие раствори­тели, за исключением перечисленных выше, из-за возможной несовместимо­сти.

Нельзя использовать для приготовления растворов препарата Цефтриаксон для внутривенного введения и их последующего разведения растворители, содержащие кальций, такие как раствор Рингера или раствор Хартмана, из-за возможного образования преципитатов.

Образование преципитатов кальциевых солей цефтриаксона может происхо­дить и при смешении препарата Цефтриаксон и кальцийсодержащих раство­ров при использовании одного венозного доступа. Нельзя использовать Цефтриаксон одновременно с кальцийсодержащими растворами для внутри­венного введения, в том числе с длительными инфузиями кальцийсодержа­щих растворов, например, при парентеральном питании с использованием Y-коннектора. Для всех групп пациентов, кроме новорожденных, возможно последовательное введение препарата Цефтриаксон и кальцийсодержащих растворов при тщательном промывании инфузионных систем между влива­ниями совместимой жидкостью (см. раздел «Взаимодействие с другими лекарственными средствами»).

Не поступало сообщений о взаимодействии цефтриаксона и пероральных кальцийсодержащих препаратов или взаимодействии цефтриаксона для внутримышечного введения и кальцийсодержащих препаратов (для внутри­венного или перорального применения).

Дозирование в особых случаях

Больные с нарушением функции печени

У больных с нарушением функции печени нет необходимости уменьшать дозу при условии отсутствия нарушений функции почек.

Больные с нарушением функции почек

У больных с нарушением функции почек нет необходимости уменьшать дозу при условии отсутствия нарушений функции печени. Суточная доза препара­та Цефтриаксон не должна превышать 2 г лишь в случаях почечной недоста­точности с клиренсом креатинина менее 10 мл/мин. Цефтриаксон не выводится при гемодиализе или перитонеальном диализе, поэтому введение пациенту дополнительной дозы препарата Цефтриаксон после окончания диализа не требуется.

При сочетании тяжелой почечной и печеночной недостаточности сле­дует тщательно наблюдать за эффективностью и безопасностью применения препарата.

Больные пожилого и старческого возраста

Обычные дозы для взрослых без поправок на возраст при условии отсутствия тяжелой почечной и печеночной недостаточности.

Дети

Новорожденные, грудные дети и дети младше 12 лет

При назначении препарата Цефтриаксон один раз в сутки рекомендуется придерживаться следующих режимов дозирования:

— новорожденные (до 14 дней): 20-50 мг/кг массы тела один раз в сутки; суточная доза не должна превышать 50 мг/кг массы тела;

— новорожденные, грудные дети и дети младшего возраста (с 15 дней до 12 лет): 20-80 мг/кг массы тела один раз в сутки;

— детям с массой тела свыше 50 кг назначают дозы для взрослых. Недоношенным детям в возрасте до 41 недели включительно (суммарно гестационный и хронологический возраст) применение цефтриаксона проти­вопоказано.

Цефтриаксон противопоказан новорожденным (?28 дней), которым уже назначено или предполагается внутривенное лечение кальцийсодержащими растворами, включая продолжительные кальцийсодержащие инфузии, например, при парентеральном питании из-за риска образования преципита­тов кальциевых солей цефтриаксона (см. раздел «Противопоказания»). Грудным детям и детям в возрасте до 12 лет внутривенные дозы в 50 мг/кг или выше следует вводить капельно в течение не менее 30 минут. Новорож­денным внутривенное введение следует проводить в течение 60 минут, чтобы снизить потенциальный риск развития билирубиновой энцефалопатии.

Менингит

При бактериальном менингите у грудных детей и детей младшего возраста лечение начинают с дозы 100 мг/кг (но не более 4 г) 1 раз в сутки. После идентификации возбудителя и определения его чувствительности дозу мож­но соответственно уменьшить. Наилучшие результаты при менингококковом менингите достигались при продолжительности лечения в 4 дня, при менин­гите, вызванном Haemophilus influenzae — 6 дней, Streptococcus pneumoniae — 7 дней.

Болезнь Лайма

50 мг/кг (высшая суточная доза — 2 г) взрослым и детям один раз в сутки в течение 14 дней.

Гонорея (вызванная пенициллиназообразующими и пенициллиназонеобразующими штаммами).

Однократное внутримышечное введение 250 мг препарата Цефтриаксон взрослым пациентам и детям старше 12 лет ?50 кг.

Острый средний отит

При лечении острого среднего отита у детей рекомендуется однократное внутримышечное введение в дозе 50 мг/кг (но не более 1 г).

Взрослым рекомендуется однократное внутримышечное введение в дозе 1-2 г. Согласно ограниченным данным, в тяжелых случаях или при неэффективности предыдущей терапии, препарат Цефтриаксон может быть эффективен при внутримышечном введении в дозе 1-2 г в сутки в течение 3 дней.

Профилактика послеоперационных инфекций

В зависимости от степени инфекционного риска вводится 1-2 г препарата Цефтриаксон однократно за 30-90 минут до начала операции. При операциях на толстой и прямой кишке хорошо зарекомендовало себя одновременное (но раздельное, см. раздел «Способ применения и дозы») введение препарата Цефтриаксон и одного из 5-нитроимидазолов, например, орнидазола.

противопоказания, побочное действие, дозировки, состав – порошок д/пригот.раствор а д/в/в и в/м введения в справочн

общие положения

Инъекционный препарат цефтриаксон (Ceftriaxone) широко используется в ветеринарной медицине

в нескольких формах:

  • каждый флакон 0,5 г содержит сухое вещество, эквивалентное 0,5 г препарата (в стерильном виде)
  • каждый флакон 1 г содержит сухое вещество, эквивалентное 1 г цефтриаксона (в стерильном виде)
  • каждый флакон 2 г содержит сухое вещество, эквивалентное 2 г лекарственного средства (в стерильном виде)

Согласно инструкции, инъекции цефтриаксона применяются для лечения следующих инфекций у животных

, вызванных восприимчивыми микроорганизмами:

  • инфекции дыхательных путей
  • острый бактериальный отит
  • инфекции кожи
  • инфекции мочевыводящих путей
  • инфекции респираторного тракта
  • инфекции костей и суставов
  • бактериальная септицемия
  • внутрибрюшная инфекция

Ответ

Чумка – древнейшая болезнь, поражающая четвероногих питомцев. Часто заболеванием страдают маленькие щенки в возрасте от 3 мес до 1 года.

Заболевание носит инфекционный характер, распространяется от больной собаки к здоровой. Здоровая собака способна заразиться через выделения из носа либо рта больной, физиологические отправления, предметы обихода. Опасно пользоваться общими мисками и подстилками с больным животным. Для человека болезнь не представляет опасности, однако он подчас становится носителем вируса. Оказывать помощь питомцам возможно спокойно, не опасаясь заражения.

Дозировка и применение в ветеринарии

Согласно инструкции по применению для ветеринарии, сухой порошок во флаконе следует разбавить 5-10 мл растворителя и вводить с интервалом 12-24 часа. В качестве растворителя можно использовать изотонический раствор натрия хлорида, раствор новокаина, раствор лидокаина. Внутримышечные инъекции препарата животным достаточно болезненные.

Поэтому для внутримышечного применения предпочтительней использовать растворы новокаина или лидокаина. В качестве растворителя нельзя применять калийсодержащие растворы (раствор Рингера, Хратмана, Рингер-Лока, трисоль, йоностерил). Глюкоза также не используется для растворения препарата.

Препарат может вводится животным внутримышечно или внутривенно.

  • Крупные животные (КРС и лошади): доза цефтриаксона от 15 до 50 мг / кг массы тела 1-2 раза в день в течение 5-7 дней.
  • Телята, овцы и козы: доза от 15 до 50 мг / кг массы тела 1-2 раза в день в течение 5-7 дней.
  • Собакам: от 15 до 50 мг / кг массы тела 1-2 раза в день в течение 5-7 дней.
  • Кошкам: от 25 до 50 мг / кг массы тела 1-2 раза в день в течение 5-7 дней.

Треймут Любовь * Treimut.ru

Цефтриаксон — препарат III поколения из группы антибиотиков “Цефалоспорины”

Цефтриаксон, это недорогой, эффективный и довольно популярный препарат в ветеринарной практике.

Антибиотик назначается при огромном количестве заболевания, хорошо снимает воспаления, препарат сильный, широкого спектра действия.

Оглавление

Цефтриаксон назначается на 7-10 дней. Препарат делают 1 раз в сутки.

Обычно препарат прекращают через три дня после нормализации температуры и исчезновения всех симптомов. Крайне важной пройти весь курс лечения, а не прерывать его, когда состояние животного улучшится.

Препарат начинает действовать через 2-3 часа после введения, для достижения результата необходимо пройти полный курс, даже когда симптомы заболевания исчезли. Однако, если через 3-5 дней улучшения не наступают, а тем более, если состояние ухудшилось, необходимо незамедлительно обраться к ветеринару.

Инъекции болезненные, поэтому разводить препарат мы будем новокаином 0,5% . Возможно применение лидокаина, одна при его использовании возможны аллергические реакции, проблемы с сердцем и дыханием! Вода для инъекций так же допустимо, однако животное будет испытывать сильную боль. Поэтому Новокаин 0,5% лучший вариант.

  • Во флакон цефтриаксона(1 гр) вводи 5мл Новокаин 0,5%
  • Хорошо перемешиваем, раствор должен стать однородным, желтого цвета
  • Набираем в шприц необходимое количество лекарства, обычно это 1-1,5 мл на 5 кг веса животного. О точной дозировке читайте ниже.
  • Пузырек с оставшимся лекарством утилизируем, хранить нельзя!

Дозировка определяется исходя из веса животного. На 1 кг вводят 20-40 мг антибиотика

  • Для кошек и собак весом менее 2 кг — 0,5 готового раствора.
  • Для кошек, собак весом около 3-4 кг — назначают 1 мл готового лекарства.
  • Для кошек, собак весом более 4 кг дозировка повышается, так для кота весом 4,5 кг — дозировка будет 1,3 мл готового лекарства. (при условии, что порошок разводили 5 мл новокаина 0,5%)

Передозировка опасна. Точные дозировки назначает лечащий врач. Однако, если возможности обратиться к врачу нет, то средняя дозировка — это 1 мл, готового, правильно разведенного препарата на 5 кг веса животного.

Цефтриаксон колем в мышцу задней лапы, лапы чередуем.

Лекарство вводим медленно.

В случае, если Цефтриаксон не попал в мышцу, но инъекция введена, переделывать ничего не нужно. Следующий укол делаем ровно через сутки. При случайном введении цефтриаксона в холку, действия точно такие же, ничего страшного не произойдет, наблюдайте за состоянием питомца, не волнуйтесь. И переделывать укол не надо, животное получило препарат. Однако, в дальнейшем следует быть внимательным и колоть лекарство в мышцу!

Помните, что препарат должен назначать врач. И дозировка, курс лечения определяются индивидуально в каждой конкретной ситуации. Приведенные выше рекомендации получены от ветеринарного врача, но при этом не заменяют очной консультации, осмотра животного и анализов.

Это интересно:

  • Как жить с доминантной собакой Привет, сегодня будет большая статься по поведению доминантных собак, я расскажу как мы справляемся с…

Противопоказания к применению цефтриаксона животным

Согласно инструкции, не следует назначать животным данный препарат с повышенной чувствительностью в анамнезе к цефалоспориновым антибиотикам. При использовании цефтриаксона в ветеринарии наблюдалось преходящее повышение уровня азота мочевины и креатинина сыворотки крови. Редко регистрировались изменения в продолжительности протромбинового времени у животных, получавших цефтриаксон. Очень редко отмечено нарушение синтеза витамина К или низкий уровень витамина К.

В интенсивной терапии животных (например, при хронических заболеваниях печени и алиментарной дистрофии) может потребоваться мониторинг протромбинового времени во время лечения животных цефтриаксоном.

Основные характеристики препарата Цефтриаксон для собак

Цефтриаксон для собак применяется только по показаниям врача, потому что после его использования могут возникнуть тяжелые побочные эффекты. Этот препарат обладает достаточно высокими качественными характеристиками, поэтому активно применяется и в ветеринарии, и в общей («человеческой») медицине.

Категория препарата Цефтриаксон Антибактериальное средство
Против каких бактерий эффективен Стафилококки, стрептококки, кишечная палочка, сальмонелла и все другие известные
Принцип действия Основное действующее вещество разрушает мембраны клеток бактерий, что приводит к их быстрой гибели
Уровень биологической доступности 100%, поэтому при введении препарата оказывается благоприятное воздействие на весь организм
Пути выведения остаточного продукта Почками вместе с мочой, редко через желчный пузырь с желчью
Форма выпуска Порошок белого цвета, после разведения может приобрести желтоватый оттенок
Метод введения Внутримышечные инъекции, можно внутривенные, запрещены подкожные – образуются болезненные уплотнения

Показания к применению

Применяют Цефтриаксон для собак строго по показаниям:

  • заражение крови;
  • бронхиты;
  • сальмонеллез;
  • отит;
  • менингит;
  • гайморит;
  • сепсис;
  • гнойные раны;
  • ларингит и другие заболевания дыхательных путей;
  • патологии мочевыделительной системы типа пиелонефрита, цистита;
  • поражения суставов и костей инфекционной этиологии.


Гнойный отит
Этот же препарат помогает решать проблемы со здоровьем, которые диагностируются ветеринарами чаще всего.

Воспаление молочных желез

Если сука не беременная, то каких-либо внешних изменений в молочных железах не должно быть, равно как и внутренних типа формирования узелковых или обширных уплотнений. Во время беременности и сразу после родов для собаки характерны отеки молочных желез, покраснение кожи, локальное повышение температуры, и это нормальное явление. Во всех остальных случаях требуется обследование у ветеринара, получение медикаментозных назначений.

Так как любые воспаления лечатся антибактериальными препаратами, Цефтриаксон будет в данном случае максимально эффективен.

Рекомендуем прочитать о Цефтриаксоне для кошек. Из статьи вы узнаете, когда назначают Цефтриаксон для кошек, как правильно дозировать и делать инъекции коту, а также о том, сколько колоть препарат и его аналогах. А здесь подробнее об аналогах Цефтриаксона.

Свищи

У собак свищи являются защитной реакцией организма на воспалительный процесс. Представляют собой отверстия с каналами, через которые наружу вытекают гнойные массы. В принципе, это воспаление, которое начинается на фоне присутствия болезнетворных бактерий и приводит к постепенному некрозу мягких тканей.

Лечение свищей заключается в ежедневной обработке отверстия, в установке дренажа и «ударной» антибактериальной терапии. Так как Цефтриаксон относится к препаратам широкого спектра действия, он отлично подходит для лечения – уже на 3-5 сутки гнойные выделения исчезают, а отверстие начинает затягиваться.

Пироплазмоз

Это заболевание вызывается паразитами, в частности оно развивается после укуса собаки клещом. Для него характерны выраженные симптомы:

  • неуверенная походка животного;
  • отказ от пищи;
  • повышенная жажда;
  • рвота и понос;
  • сильная и быстро приходящая усталость.

Если пироплазмоз протекает по стандартной схеме, то антибиотики в лечении не используются. Но часто у собак эта патология сопровождается бактериальной инфекцией, и вот в таком случае Цефтриаксон обязательно пригодится.

Энтерит

Заболевание относится к категории воспалительных, затрагивает кишечник и может развиться в любом его отделе. Достаточно опасное и при отсутствии квалифицированной ветеринарной помощи животное может умереть буквально за 24 часа. Лечение заключается в срочном введении сыворотки с высоким содержанием иммуноглобулинов, но обязательно дополнительным препаратом должен выступать антибиотик широкого спектра действия.

Под воздействием Цефтриаксона разрушаются ферменты, которые делают верхнюю оболочку болезнетворных бактерий особенно прочной. Выбор этого препарата гарантирует невозможность развития вторичной инфекции и значительно снижает риски появления тяжелых последствий патологии.

Всегда ли можно назначать

Назначать Цефтриаксон можно только при стремительно прогрессирующих, тяжелых развитиях патологий бактериального происхождения. Антибиотик действительно мощный, но он может «выдать» много побочных эффектов – некоторые из них делают собаку инвалидом.


Антибиотик собаке назначает врач после детального обследования питомца

Например, пиодермия межпальцевая и микоплазмоз – заболевания бактериального происхождения, протекающие в легкой форме и не представляющие опасности для жизни домашнего питомца. При их лечении ветеринары не используют Цефтриаксон, отдавая предпочтение более щадящим препаратам типа Энрофлоксацин, Тилозин, Байтрин, Доксициклин.

Разрешен ли для кормящих сук, при беременности, щенкам

Если собака юного возраста и считается еще щенком, то препарат лучше вводить не самостоятельно, а в ветеринарной клиники. Цефтриаксон достаточно мягко воздействует на организм, но может вызвать спонтанную аллергическую реакцию и другие осложнения. Лучше, если щенок будет под присмотром специалистов – они смогут быстро провести симптоматическую терапию и спасти животное от гибели.

Кормящим сукам, беременным введение антибактериального препарата широкого спектра действия запрещено. Собака может потерять щенков, и процесс самопроизвольного аборта или преждевременных родов остановить будет невозможно.

Питание и уход за животным при чумке

Животное, больное чумкой, следует изолировать от остальных животных, поместить в отдельное укромное место. Подстилка выбирается мягкой и удобной. Если лечение проводится в домашних условиях, собаке предписывается обеспечить комфортные условия. Характерным признаком чумки считается светобоязнь, важно поместить питомца в теплое сухое затемненное помещение, защищённое от проникновения яркого света и громких звуков.

Полагается периодически очищать от выделений глаза, нос и ушные раковины питомца.

Изоляция питомца нужна после выздоровления в течение трех недель, собака считается носителем и распространителем заразы даже после выздоровления.

Питание собаки щадящее. Острый период требует давать собаке жидкость в неограниченном количестве и содержать пса на строгой диете. Полезно кормить питомца нежирным, не слишком кислым творогом, однопроцентным кефиром. Два раза в неделю дают питомцу сырое яйцо. Отварное нежирное мясо птицы дают в виде фарша или пюре. Разрешено кормить мясом курицы или индейки. Для снятия возбуждения в участках центральной нервной системы животное допустимо напоить настойкой пустырника либо отваром.

Источник dogcentr.ru

Чумка собак, или чума плотоядных, развивается моментально в организме животного. Если вы заметили симптомы чумки, необходимо как можно скорее обратиться к ветеринарному врачу.

Чумка – смертельно опасное заболевание, попытки начать лечение самостоятельно могут привести к печальному исходу. Только лечение, назначенное специалистом, может спасти вашего любимца.

Народный рецепт лечения

В отдельных случаях при отсутствии прочих возможностей лечения пробуют лечить животное народным средством. В состав входит сырое яйцо, столовая ложка жидкого меда и полстакана водки.

Составные части полагается тщательно перемешать, взболтать и постепенно залить собаке в пасть при помощи одноразового пластмассового шприца или спринцовки небольшого объема. Заливать лекарство показано в течение дня небольшими количествами. По другой схеме: разделить смесь на три равные порции по 50 миллилитров каждая, заливать собаке в три приема.

Описанное народное лечение с помощью водки популярно, известны доказанные случаи, когда собаки излечивались от чумки. Обычно средство оказывает эффект, когда собака взрослая, крепкая и выносливая, обладающая высоким иммунитетом. Форма заболевания должна быть лёгкой. Способ лечения используется исключительно в качестве дополнительного. Большинство исследователей пришло к выводу, что ухудшения от подобного лечения не последует.

Народные средства

Чумка достаточно старое заболевание, и раньше люди пытались лечить домашних животных сами. Сохранились рецепты народных средств, которые, как утверждают некоторые, справляются с заболеванием не хуже аптечным.

Однако помните, что самолечение подвергает жизнь вашего питомца ещё большей опасности, и применять народные методы можно лишь совокупно с основным лечением в качестве укрепляющего иммунитет.

Следующие средства способны помочь собаке быстрее восстановиться после лечения:

  • отвары зверобоя и ромашки: выводят токсины из организма;
  • пустырник: успокаивает нервную систему.

Чем лечить?

При постановке ветеринаром диагноза чумка собак назначается комплексное лечение, которое включает в себя следующее:

  • противовирусную терапию, устраняющую вирус заболевания;
  • симптоматическая, направленная на снятие определённых симптомов, например, препараты против диареи, отхаркивающие препараты и т.д.;
  • восстанавливающая и поддерживающая, воздействующая на весь организм животного (например, снятие интоксикации и т.д.).

Большинство препаратов вводятся в организм животного путём проставления уколов или капельниц. Давать лекарственные препараты в виде таблеток, суспензий и т.д. допустимо, если устранена рвота и нормализована работа ЖКТ.

Доксифин Табс 50 мг, уп. 14 таб

СОСТАВ И ФОРМА ВЫПУСКА
Каждая таблетка Доксифин Табс 50 содержит в качестве действующего вещества 50 мг доксициклина в виде доксициклина гидрохлорида, а также вспомогательные вещества — вкусовой наполнитель до 250 мг. Препарат представляет собой круглые, двояковыпуклые таблетки бежевого цвета, весом 250 мг, со вкусом мяса. Доксифин таблетки выпускают расфасованными по 14 шт в блистеры, упакованные в картонные коробки с инструкцией по применению.

Доксициклин относится к классу тетрациклинов, которые эффективно борются с широким спектром бактерий, особенно с внутриклеточными организмами. Благодаря высокому уровню жирорастворимости достигает большей внутриклеточной концентрации по сравнению с другими тетрациклинами.
Доксифин, оказывающий бактериостатическое действие, назначают для лечения кошек и собак от различных заболеваний, вызванных возбудителями, чувствительными к доксициклину: Ehrlichia canis, Bordetella bronchiseptica, Pasteurella multocida типа A, Arcanobacterium (Corynebacterium) и Escherichia coli; они провоцируют: эрлихиоз, инфекции дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы; а также инфекции кожного покрова.

Фармакодинамика: тетрациклины – это бактериостатические антибиотики широкого спектра действия, влияющие на грамположительные и грамотрицательные бактерии, включая анаэробы; риккетсии, хламидии, микоплазмы и некоторые простейшие. Тетрациклины эффективны, поскольку связываются с 30S субъединицей рибосомы, и блокируют присоединение аминоацил-тРНК в А-центр м-РНК рибосом. Тем самым, не допуская добавление новых аминокислот, нарушая элонгацию полипептидной цепи путем торможения белкового синтеза бактериальных клеток.
Фармакокинетика: Примерно 95% доксициклина полностью абсорбируется после приема внутрь и, благодаря высокому уровню жирорастворимости, он проникает в большинство жидкостей и органических тканей. Хорошо связывается с белком плазмы по сравнению с другими тетрациклинами, что приводит к пролонгированному периоду полувыведения у людей и животных. Доксициклин выводится с калом, не через желчевыводящие пути, в неактивной форме. Выведение из организма будет более длительным, из-за устойчивого уровня в сыворотке. В отличие от других антимикробных препаратов своего класса, наличие пищи в кишечнике не повлияет на абсорбцию доксициклина.

Способ применения: 
Таблетки доксифина необходимо давать животному в соответствии с рекомендованной дозой для конкретного веса, из рук хозяина, не смешивая с другой едой или добавками, нет необходимости предварительно сажать животное на диету или менять режим питания.

Дозировка:
Доксифин Табс в таблетках имеет три разные формы выпуска, таблетки дозируют с учетом веса животного. Терапевтическая дозировка доксициклина составляет 10 мг/кг живого веса, применяется раз в день в течение 7 дней подряд, или при лечении эрлихиоза в течение 28 дней подряд, или на усмотрение ветврача.

Применение:
Таблетку необходимо разделить пополам по бороздке вдоль таблетки. Для уменьшения вероятности повторного заболевания эрлихиозом требуется осмотр ветеринара во время и после лечения. Тем не менее, необходимо учитывать возможность повторного заболевания в результате повторного заражения при контакте с клещами-переносчиками, и предусмотреть профилактику против повторного заражения.

Меры предосторожности:
Следуйте рекомендованным схемам применения и дозировке. Вносить изменения в рекомендованные дозировки при использовании препарата может только ветврач. В отличие от других тетрациклинов доксициклин не относится к нефротоксичным веществам, может применяться для животных с хроническим заболеванием почек и стареющих животных. Для собак и кошек с тяжелым заболеванием печени доксициклин применяют с особой осторожностью. У людей была выявлена нейротоксичность (доброкачественная внутричерепная гипертензия) при одновременном приеме с витамином А, а также возможность возникновения эритематозной волчанки. Согласно отчетам тетрациклины могут менять нормальное распределение микроорганизмов в пищеварительной системе.
Кошкам таблетки дают вместе с 5-6 мл воды (через шприц) или вместе с едой, во избежание побочных эффектов от введения этого препарата (повреждение пищевода).

Противопоказания и ограничения в использовании:
— Не давать животным с гиперчувствительностью к доксициклину в анамнезе.
— Не давать беременным или кормящим животным.
— Не давать щенкам и котятам в возрасте менее 30 (тридцати) дней.

Побочные эффекты:
Результаты клинического исследования подтвердили безопасность продукта в указанной дозировке 1 раз в день в течение 30 дней для собак и кошек старше 1 года.
Безопасность препарата не оценивалась на пожилых животных и животных во время периода случки.
Тетрациклины образуют хелатные соединения с фосфорным кальцием в зубах и костях; проникают в структуры, задерживают кальсификацию, и могут привести к гипоплазии зубной эмали, окрашивая ее в желтый, а затем в коричневый цвет. Несмотря на более низкий уровень хелатного соединения с доксициклином, не рекомендуется использовать препарат животным в период развития и роста зубов. Согласно отчетам из исследований самыми распространенными побочными эффектами являются тошнота, рвота, гиперчувствительность, небольшая лекарственная фоточувствительность. У кошек было выявлено сужение пищевода, лихорадка, депрессия.

Взаимодействие с другими препаратами:
Железо, алюминий, кальций, цинк, марганец уменьшают концентрацию в сыворотке крови и биодоступность тетрациклинов в результате их способности образовывать хелатные соединения с ионами металла. Доксициклин имеет довольно низкую аффинность с ионами кальция, тем не менее, рекомендуется делать 1-2-часовой перерыв до или после введения тетрациклина с этими препаратами. Тетрациклины могут понизить активность протромбина в плазме, а для животных, проходящих лечение антикоагулянтами, может потребоваться корректировка в дозировке. Сопутствующее введение тетрацциклина с теофиллином может ухудшить побочные действия на пищеварительный тракт. Присутствие h3-антигистаминных средств может уменьшить абсорбцию тетрациклинов. Тетрациклины не следует применять совместно с пенициллином и цефалоспорином в связи с ослаблением бактерицидного действия пенициллинов.
Антациды могут уменьшать биодоступность доксициклина на 85%. В таком случае интервал между введением этих препаратов должен составлять 2 часа или больше. Индукторы ферментов микросомального окисления, такие как фенобарбитал и фенитоин, снижают концентрацию доксициклина в плазме.
Витамины комплекса В, препараты железа, антациды и каолин снижают активность тетрациклинов.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
Хранить в оригинальной упаковке в прохладном, сухом месте, при температуре 15-30°С. Избегайте прямого попадания солнечного света, держите подальше от детей и животных.
Лекарство принимают под наблюдением ветеринарного врача.

Цефтриаксон O.L.KAR. — O.L.KAR. UA

Описание 

Кристаллический порошок почти белого или желтоватого цвета.

 

Состав

1 флакон содержит действующее вещество:

цефтриаксона натриевую соль — 1,0 г.

 

Фармакологические свойства

Цефтриаксон — антибиотик группы бета-лактамов, цефалоспорин III поколения, имеющий бактерицидный эффект. Механизм действия препарата связан с угнетением активности фермента траспептидазы, нарушением биосинтеза пептидогликана клеточной стенки микроорганизмов. Препарат обладает широким спектром действия: активен в отношении грамположительных аэробных: Staphylococcus aureus (включая штаммы, продуцирующие пенициллиназу), Staphylococcus epidermidis, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans; грамотрицательных аэробов: Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Klebsiella spp. (включая K. pneumoniae), Moraxella catarrhalis, Morganella morganii, Neisseria gonorrhoeae, N. meningitidis, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Serratia spp. (включая Serratia marcescens), Acinetobacter calcoaceticus, Pseudomonas aeruginosa; облигатных анаэробов:Bacteroides fragilis, Peptostreptococcus spp., Clostridium spp. (кроме Clostridium difficile). Обладает также активностью в отношении большинства штаммов следующих микроорганизмов: Providenda spp., Bacteroides bivius, Bacteroides melaninogenicus, Salmonella spp. (в том числе Salmonella typhi), Shigella spp., Streptococcus agaladiae, Providenda rettgeri, Citrobacter freundii. Препарат назначают при резистентности микрофлоры к другим препаратам цефалоспоринового ряда, аминогликозидам, пенициллинам и др. После введения препарат всасывается быстро и полностью. Биодоступность вещества составляет около 100%.

 

Применение 

Лечение у собак и кошек заболеваний органов дыхания, мочеполовой системы, кожи, мягких тканей и костей, отита, сепсиса, менингита, вызванных микроорганизмами, чувствительными к цефтриаксону; профилактика послеоперационных осложнений.

 

Дозировка

Препарат вводят внутримышечно или внутривенно один раз в сутки.

Для внутримышечного введения собакам содержимое одного флакона (1,0 г препарата) растворяют в 3,6 мл 1% раствора лидокаина или 0,25%-0,5% раствора новокаина или стерильной воды для инъекций. 1 мл приготовленного таким образом раствора содержит около 250 мг цефтриаксона.

Для введения котам содержимое одного флакона растворяют в 3,6 мл 0,25% -0,5% раствора новокаина или стерильной воды для инъекций. При применении котам не следует растворять препарат лидокаином. 1 мл приготовленного таким образом раствора содержит около 250 мг цефтриаксона.

Для внутривенного введения содержимое флакона растворяют в 9,6 мл стерильной воды для инъекций или 0,9% раствора натрия хлорида, или 5% раствора глюкозы. 1 мл приготовленного таким образом раствора содержит около 100 мг цефтриаксона.

Для капельного введения содержимое флакона растворяют в 100-250 мл 0,9% раствора натрия хлорида или 5% раствора глюкозы. Инфузию приготовленного раствора проводят в течение 20-30 минут со скоростью введения 60-80 капель в минуту.

Суточная доза препарата составляет 20-40 мг цефтриаксона на 1 кг массы тела животного. В случае необходимости кратность применения можно увеличить до 2 раз в сутки с дозировкой 10-20 мг цефтриаксона на 1 кг массы тела животного. Курс применения препарата составляет 5-10 суток, в зависимости от степени тяжести и течения заболевания.

 

Противопоказания 

Повышенная чувствительность к препаратам группы цефалоспоринов и другим бета-лактамным антибиотикам; почечная или печеночная недостаточность; период беременности.

 

Предостережения 

При лечении собак с использованием больших доз цефтриаксона в желчном пузыре могут образовываться камни. При повышенной чувствительности к лидокаину не рекомендуется использовать его 1% раствор в качестве растворителя.

 

Форма выпуска 

Стеклянные флаконы, закрытые резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками под обкатку по 1 г, упакованные в картонные коробки по 40 фл.

Хранение 

Сухое, темное, недоступное для детей место при температуре от 15 °С до 25 °С.

Срок годности — 3 года с даты изготовления.

Антибиотики ОАО «Биосинтез» Цефтриаксон — «Применение антибиотика Цефтриаксон в ветеринарии — после стерилизации и ампутации передней лапы у собаки. Отзыв обновлен — летняя прогулка Вафельки»

Вафелька — собака, которая всю жизнь жила на улице. Ела, что найдет и дадут добрые люди, и спала, где придется и откуда не выгоняют. Прошлым летом мы ее стерилизовали, поставили будку, в которой она могла прятаться от непогоды и спокойно спать, Вафелька получала двухразовое питание, наравне с маминой собакой, плюс бегала по всему городу и промышляла самостоятельно. Ну вот и допромышляла… самовыгул никогда ни к чему хорошему не приводил. Вафелька попала в неприятную историю, подробности нам неизвестны, а печальные последствия налицо — Вафелька лишилась передней лапы.

Фото не для нежных, чувствительных, ранимых. Я их делала не для удовольствия, чтобы пересматривать долгими зимними вечерами, а для отчета в группе помощи бездомным животным.

К ветеринару мы обратились относительно своевременно — собаки не было дома (в будке, на кормежке) примерно пять дней. Была проведена ампутация передней лапы по сустав, наложены швы саморассасывающимся шовным материалом. Собака возрастная. по нашим прикидкам — ей примерно 9 лет, и это второй наркоз в течение 12 месяцев, который она пережила. Но иммунитет, вопреки всем неблагоприятным условиям, у собаки хороший, и как после стерилизации, так и после ампутации она восстанавливалась хорошо.

После стерилизации Цефтриаксон ставили в день операции и потом еще в течение двух дней. разводили Новокаином — 4 мл Новокаина впрыскивали во флакон с порошком, тщательно взбалтывали, затем брали по весу собаки 1,5 мл и вводили внутримышечно. Врач сказал, что укол достаточно болезненный, поэтому место укола всегда массировали.

Никаких внешний проявлений — жидкого стула, отсутствия аппетита, рвоты, зуда, высыпаний — после применения антибиотика не было. Вафелька с аппетитом кушала, тем более, что получала хорошее питание — больная все-таки, стул был нормальный и регулярный. А относительно всего остального — собака не скажет. Но 10-дневный карантин она не выдержала, сбежала из места, где ее содержали отдельно от других животных (на улице еще две собаки живут, плюс хозяева отпускают своих кобелей на самовыгул), через неделю. Швы заживали хорошо, не было никаких выделений, ткань не воспалялась, даже ничем обрабатывать не пришлось — только попоны меняли.

После ампутации антибиотик ставили в течение недели. Первые два дня Вафельку наблюдал вет.врач, затем я забрала ее домой. Разводили препарат точно так же, так же брали по весу собаки (10-12 кг, она похудела после получения травмы) 1,5 мл, вводили внутримышечно. Затем флакон выбрасывали, использовать второй раз нельзя.

Вафля — собака очень спокойная и социальная. Никакой агрессии с ее стороны не было. Как могут реагировать другие животные на введение этого препарата — вопрос дискуссионный.

Первую неделю выделялась сукровица, потому что ампутированная конечность находилась в движении — собака гуляла на улице, переворачивалась, потягивалась. Обрабатывала Хлоргексидином.

Затем шовчики начали заживать, и ранка подсохла. Через две недели показались ветеринару, он сказал, что еще через неделю швы можно снять, а можно не снимать, хотя рассасываться они будут долго. Но. чтобы лишний раз не нервировать собаку, наверно, лучше не снимать.

Антибиотик — это препарат, который стоит применять только тогда, когда без него не обойтись. Так как у Вафли рана была нехорошая, уже несвежая, пахла гнилым мясом — антибиотика был необходим. Наверно, он обязателен при любом оперативном вмешательстве. Правда, ветеринарный врач при упоминании этого антибиотика прокомментировал его как «наш любимый Цефтриаксон» — не знаю, как трактовать этот комментарий, как негативный (вроде того, что знаем, что препарат тяжелый, но лучше него пока в практическом применении не нашли), или как позитивный. Но наш с Вафелькой опыт использования Цефтриаксона оба раза положительный.

Собака чувствует себя хорошо (физически, психологически ей неуютно в квартире с кошкой), много гуляет. Жизнь на трех лапах возможна.

Стоимость препарата не скажу, получала его в группе помощи бездомным животным бесплатно.

границ | Цефтриаксон снимает невропатическую боль в тройничном нерве за счет подавления пространственно-временной синаптической пластичности за счет восстановления транспортера глутамата 1 в спинном мозговом роге

Введение

Невралгия тройничного нерва (ТН) — одна из наиболее интенсивных орофациальных болей, поражающая одну или несколько ветвей 5-го черепного нерва (Finnerup et al., 2010; Scholz et al., 2019). Причины и патология невралгии тройничного нерва до конца не изучены, и лечение по-прежнему остается серьезной проблемой.Карбамазепин является препаратом первой линии, рекомендованным Американской академией неврологии и Европейской федерацией неврологических обществ, который может эффективно облегчать ТН, однако побочные эффекты становятся очевидными при появлении лекарственной устойчивости (Finnerup et al., 2010; Scholz). и др., 2019). Значительной части больных приходится отказываться от препарата и выбирать хирургическое лечение. Лечение станет чрезвычайно проблематичным для пациентов с рецидивирующими симптомами после операции, в то время как частота рецидивов колеблется от 20% до 50% через 5 лет после операции (Tronnier et al., 2001; Ченг и др., 2014). Поэтому для замены традиционных необходимы более эффективные и новые препараты.

Транспортер глутамата 1 (GLT-1) представляет собой натрий-зависимый переносчик глутамата с высоким сродством, который в большом количестве локализован в астроцитах и ​​окончаниях аксонов в некоторых частях зрелого мозга (Rothstein et al., 1994; Chen et al., 2002). , 2004; Фернесс и др., 2008; Роуз и др., 2009). В спинном мозге GLT-1 также в значительной степени обнаружен в астроцитах и ​​растущих аксональных волокнах, особенно в сером веществе (Rothstein et al., 1994; Данболт, 2001; Ян и др., 2014). Глутамат является основным возбуждающим нейротрансмиттером, участвующим в ноцицептивной обработке и синаптической пластичности, во время которых может происходить транспортировка ионотропных глутаматных рецепторов (Malinow and Malenka, 2002; Larsson and Broman, 2011; Liu and Salter, 2010). При нейропатической боли наблюдались нарушения как высвобождения, так и поглощения глутамата (Inquimbert et al., 2012; Di Cesare Mannelli et al., 2015). GLT-1 имеет решающее значение для модуляции динамического баланса нейротрансмиттеров в синаптической щели вместе с переносчиком глутамата/аспартата (GLAST) для достижения более чем 95% поглощения глутамата (Danbolt, 2001; Kanai et al., 2013). В случае подавления GLT-1 концентрация внеклеточного глутамата будет увеличена, что приведет к эксайтотоксическому повреждению нейронов, которое может иметь место в процессе бокового амиотрофического склероза (Rothstein et al., 1995), травме позвоночника (Rao et al. , 1998; Lepore et al., 2011) и невропатия (Jacob et al., 2007; Hazell et al., 2010).

Предыдущие исследования показали, что аномальная экспрессия GLT-1 была связана с развитием невропатической боли на различных животных моделях, таких как хроническое констрикторное повреждение седалищного нерва (SN-CCI; Hu et al., 2010; Suzuki et al., 2012), лигирование спинномозговых нервов (SNL; Hobo et al., 2011) и сохранение повреждения седалищного нерва (Inquimbert et al., 2012). На некоторых моделях боли в начальной фазе наблюдалась временная активация GLT-1 (Yamada et al., 1998; Cavaliere et al., 2007), что считалось компенсаторным эффектом в ответ на увеличение высвобождения глутамата. . Однако экспрессия GLT-1 стабильно снижалась на более поздних стадиях повреждения периферических нервов (Weng et al., 2014; Ян и др., 2014). Понижающая регуляция GLT-1 способствует увеличению концентрации глутамата в синаптической щели, что может привести к активации отдаленных спинномозговых нейронов и астроцитарных клеток (Nie and Weng, 2010; Nie et al., 2010). Было показано, что избыточное внеклеточное накопление глутамата вызывает внутриклеточное высвобождение Ca 2+ в астроцитарных клетках (Rojas et al., 2007; Yoshizumi et al., 2012), что может усиливать первичные афференты. Основываясь на вышеизложенных данных, GLT-1 рассматривается как многообещающая терапевтическая мишень при нейропатической боли (Hu et al., 2010; Рамос и др., 2010 г.; Николсон и др., 2014; Челини и др., 2017; Батлер, 2018).

Все больше данных указывает на то, что астроциты регулируют синаптическую передачу и пластичность посредством модуляции баланса возбуждения и торможения, особенно повышенной эффективности глутаматергической нейротрансмиссии (Bonansco and Fuenzalida, 2016). При невропатических состояниях, таких как эпилепсия, глутамат-опосредованная глиотрансмиссия считалась предполагаемым сигналом повышенной возбудимости нейронов (Tang, Lee, 2001).Поглощая глутамат в синаптической щели, переносчик глутамата, вероятно, поддерживает баланс возбуждения и торможения и предотвращает аберрантные сигналы, которые могут запускать каскад событий пластичности. Предыдущие исследования доказали, что GLT-1 играет критическую роль в индукции LTP и поддержании долгосрочных изменений синаптической эффективности (Katagiri et al., 2001; Levenson et al., 2002). Однако точная регуляция GLT-1 в коммуникации астроцитов с нейронами и синаптической пластичности еще предстоит изучить.Таким образом, предполагается, что изменения GLT-1, вызванные повреждением нерва, могут изменять пространственно-временные характеристики и кодирование ноцицептивных сигналов.

β-лактамный антибиотик цефтриаксон (Cef), который может повышать экспрессию GLT-1 in vivo и in vitro (Rothstein et al., 2005). В предыдущих исследованиях было показано, что Cef обращает вспять подавление GLT-1 и повышает поглощение глутамата в моделях хронической боли, что впоследствии приводит к обезболивающему эффекту (Hu et al., 2010; Николсон и др., 2014; Батлер, 2018). Ожидается, что соединения Cef будут классом многообещающих анальгетиков, которые могут быть в сочетании с опиоидными анальгетиками для снижения толерантности (Rawls et al., 2010). Фармакологическое ингибирование GLT-1 дигидрокаинатом может обратить вспять обезболивающий эффект Cef у крыс с диабетом (Gunduz et al., 2011). Более того, Cef может оказывать терапевтическое действие, снижая активацию глии при невропатической боли (Ramos et al., 2010; Nicholson et al., 2014). Однако точные терапевтические эффекты Cef и его модуляция транспортной системы глутамата в TN до сих пор не ясны.Поэтому мы разработали эксперименты и рассмотрели следующие аспекты Cef: (1) антиноцицептивные эффекты длительного введения Cef в крысиной модели TN; (2) эффекты длительного введения Cef на уровень экспрессии GLT-1 в ядре тройничного нерва каудального отдела спинного мозга (Sp5C), который известен как медуллярный задний рог, принимающий первичные ноцицептивные афференты от сенсорных клеток полулунных ганглиев. тройничного нерва; (3) влияние длительного введения Cef на пространственно-временные сетевые ответы возбуждающих постсинаптических полевых потенциалов (fEPSP), вызванных электрической стимуляцией Sp5, зарегистрированных на срезе спинного мозга спинного мозга с использованием многоэлектродной матрицы (MEA, 8 × 8) записи система.

Материалы и методы

Животные и хирургия

Эксперименты выполнены на крысах-самцах-альбиносах Sprague-Dawley (возраст 3–4 недели, вес 80–120 г), предоставленных Центром лабораторных животных Четвертого военно-медицинского университета (ЧВМУ). Животных содержали по 5 особей в клетке в стандартных лабораторных условиях (12:12-часовой цикл день/ночь, температура 22-26°С и влажность воздуха 55-60%), с доступом к пище и воде вволю . Все эксперименты были одобрены Институциональным комитетом по уходу и использованию животных при FMMU и соответствовали рекомендациям руководств ARRIVE, U.K. Закон о животных (научные процедуры) 1986 г. и соответствующие руководства, Директива ЕС 2010/63/ЕС об экспериментах на животных, Руководство Национального института здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных (Публикация № 85–23, пересмотренная в 1996 г.). Критически соблюдались также этические рекомендации Международной ассоциации по изучению боли для исследования экспериментальной боли у находящихся в сознании животных. Были предприняты усилия, чтобы свести к минимуму количество используемых животных и их страдания.

Для подготовки модели нейропатической боли тройничного нерва (TNP) была выполнена односторонняя перевязка подглазничного нерва (ION) в соответствии с протоколами, описанными Imamura (Imamura et al., 1997). Крыс анестезировали пентобарбиталом натрия (50 мг/кг, внутрибрюшинно) и внутриротовой разрез делали вдоль деснево-буккального края, чтобы обнажить ION (рис. 1А). Вокруг ИОН свободно завязывали двойную лигатуру с 5–0 хромовыми кишками (на расстоянии 2 мм). После перевязки разрез зашивают шелковой тканью. У ложнооперированных крыс ИОН выделяли с использованием той же процедуры, за исключением того, что нерв не перевязывали.

Рисунок 1 . Хронология экспериментального дизайна и процедур, а также влияние повторного системного введения цефтриаксона (Cef) на гиперчувствительность к боли, вызванную CCI-ION. (A) Хронология экспериментального дизайна и процедур (подробности см. в разделе «Материалы и методы» в тексте). (B,C) Изменения термической латентности и механического порога отдергивания подушечек усов у крыс с имитацией + физиологический раствор ( n = 18), CCI-физиологический раствор ( n = 18), CCI-Cef ( n = 18) и Шам + Цеф ( n = 18). Стрелки указывают на начало введения препарата. Данные представлены как среднее ± SEM. * p < 0,05, CCI + физиологический раствор vs.Имитация + физиологический раствор; # p < 0,05, CCI + Cef против CCI + физиологический раствор. CCI-ION, хроническое сужение подглазничного нерва; МЭА, многоэлектродная решетка.

Поведенческие тесты

Поведенческие анализы проводились до и после операции с 1 по 14 день (рис. 1А). Крыс индивидуально помещали в пластиковую клетку за 1 ч до теста для адаптации к окружающей среде. Набор нитей фон Фрея использовали для измерения механической чувствительности подушечки усов на лице, как описано ранее, в соответствии с методом «вверх-вниз» с интенсивностью отсечки 15 g (Vos et al., 1994). Термическую чувствительность подушечки усов на лице оценивали с использованием опубликованного метода (Imamura et al., 1997). Была подготовлена ​​специальная коробка с отверстием в передней части, через которое может просунуть морда крысы, кроме отверстия, другая часть передней части была закрыта белой бумагой, закрывавшей обзор крысе, когда ее морда высовывалась из отверстия. . На центры подушечки усов воздействовали тепловым раздражителем, способным повысить температуру кожи до 45–50°С за 10 с. Время отсечки было установлено на уровне 20 с, чтобы предотвратить повреждение тканей.Латентный период отдергивания измеряли трижды для каждой крысы с интервалом в 2 мин.

Подготовка срезов

Крыс анестезировали пентобарбиталом натрия (50 мг/кг, внутрибрюшинно), а затем перфузировали оксигенированной N-метил-D-глюкаминовой (NMDG) искусственной спинномозговой жидкостью (NMDG ACSF), содержащей 92 мМ NMDG, 2,5 мМ KCl, 1,25 мМ NaH 2 PO 4 , 30 мМ NaHCO 3 , 20 мМ HEPES, 25 мМ глюкозы, 2 мМ тиомочевины, 5 мМ Na-аскорбата, 3 мМ Na-пирувата, 0,5 мМ CaCl 2 мМ, и 109060 мМ 2 ·6H 2 O (pH 7.3–7.4) в соответствии с протоколом Тинга (Ting et al., 2014), мозговая ткань и ткань верхнего шейного отдела позвоночника была быстро изолирована и погружена в предварительно насыщенный кислородом NMDG ACSF. Ткань фиксировали на агаровом столике с помощью цианоакрилатного клея, чтобы приклеить к планшету, а затем разрезали на корональные срезы толщиной 400 мкм с помощью Vibratome (Dosaka, DTK-1000, Япония). Срезы переносили в камеру с непрерывно перфузируемой оксигенированной HEPES, содержащей ACSF, содержащую 92 мМ NaCl, 2,5 мМ KCl, 1,25 мМ NaH 2 PO 4 , 30 мМ NaHCO 3 , 20 мМ HEPES, 25 мМ глюкозы, 2 мМ тиомочевины, 5 мМ Na-аскорбата, 3 мМ Na-пирувата, 2 мМ CaCl 2 и 2 мМ MgCl 2 ·6H 2 O.Перед записью МЭА срезы восстанавливали не менее 2 ч при комнатной температуре.

Электрофизиологические записи

Электрофизиологические записи были выполнены на 14–15 день после операции (рис. 1А). Для записи fEPSP на срезе мозгового вещества, содержащем Sp5C, использовали 64 (8 × 8) многоэлектродную чашечную систему (MED-64, Alpha-Med Scientific, Japan) (рис. 4A). После восстановления в HEPES с ACSF в течение 2 часов срез переносили на зонд MED-64 (P515A, 50 × 50 мкм, интервал 150 мкм), чтобы покрыть спинной рог медуллярного мозга, и к срезу прикрепляли нейлоновый сетчатый анкер, чтобы обеспечить стабильность.Срез непрерывно перфузировали оксигенированным регистрирующим ACSF, содержащим 119 мМ NaCl, 2,5 мМ KCl, 1,25 мМ NaH 2 PO 4 , 24 мМ NaHCO 3 , 12,5 мМ глюкозы, 2 мМ CaCl 2 и мМ. MgCl 2 ·6H 2 O при скорости потока 2 мл/мин с помощью перистальтического насоса (PERI-STARTM, PI, США) при комнатной температуре. Через 10–15 мин адаптации над Sp5 был организован как минимум один канал, обеспечивающий электростимуляцию с помощью визуальной локализации через камеру прибора с зарядовой связью (DP70, Olympus, Япония).Двухфазный импульс прямоугольной формы (0,1 Гц, 0,2 мс, 10–199 мкА), генерируемый программным обеспечением для сбора данных (Conductor 3.0, Panasonic Alpha-Med Sciences, Япония), прикладывался к месту электрического стимула, вызванные пВПСП усиливались с помощью 64-канальный усилитель и оцифрован с частотой дискретизации 20 кГц. Кривая вход-выход (I-O) была получена путем измерения амплитуды и наклона fEPSP в ответ на градиентную стимуляцию от 20 до 199 мкА с ступенчатым увеличением на 20 мкА. Более высокие интенсивности (> 199 мкА) не применялись из-за ограничений генератора стимулов.Затем интенсивность стимула для теста регулировали, чтобы обеспечить 40–60% максимального ответа на основе кривой IO. Что касается индукции долговременной потенциации (ДП), то использовался протокол высокочастотной стимуляции (ВЧС, 10 вспышек/с, 4 импульса по 0,2 мс с 60 мкА при 100 Гц для каждой вспышки), как описано ранее (Heusler et al. , 2000; Хьорневик и др., 2008; Чжао и др., 2009). Тестовый стимул подавался повторно каждые 10 минут в течение 90 минут, и ответы измерялись как среднее значение пяти отдельных следов.В другой серии экспериментов CNQX (10 мкМ) и (ТТХ 0,5 мкМ) перфузировали в срезы со скоростью 2 мл/мин, чтобы определить, являются ли потенциалы сетевого поля fEPSP, опосредованными ионными рецепторами глутамата. После этого срезы промывали свежим ACSF и тестировали до тех пор, пока ответы не становились стабильными. Подробности использования системы MED-64 можно найти в наших предыдущих публикациях (Zhao et al., 2009; Wang et al., 2010; Yu et al., 2017).

Рисунок 2 . Распределение и совместная локализация профилей транспортера глутамата 1 (GLT-1) и глиального фибриллярного кислого белка (GFAP) в спинном роге продолговатого мозга.Панели (A-D) показывают тройную маркировку DAPI (синий), GLT-1 (красный) и GFAP (зеленый). Панель 1 (A’–D’) показывает вставки из панелей (A–D) . На панели (D’) показана вставка из панели (D’) . Масштаб = 300 мкм для (A–D) ; 150 мкм для (A’–D’) и 50 мкм для (D”) . Стрелки указывают на совместную локализацию GLT-1 и GFAP (желтый) в профилях астроцитов.

Рисунок 3 . Обратные эффекты повторного системного введения цефтриаксона (Cef) на индуцированную CCI-ION потерю белка GLT-1 в спинном роге медуллярного мозга.На панелях (A,B) показана экспрессия белка GLT-1 в ипсилатеральном спинном роге продолговатого мозга крыс с Sham + солевым раствором ( n = 5), CCI-солевым раствором ( n = 5), CCI-Cef ( н = 5) и Шам + Цеф ( н = 5). Данные представлены как среднее ± SEM. * p < 0,05, CCI + физиологический раствор против имитации + физиологический раствор; # p < 0,05, CCI + Cef против CCI + физиологический раствор. (C, D) Иммунофлуоресцентное окрашивание GLT-1 (красный) и DAPI (синий) в ипсилатеральном спинном роге продолговатого мозга в группах CCI + физиологический раствор ( n = 12) и CCI + Cef ( n = 12) .Данные представлены как среднее ± SEM. * p < 0,05, CCI + Cef по сравнению с CCI + физиологический раствор. GLT-1, переносчик глутамата 1.

Рисунок 4 . Расположение остро диссоциированного среза спинного рога медуллярного мозга на регистрирующей пластине MEA и фармакологическая идентификация вызванных сетевых потенциалов локального поля (eLFP). На панели (A) показан типичный пример записи MEA (8 × 8, 64 электрода) на срезе спинного рога спинного мозга крысы (Sp5C). На верхней панели показаны репрезентативные сетевые следы eLFP, зарегистрированные в 63 местах после электрической стимуляции спинного тракта тройничного нерва (Sp5, красная точка для № 49).Вертикальная шкала – амплитуда потенциалов (0,5 мВ), горизонтальная шкала – время (20 мс). Нижняя панель показывает типичную форму волны eLFP, записанную с электрода 51 # (серая стрелка), наклон был рассчитан как отношение амплитуды (b) к временному интервалу (a). На панели (B) показан блокирующий эффект eLFP при перфузии TTX (1 мкМ; точки означают 36 электродных точек из n = 6 срезов). На панели (C) показан подавляющий эффект eLFP при перфузии CNQX (10 мкМ; точки означают 66 электродных точек из n = 8 срезов).* p < 0,05 , препарат по сравнению с исходным уровнем. Столбики погрешностей: ±SEM.

Для количественной оценки отношения I-O амплитуда и наклон fEPSP были проанализированы с помощью проводника MED-64. Общее количество эффективных пВПСП (>20% от исходного уровня) подсчитывалось экспериментатором, не осведомленным о плане эксперимента, и усреднялось по срезам для каждой группы. Для индукции LTP 20%-ное увеличение амплитуд fEPSP по сравнению с исходным уровнем, которое могло поддерживаться более 30 минут, было установлено как успешная индукция (рис. 6B).Амплитуды пВПСП нормализовали и выражали в процентах к исходному значению.

Рисунок 5 . Обратные эффекты повторного системного введения цефтриаксона (Cef) на CCI-ION-индуцированное усиление реакции возбуждающих постсинаптических потенциалов сетевого поля (fEPSP). На панелях (A–C) показаны типичные примеры записей MEA (8 × 8, 64 электрода) на срезе спинного рога спинного мозга крысы (Sp5C) в группах Sham + физиологический раствор, CCI + физиологический раствор и CCI + Cef после трех интенсивностей ( перекрывающиеся следы: зеленый для 20 мкА, красный для 100 мкА и синий для 180 мкА) электрической стимуляции на Sp5 (красная точка).Панель (D) показывает среднее количество вызванных пВПСП после электрической стимуляции с серией интенсивностей от 20 мкА до 199 мкА в симуляции + физиологический раствор ( n = 10), CCI + физиологический раствор ( n = 10) и группы CCI-Cef ( n = 9). Панель (E) показывает усредненный наклон вызванных пВПСП после электрической стимуляции с серией интенсивностей от 20 мкА до 199 мкА в симуляции + физиологический раствор ( n = 10), CCI + физиологический раствор ( n = 10) и CCI-Cef ( n = 9) групп.Данные панелей (D,E) представлены как среднее ± SEM. * p < 0,05 , CCI + физиологический раствор против имитации + физиологический раствор; # p < 0,05 , CCI + Cef по сравнению с CCI + физиологический раствор.

Рисунок 6 . Обратные эффекты повторного системного введения цефтриаксона (Cef) на вызванное CCI-ION усиление долговременной потенциации (LTP) индукции и поддержания. Панель (A) показывает скорость индукции LTP, индуцированной высокочастотной импульсной стимуляцией (10 импульсов/с, 4 × 0.импульсы по 2 мс при частоте 100 Гц, 60 мкА для каждой вспышки) у крыс, получавших симуляцию + физиологический раствор ( n = 13), CCI + физиологический раствор ( n = 13), CCI-Cef ( n = 15) и симуляцию + Cef ( n = 15) групп. (B) Динамика LTP у крыс групп Имитация + физиологический раствор (15 точек электродов от двух крыс), CCI-физиологический раствор (49 точек электродов от семи срезов) и CCI + Cef (24 точки электродов от пяти срезов). Данные представлены как среднее ± SEM. * p < 0,05, CCI + физиологический раствор против имитации + физиологический раствор; # р < 0.05, CCI + Cef по сравнению с CCI + физиологический раствор.

Вестерн-блот

среза костного мозга каждой группы были быстро удалены и промыты PBS после записи MED-64 (рис. 1А), а затем ткань была гомогенизирована в буфере для лизиса RIPA в течение 10 минут на ледяной бане. Лизаты центрифугировали 10 мин при 12000 об/мин при 4°С. Набор для анализа белка BCA использовали для измерения концентрации белка. Образцы (50 мкг белка) помещали на гель SDS-PAGE, обрабатывали при 80 В в течение 30 мин, затем при 120 В в течение 1 ч, а затем переносили на нитроцеллюлозную мембрану (Bio-Rad).После блокады 5% обезжиренным молоком в PBS в течение 1 часа мембрану инкубировали в течение ночи при 4°C с первичным кроличьим антителом против GLT-1 (1:1000, Abcam, Великобритания) и мышиным антителом против β-актина (1:1000, Abcam, Великобритания). 2000, Абкам). После трехкратной промывки (каждый раз по 10 мин) в PBST мембраны инкубировали со вторичным HRP-конъюгированным козьим антикроличьим антителом (1:2000, Bio-Rad) в течение 2 ч при комнатной температуре. Мембраны обрабатывали раствором для усиления хемилюминесценции (Alpha Innotech Corp., США) и регистрировали сигналы с помощью FluorChem FC2 (Alpha Innotech Corp.).Плотность каждой полосы измеряли с помощью компьютерной системы анализа изображений (Bio-Rad, Калифорния, США) и нормализовали по интенсивности β-актина.

Иммунофлуоресценция

Ткани были получены через 10 дней после операции CCI-ION. После анестезии пентобарбиталом натрия (50 мг/кг, внутрибрюшинно) крысам транскардиально перфузировали PBS, а затем 4% параформальдегида в 0,1 М растворе PB. Продолговатый мозг удаляли и помещали в 4% параформальдегид на ночь при 4°C, а затем переносили в 30% раствор сахарозы в PBS для криозащиты.Ткани разрезали на коронарные срезы (25 мкм) на замораживающем микротоме СМ1900 (Leica, Германия). Срезы промывали в PBS и блокировали 10% козьей сывороткой в ​​PBS на 2 ч, а затем инкубировали в первичных антителах в течение ночи при 4°C. Отмытые PBS три раза (по 10 мин каждый), срезы инкубировали со вторичными антителами в течение 2 ч в темноте при комнатной температуре. Основными антителами, использованными в настоящем исследовании, были кроличьи анти-GLT-1 (1:200, Abcam, Великобритания) и мышиные антиглиальные фибриллярные кислые белки (GFAP; 1:200, Sigma-Aldrich, St.Луис, Миссури, США). Вторичными антителами были Cy3 (552 нм) против кролика (1:100, Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) и изомер изотиоцианата флуоресцеина (FITC; 494 нм) против мыши. После этого к срезам добавляли DAPI (1:2000, Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) на 10 мин. Срезы промывали PBS и помещали на предметные стекла. Для получения изображений использовали конфокальный флуоресцентный микроскоп с лазерным сканированием (Olympus FV1000, Япония), а интенсивность флуоресценции измеряли с помощью программы обработки изображений ImageJ (Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд, США).

Наркотики

β-лактамный антибиотик цефтриаксон натрия (Cef) был приобретен у Roche Corp (Швейцария) и растворен в физиологическом растворе (0,9% NaCl) в концентрации 0,2 г/мл. Раствор Cef вводили внутрибрюшинно (i.p.) (200 мг/кг). Введение Cef начинали с 1-го дня после операции CCI-ION и продолжали в течение пяти дней подряд (рис. 1А).

Статистика

Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Для параметрических данных использовался однофакторный дисперсионный анализ с LSD апостериорными поправками и критерием t для независимой выборки (двусторонний), в то время как однофакторный дисперсионный анализ Краскела-Уоллиса с апостериорными поправками Бонферрони и Манном-Уитни U -тест использовали для непараметрических данных по результатам нормальности теста Шапиро-Уилка и равной дисперсии теста Левена, а критерий хи-квадрата Пирсона с точными тестами Фишера использовали для четырехкратных табличных данных (подробнее см. Дополнительную таблицу S1). ).Все статистические анализы проводились с использованием программного обеспечения SPSS 25.0. P < 0,05 считалось статистически значимым. Обложку выполнила программа GraphPad Prism 6.01 (GraphPad Software Inc., Сан-Диего, Калифорния, США).

Результаты

Антиноцицептивные эффекты многократного системного введения Cef на гипералгезию, индуцированную CCI-ION

По сравнению с имитационной группой, у крыс с CCI-ION развилась гиперчувствительность как к термической, так и к механической боли через 10 дней после операции (рис. 1B, C, * p < 0.001 и * p <0,001, CCI + физиологический раствор по сравнению с симуляцией + физиологический раствор, подробности статистического анализа см. в дополнительной таблице S1). Однако гиперчувствительность к термической и механической боли, вызванная CCI-ION, подавлялась через 5 дней внутрибрюшинно. введения Cef по сравнению с контролем носителя (рис. 1B, C, # p < 0,001 и # p = 0,001 на 10-й день, CCI + Cef по сравнению с CCI + физиологический раствор, подробности статистического анализа см. в Дополнении. Таблица S1). Такая же обработка Cef не оказала никакого влияния на базальную механическую и термическую чувствительность (рис. 1B, C, см. Дополнительную таблицу S1).Наблюдения за течением времени показали, что гиперчувствительность к термической боли была более чувствительна к лечению Cef, чем гиперчувствительность к механической боли (рис. 1B, C).

Обратные эффекты повторного системного введения Cef на индуцированную CCI-ION потерю экспрессии GLT-1 в спинном роге

Как сообщалось ранее, двойное иммунофлуоресцентное мечение показало совместную локализацию GLT-1 и GFAP, специфического маркера астроцитов, в спинном мозговом роге крыс (рис. 2).По сравнению с плацебо-контролем, CCI-ION приводил к значительной потере экспрессии белка GLT-1 в спинном роге продолговатого мозга при анализе на 15-й день после операции (рис. 3A, B, * p = 0,009, CCI + физиологический раствор по сравнению с симуляцией + физиологический раствор, см. дополнительную таблицу S1). Однако снижение экспрессии GLT-1, вызванное CCI-ION, полностью устранялось через 5 дней внутрибрюшинного введения. введения Cef по сравнению с контролем носителя (рис. 3A-D, * p < 0,001 для иммунофлуоресцентного мечения и # p = 0.009 для вестерн-блоттинга, CCI + Cef по сравнению с CCI + физиологический раствор, подробности статистического анализа см. в дополнительной таблице S1). Как и в поведенческом тесте, такое же лечение Cef не оказало никакого влияния на уровень экспрессии GLT-1 в фиктивной группе крыс (рис. 3A, B, см. Дополнительную таблицу S1).

Обратные эффекты повторного системного введения Cef на CCI-ION-индуцированный ответ Enhanced Network fEPSPs и индукцию и поддержание LTP

На рис. 4А показано расположение регистрирующей антенны МЭД-64 с 64 каналами (матрица 8 × 8) над срезом спинного рога медуллярного мозга, где один канал (см. красную точку) оставался для электрической стимуляции Sp5, а другие каналы использовались. для одновременных записей сетевых пВПСП в спинном роге спинного мозга (см. нижнюю часть рисунка 4А для типичной формы волны пВПСП, записанной из канала 51#, стрелки для 1#–8# и 56#–64# на верхней панели указывают на порядок электродной решетки).Полевые потенциалы локальной сети, активируемые Sp5, могут быть полностью заблокированы TTX (рис. 4B) и частично заблокированы CNQX (рис. 4C), что свидетельствует о посредничестве сетевых fEPSP как потенциалами действия, продуцируемыми активацией потенциалзависимых натриевых каналов (VGSC), так и ионные не-NMDA и, возможно, NMDA глутаматные рецепторы (Zhao et al., 2009; Wang et al., 2010; Yu et al., 2017).

Через 14–15 дней после CCI-ION пространственное количество fEPSP, вызванных Sp5, было значительно увеличено при тестировании с более высокой интенсивностью электрической стимуляции (140–200 мкА) по сравнению с ложным контролем (рис. 5A, B, D). , * р = 0.029 CCI + физиологический раствор против имитации + физиологический раствор, см. дополнительную таблицу S1). Кривая IV была смещена влево в группе CCI-ION по сравнению с фиктивным контролем (рис. 5A, B, E, * p = 0,004 CCI + физиологический раствор по сравнению с симуляцией + физиологический раствор, см. Дополнительную таблицу S1). Однако повторные и.п. лечение Cef обратило как CCI-ION-расширенную пространственную сеть fEPSPs (рис. 5B – D, # p = 0,027 CCI + Cef по сравнению с CCI + физиологический раствор, см. Дополнительную таблицу S1), так и CCI-ION-продуцируемую влево -сдвиг ВАХ (рис. 5Б,С,Д, # p = 0.027 CCI + Cef по сравнению с CCI + физиологический раствор, см. дополнительную таблицу S1) по сравнению с контролем-носителем.

Что касается воздействия Cef-лечения на индукцию и поддержание LTP, применяли кондиционирующую стимуляцию через электростимулирующий электрод (10 импульсов в секунду, 4 импульса по 0,2 мс при 100 Гц, 60 мкА для каждого импульса). Как показано на рисунке 6A, скорость индукции LTP также резко увеличилась в группе CCI-ION примерно на 77% по сравнению с 15,4% в группе имитации ( p = 0.005, CCI + физиологический раствор против имитации + физиологический раствор, см. дополнительную таблицу S1). Тем не менее, повышенная скорость индукции LTP была отчетливо обращена вспять повторным системным лечением Cef (рис. 6A, P = 0,030, CCI + Cef против CCI + физиологический раствор: 33,33% против 76,92%, см. Дополнительную таблицу S1). Лечение Cef не могло изменить скорость индукции в ложном контроле (рис. 6A, P = 0,221, имитация + Cef против имитации + физиологический раствор: 40,00% против 15,38%, см. Дополнительную таблицу S1). CCI-ION привел к усилению LTP с точки зрения как амплитуды, так и временной динамики по сравнению с фиктивным контролем (рис. 6B, P = 0.001, CCI + солевой раствор по сравнению с имитацией + солевой раствор, см. дополнительную таблицу S1), в то время как повторное системное лечение Cef оказывало обратный эффект на такое усиление по сравнению с контролем-носителем (рис. 6B, P = 0,024, CCI + Cef по сравнению с контролем). CCI + физиологический раствор, см. дополнительную таблицу S1).

Обсуждение

Основные результаты настоящего исследования заключаются в следующем: (1) повторное системное введение Cef может смягчить как орофациальную термическую, так и механическую гиперчувствительность к боли, вызванную CCI-ION у крыс, в то время как такое же лечение не оказывает никакого влияния на базальную боль. чувствительность, что свидетельствует о потенциальном терапевтическом использовании препарата для профилактики клинико-патологической боли; (2) терапевтический эффект Cef на CCI-ION-индуцированную ТН заключался в восстановлении экспрессии GLT-1 в спинном роге продолговатого мозга, которая была дефицитной во время невропатических процессов; (3) дефицит GLT-1 может приводить к дисфункциональной синаптической пластичности в спинных рогах продолговатого мозга, проявляющейся усилением как пространственной, так и временной элонгации сетевых синаптических ответов с точки зрения увеличения числа пВПСП, смещения влево кривой IV и усиленного индукция и поддержание LTP; и (4) повторное системное введение Cef может обратить вспять аномальную пространственно-временную синаптическую пластичность за счет восстановления экспрессии GLT-1 в спинном мозговом роге при CCI-ION-индуцированном нейропатическом состоянии тройничного нерва.

Вклад дефицита GLT-1 спинного рога спинного мозга в развитие нейропатической боли тройничного нерва

Глутамат служит основным возбуждающим нейротрансмиттером в центральной нервной системе (ЦНС) и играет критическую роль в возбуждающей синаптической передаче через , действуя на его ионные (AMPA/NMDA) и/или метаботропные рецепторы (Ozawa et al., 1998) . Хорошо известно, что повреждения как периферических тканей, так и нервов могут вызывать центральную сенсибилизацию или аномальную синаптическую пластичность в задних рогах спинного мозга, что связано с глутаматергической нейротрансмиссией (Woolf and Thompson, 1991; Larsson and Broman, 2011).Однако за последние десятилетия огромное количество исследований было сосредоточено на терапевтической стратегии, нацеленной на антагонисты и блокаторы различных подтипов рецепторов глутамата, и меньшее количество было сосредоточено на том, как восстановить дисфункции высвобождения, обратного захвата и метаболизма глутамата во время процессов патологическая боль. Ранее было обнаружено, что долгосрочное аномальное внеклеточное повышение высвобождения спинального глутамата вызывается периферической воспалительной болью (Yan et al., 2009). Также было обнаружено, что дисбаланс между возбуждающей и тормозной синаптической передачей и модуляцией существует в различных областях ЦНС из-за увеличения количества возбуждающих аминокислот (EAA) и снижения количества тормозных аминокислот (IAA) как при нейропатической, так и при воспалительной боли (Yan et al., 2009; Гонг и др., 2010 г.; Ван и др., 2018 г.; Цао и др., 2019). Эти предыдущие результаты убедительно свидетельствуют о том, что аномальный обратный захват пресинаптического высвобождения глутамата астроцитами GLT-1 или GLAST может привести к накоплению EAA в синаптической щели, которые постоянно активируют постсинаптические AMPA/NMDA-рецепторы и нижестоящие внутриклеточные каскады, что приводит к усилению ВПСП, связанному с хроническим боль (Danbolt, 2001; Kanai et al., 2013). В качестве доказательства можно отметить, что астроцитарная экспрессия GLT-1 может нарушаться как при повреждениях спинного мозга, так и периферических нервов, что приводит к подавлению белка GLT-1 и увеличению накопления внеклеточного глутамата (Rao et al., 1998; Джейкоб и др., 2007 г.; Ван и др., 2018). Кроме того, было показано, что аномальное подавление GLT-1 связано с развитием нейропатической боли, вызванной CCI-SN (Suzuki et al., 2012), SNL (Hobo et al., 2011) и SNI (Inquimbert). и др., 2012). В другом исследовании в некоторых моделях боли в начальной фазе наблюдалась временная активация GLT-1 (Yamada et al., 1998; Cavaliere et al., 2007), что считалось компенсаторным эффектом в ответ на усиление боли. высвобождение глутамата, однако экспрессия GLT-1 стабильно снижалась на более поздней стадии повреждения периферического нерва (Weng et al., 2014; Yan et al., 2014), что указывает на потенциальный вклад дефицита GLT-1 спинного рога продолговатого мозга в развитие TNP. В текущем исследовании мы предоставили новый ряд доказательств, подтверждающих это предположение, с помощью различных уровней анализов с точки зрения поведенческих, клеточных и молекулярных, а также электрофизиологических методов. Между тем, мы продемонстрировали, что повторное системное введение Cef в течение по крайней мере 5 дней может восстановить экспрессию белка GLT-1 в спинном роге продолговатого мозга, при этом аномальная пространственно-временная синаптическая пластичность, вызванная CCI-ION, впоследствии была восстановлена, а гиперчувствительность к боли значительно улучшилась.Поскольку было показано, что восстанавливающие эффекты Cef, повышающие экспрессию GLT-1 и увеличивающие обратный захват глутамата, также ответственны за облегчение невропатической боли другого происхождения (Hu et al., 2010; Ramos et al., 2010). ; Butler, 2018) и многократное системное введение Цеф не влияло на базальную болевую чувствительность у нормальных и ложных крыс, этот класс структурных аналогов может быть перспективным для лечения невропатической боли в клинике. Хотя повторное введение Cef в острой фазе (день 1 после CCI-ION) продемонстрировало свою эффективность в предотвращении возникновения состояния TNP в текущем исследовании, до сих пор неизвестно, будет ли такое же лечение Cef эффективным для облегчить хроническую фазу ТНП.Таким образом, необходимо провести будущее исследование для изучения терапевтического обезболивающего эффекта Cef при хронической фазе TNP.

Вклад дефицита GLT-1 спинного рога медуллярного мозга в аномальную пространственно-временную синаптическую пластичность, вызванную патологической болью

Хорошо известно, что повреждение как тканей, так и нервов на периферии может вызывать пространственно-временную синаптическую пластичность в ЦНС на разных уровнях от дорсальных рогов спинного мозга до первичной соматосенсорной коры (S1), передней поясной коры (ACC) и гиппокампа (Gong et al. ., 2010; Лю и др., 2013; Лу и др., 2014; Ю и др., 2017; Ван и др., 2018 г.; Цао и др., 2019). Пространственно-временная синаптическая пластичность при аномальном протекании может быть связана с развитием и поддержанием хронической боли и сопутствующих заболеваний, включая эмоциональные расстройства (тревога и депрессия) и когнитивный дефицит (Gong et al., 2010; Lyu et al., 2013; Liu and Chen, 2014; Лу и др., 2014; Ю и др., 2017; Ван и др., 2018; Цао и др., 2019). На уровне одного синапса срезы целых клеток показали, что частота миниатюрных и спонтанных возбуждающих постсинаптических токов (мВПСТ/сВПСТ) может быть значительно увеличена, в то время как частота тормозных постсинаптических токов (мТПСТ/сТПСТ) может быть отчетливо снижена при патологических состояниях. болевой синдром, свидетельствующий о нарушении баланса между высвобождением ЕУК и ИУК из пресинаптического компонента (Gong et al., 2010; Ван и др., 2018 г.; Цао и др., 2019). Этот дисбаланс между высвобождением ЕАА и ИУК в синаптической щели, вероятно, отвечает за аномальную пространственно-временную синаптическую пластичность, проявляющуюся в виде увеличенной амплитуды fВПСП, смещения влево кривой IV и увеличения скорости и величины индукции ДП (Zhao et al., 2009; Гонг и др., 2010; Лю и др., 2013; Лу и др., 2014; Ван и др., 2018; Цао и др., 2019). Более того, связанный с патологической болью дисбаланс между высвобождением EAA и IAA в синаптической щели может вызывать транслокацию или перенос GluR1 из цитозоля в клеточную мембрану (т.э., экстернализация), тогда как GluR2 и GABA A 1α из мембраны в цитозоль (т. е. интернализация), способствуя индукции и усилению LTP в ассоциации с рецепторами NMDA (Cao et al., 2019). В текущем исследовании мы также продемонстрировали, что CCI-ION может вызывать пространственно-временную синаптическую пластичность в спинном роге продолговатого мозга, а также демонстрировать повышенную амплитуду fEPSP, сдвиг I-V кривой влево и увеличение скорости и величины индукции LTP. CCI-ION-индуцированная пространственно-временная синаптическая пластичность может быть полностью обращена вспять повторным системным введением Cef, который может восстановить экспрессию GLT-1, что указывает на вклад дефицита GLT-1 в задних рогах спинного мозга в аномальную пространственно-временную синаптическую пластичность, вызванную невропатической болью.А именно, CCI-ION-индуцированный дефицит GLT-1 задних рогов продолговатого мозга будет приводить к накоплению глутамата в синаптической щели, что приводит к постоянной активации ионных AMPA/NMDA-рецепторов и внутриклеточных каскадов, которые необходимы для индукции и поддержания LTP. Этот процесс может усугубляться усиленными первичными афферентами (Sp5), поддерживаемыми чрезмерным внеклеточным накоплением глутамата, запускаемым внутриклеточным высвобождением Ca 2+ в астроцитарных клетках (Rojas et al., 2007; Yoshizumi et al., 2012). Хорошо известно, что скорость диффузии является одним из основных параметров клиренса глутамата (Piet et al., 2004), и этот процесс ускоряется переносчиками глутамата (например, GLT-1), экспрессируемыми в астроцитарных клетках (Tzingounis and Wadiche). , 2007). Аномальный дефицит переносчиков глутамата может непосредственно влиять на клиренс глутамата, что впоследствии приводит к выбросу глутамата через синаптическую щель и диффузии в отдаленные синапсы. На уровне пространственной сети, поскольку предыдущие исследования показали, что широкая активация отдаленных нейронов и астроцитарных клеток может быть вызвана обширным внеклеточным накоплением глутамата из-за дефицита GLT-1 в спинном спинном роге (Nie and Weng, 2010; Nie et al. ., 2010), широкое сетевое распространение пВПСП, наблюдаемое в наших текущих и предыдущих исследованиях (Zhao et al., 2009; Lyu et al., 2013; Lu et al., 2014; Cao et al., 2019), может быть хорошо объяснено. Конечно, в этот процессинг также могут быть вовлечены активация глутаматных mGluRs, высвобождение GABA A -опосредованного тонического торможения и активация молчащих синапсов (Voronin and Cherubini, 2004).

Что касается обратного эффекта Cef на дефицит GLT-1, вызванный CCI-ION, мало что известно о его механистическом действии.В текущем исследовании было обнаружено, что повторное системное введение Цеф может повышать экспрессию GLT-1 в спинном роге медуллярного мозга, предполагая его прямую или косвенную генетическую или эпигенетическую модуляцию генов GLT-1 в определенных астроцитарных клетках. В некоторых предыдущих исследованиях было обнаружено, что Cef может облегчать невропатическую боль посредством повышающей регуляции GLT-1, но это не могло полностью объяснить, как Cef работает на молекулярном и клеточном уровнях, с помощью некоторых предположений, то есть инактивации астроцитов (Nicholson et al., 2014) или астроцитарно-нейрональные двунаправленные коммуникации (Pasti et al., 1997; Ni et al., 2007). Теоретически прямая или непрямая генетическая или эпигенетическая модуляция генов GLT-1 в некоторых астроцитарных клетках с помощью Cef может быть объяснена 10-дневным отсроченным обезболивающим эффектом после 5-дневного системного введения Cef, наблюдаемым в текущем исследовании. Основные механизмы Cef-индуцированного восстановления экспрессии GLT-1 остаются неясными и требуют дальнейшего изучения в будущем.

Резюме: Цеф может уменьшать TNP путем подавления пространственно-временной синаптической пластичности посредством восстановления GLT-1 в медуллярном заднем роге тройничного нерва и является многообещающим в качестве новой терапевтической мишени для лечения TN, в частности, и других невропатических боли, в общем.

Заявление о доступности данных

Все наборы данных, представленные в этом исследовании, включены в статью/дополнительный материал.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию при четвертом военно-медицинском университете.

Вклад авторов

DH и JC разработали и руководили исследовательской работой. XL, TH, J-LW, R-RW и X-LW провели эксперименты и собрали данные. XL, TH, YW, X-BY, H-CZ, RD и JC внесли свой вклад в анализ и построение данных.JC, XL и DH составили рукопись.

Финансирование

Эта работа была частично поддержана грантами Национального фонда естественных наук Китая для DH (81771101), JC (81571072 и 31771159) и YW (31500854). Эта работа также была частично поддержана Фондом естественных наук провинции Хунань Китая (грант № 2019JJ40462) и грантом Key lab провинции Хунань (№ 2018TP1009).

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fncel.2020.00199/full#supplementary-material.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Ссылки

Бонанско, К., и Фуэнзалида, М. (2016). Пластичность возбудительно-тормозного баланса гиппокампа: отсутствие синаптического контроля в эпилептическом мозге. Нейронный.Пласт. 2016:8607038. дои: 10.1155/2016/8607038

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Батлер, С. (2018). Влияние индуктора переносчика возбуждающих аминокислот подтипа 2 (EAAT-2) цефтриаксона (антибиотика) на различные болевые ощущения у крыс. Скан. Дж. Пейн 2, 130–131. doi: 10.1016/j.sjpain.2011.05.003

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Цао Ф.Л., Сюй М., Гонг К.Р., Wang, Y., Wang, R.R., Chen, X.F., et al. (2019). Дисбаланс между возбуждающей и тормозной синаптической передачей в первичной соматосенсорной коре, вызванный стойкой ноцицепцией у крыс. Дж. Пейн 20, 917–931. doi: 10.1016/j.jpain.2018.11.014

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Кавальер, К., Чирилло, Г., Розария Бьянко, М., Росси, Ф., Де Новеллис, В., Майоне, С., и другие. (2007). Глиоз изменяет экспрессию и поглощение спинальных глиальных переносчиков аминокислот в модели невропатической боли у мышей. Нейрон. Глия биол. 3, 141–153. doi: 10.1017/s1740925x07000695

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Челини А., Броджи С., Паолино М., Ди Капуа А., Каппелли А., Джорджи Г. и др. (2017). Синтез и биологическая оценка новых нейропротекторных производных пиридазина в качестве активаторов возбуждающего переносчика аминокислот 2 (EAAT2). J. Med. хим. 60, 5216–5221. doi: 10.1021/acs.jmedchem.7b00383

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чен, В., Aoki, C., Mahadomrongkul, V., Gruber, C.E., Wang, G.J., Blitzblau, R., et al. (2002). Экспрессия вариантной формы переносчика глутамата GLT1 в культурах нейронов, а также в нейронах и астроцитах мозга крыс. J. Neurosci. 22, 2142–2152. doi: 10.1523/jneurosci.22-06-02142.2002

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чен В., Махадомронгкул В., Бергер У. В., Бассан М., ДеСильва Т., Танака К. и соавт. (2004). Транспортер глутамата GLT1a экспрессируется в окончаниях возбуждающих аксонов зрелых нейронов гиппокампа. J. Neurosci. 24, 1136–1148. doi: 10.1523/jneurosci.1586-03.2004

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ченг, Дж. С., Лим, Д. А., Чанг, Э. Ф., и Барбаро, Н. М. (2014). Обзор чрескожных методов лечения невралгии тройничного нерва. Нейрохирургия 10, 25–33; обсуждение 33. doi: 10.1227/NEU.00000000000001687

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ди Чезаре Маннелли, Л., Марколи, М., Микели, Л., Zanardelli, M., Maura, G., Ghelardini, C., et al. (2015). Оксалиплатин вызывает P2X7-зависимое высвобождение глутамата в коре головного мозга: болевой механизм, опосредованный паннексином 1. Нейрофармакология 97, 133–141. doi: 10.1016/j.neuropharm.2015.05.037

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фернесс, Д. Н., Денес, Ю., Ахтар, А. К., Росси, Д. Дж., Хаманн, М., Грутл, Н. Дж., и соавт. (2008). Количественная оценка поглощения глутамата синаптическими окончаниями гиппокампа и астроцитами: новое понимание нейронной роли возбуждающего переносчика аминокислот 2 (EAAT2). Неврология 157, 80–94. doi: 10.1016/j.neuroscience.2008.08.043

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Гонг К.Р., Цао Ф.Л., Хе Ю., Гао С.Ю., Ван Д.Д., Ли Х. и др. (2010). Усиленная возбуждающая и сниженная тормозная синаптическая передача способствуют стойкой индуцированной болью гиперреактивности нейронов в передней поясной коре. Неврология 171, 1314–1325. doi: 10.1016/j.neuroscience.2010.10.028

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Гюндуз, О., Олтулу, К., Булдум, Д., Гювен, Р., и Улугол, А. (2011). Антиаллодинические и антигипералгетические эффекты цефтриаксона у крыс с диабетом, индуцированным стрептозоцином. Неврологи. лат. 491, 23–25. doi: 10.1016/j.neulet.2010.12.063

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хейзелл, А.С., Шиди, Д., Оанеа, Р., Агуриан, М., Сан, С., Юнг, Дж.Ю., и соавт. (2010). Потеря астроцитарных переносчиков глутамата при энцефалопатии Вернике. Глия 58, 148–156.doi: 10.1002/glia.20908

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Heusler, P., Cebulla, B., Boehmer, G., and Dinse, H.R. (2000). Повторяющийся паттерн внутрикортикальной микростимуляции вызывает длительную синаптическую депрессию в срезах головного мозга первичной соматосенсорной коры крыс. Экспл. Мозг. Рез. 135, 300–310. doi: 10.1007/s002210000530

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хьорневик Т., Якобсен Л.М., Ку, Х., Бьяали, Дж. Г., Гьерстад, Дж., и Уиллох, Ф. (2008). Метаболическая пластичность в супраспинальной системе модуляции боли после LTP спинного мозга, индуцированной вредным стимулом. Боль 140, 456–464. doi: 10.1016/j.pain.2008.09.029

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хобо, С., Эйзенах, Дж. К., и Хаяшида, К. (2011). Повышающая регуляция спинальных транспортеров глутамата способствует антигиперчувствительным эффектам вальпроата у крыс после повреждения периферических нервов. Неврологи. лат. 502, 52–55. doi: 10.1016/j.neulet.2011.07.023

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Hu, Y., Li, W., Lu, L., Cai, J., Xian X., Zhang, M., et al. (2010). Антиноцицептивная роль цефтриаксона при хронической нейропатической боли у крыс. Боль 148, 284–301. doi: 10.1016/j.pain.2009.11.014

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Имамура Ю., Кавамото Х. и Наканиси О.(1997). Характеристика тепловой гипералгезии при экспериментальной невропатии тройничного нерва у крыс. Экспл. Мозг. Рез. 116, 97–103. DOI: 10.1007/pl00005748

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Инквимберт, П., Бартелс, К., Бабани, О.Б., Барретт, Л.Б., Тегедер, И., и Шольц, Дж. (2012). Повреждение периферических нервов приводит к устойчивому сдвигу баланса между высвобождением и поглощением глутамата в задних рогах спинного мозга. Боль 153, 2422–2431.doi: 10.1016/j.pain.2012.08.011

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Jacob, C.P., Koutsilieri, E., Bartl, J., Neuen-Jacob, E., Arzberger, T., Zander, N., et al. (2007). Изменения экспрессии глутаматергических транспортеров и рецепторов при спорадической болезни Альцгеймера. J. Alzheimers Dis. 11, 97–116. doi: 10.3233/jad-2007-11113

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Канаи Ю., Клеменсон Б., Симонин А., Лойенбергер М., Лохнер М., Вайстаннер М. и соавт. (2013). Семейство высокоаффинных переносчиков глутамата и нейтральных аминокислот SLC1. Мол. Аспекты. Мед. 34, 108–120. doi: 10.1016/j.mam.2013.01.001

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Катагири Х., Танака К. и Манабе Т. (2001). Требование соответствующих концентраций глутамата в синаптической щели для индукции LTP гиппокампа. евро. Дж. Нейроски. 14, 547–553.doi: 10.1046/j.0953-816x.2001.01664.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лепор, А. К., О’Доннелл, Дж., Боннер, Дж. Ф., Пол, К., Миллер, М. Е., Раук, Б., и др. (2011). Пространственные и временные изменения промоторной активности астроцитарного транспортера глутамата GLT1 после травматического повреждения спинного мозга. J. Neurosci. Рез. 89, 1001–1017. doi: 10.1002/jnr.22624

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Левенсон, Дж., Weeber, E., Selcher, JC, Kategaya, L.S., Sweatt, JD, and Eskin, A. (2002). Длительное потенцирование и контекстуальное обусловливание страха увеличивают поглощение глутамата нейронами. Нац. Неврологи. 5, 155–161. дои: 10.1038/nn791

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лю, М. Г., и Чен, Дж. (2014). Доклинические исследования коморбидности боли с аффективными расстройствами и когнитивным дефицитом: проблемы и перспективы. Прог. Нейробиол. 116, 13–32.doi: 10.1016/j.pneurobio.2014.01.003

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лю, XJ, и Солтер, MW (2010). Фосфорилирование глутаматных рецепторов и передача болевой пластичности в задних рогах спинного мозга. евро. Дж. Нейроски. 32, 278–289. doi: 10.1111/j.1460-9568.2010.07351.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Lu, Y.F., Wang, Y., He, Y., Zhang, F.K., He, T., Wang, R.R., et al. (2014).Пространственная и временная пластичность синаптической организации в передней части поясной извилины коры после периферической воспалительной боли: записи многоэлектродной матрицы у крыс. Неврологи. Бык. 30, 1–20. doi: 10.1007/s12264-013-1344-9

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лю, Д., Ю, В., Тан, Н., Ван, Р., Чжао, З., Се, Ф., и соавт. (2013). Сигнальный путь mTOR регулирует связанную с болью синаптическую пластичность в энторинально-гиппокампальных путях крыс. Мол. Боль 9:64. дои: 10.1186/1744-8069-9-64

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ни, Ю., Маларки, Э. Б., и Парпура, В. (2007). Везикулярное высвобождение глутамата опосредует двунаправленную передачу сигналов между астроцитами и нейронами. Дж. Нейрохим. 103, 1273–1284. doi: 10.1111/j.1471-4159.2007.04864.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Николсон, К. Дж., Гиллиленд, Т. М., и Винкельштейн, Б.А. (2014). Активация GLT-1 при лечении цефтриаксоном облегчает корешковую боль за счет снижения активации спинальных астроцитов и повышенной возбудимости нейронов. J. Neurosci. Рез. 92, 116–129. doi: 10.1002/jnr.23295

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ни, Х., и Венг, Х. Р. (2010). Нарушение захвата глиального глутамата индуцирует внесинаптический выброс глутамата в спинномозговые сенсорные синапсы крыс с невропатией. J. Нейрофизиол. 103, 2570–2580.doi: 10.1152/jn.00013.2010

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ни, Х., Чжан, Х., и Венг, Х. Р. (2010). Двунаправленные взаимодействия нейрон-глия, вызванные дефицитом поглощения глутамата в сенсорных синапсах спинного мозга. J. Нейрофизиол. 104, 713–725. doi: 10.1152/jn.00282.2010

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Пасти Л., Вольтерра А., Поццан Т. и Карминьото Г. (1997). Внутриклеточные колебания кальция в астроцитах: высокопластичная двунаправленная форма связи между нейронами и астроцитами in situ . J. Neurosci. 17, 7817–7830. doi: 10.1523/jneurosci.17-20-07817.1997

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Пит Р., Варгова Л., Сыкова Э., Пулен Д. А. и Олиет С. Х. (2004). Физиологический вклад астроцитарного окружения нейронов в межсинаптические перекрестные помехи. Проц. Натл. акад. науч. США 101, 2151–2155. doi: 10.1073/pnas.0308408100

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рамос, К.M., Lewis, M.T., Morgan, K.N., Crysdale, N.Y., Kroll, J.L., Taylor, F.R., et al. (2010). Спинальная активация транспортера глутамата GLT-1 цефтриаксоном: терапевтическая эффективность при ряде экспериментальных расстройств нервной системы. Неврология 169, 1888–1900. doi: 10.1016/j.neuroscience.2010.06.014

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рао, В.Л., Баская, М.К., Доган, А., Ротштейн, Дж.Д., и Демпси, Р.Дж. (1998). Черепно-мозговая травма подавляет регуляцию белков глиальных транспортеров глутамата (GLT-1 и GLAST) в мозге крыс. Дж. Нейрохим. 70, 2020–2027 гг. doi: 10.1046/j.1471-4159.1998.70052020.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ролз, С. М., Зелински, М., Патель, Х., Сакаваж, С., Барон, Д. А., и Патель, Д. (2010). Бета-лактамный антибиотик снижает толерантность к морфиновым анальгетикам у крыс за счет активации транспортера GLT-1. Наркотический спирт. Зависеть. 107, 261–263. doi: 10.1016/j.drugalcdep.2009.10.010

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рохас, Х., Colina, C., Ramos, M., Benaim, G., Jaffe, E.H., Caputo, C., et al. (2007). Вход Na+ через транспортер глутамата активирует обратный обмен Na+/Ca2+ и запускает Ca i 2+-индуцированное высвобождение Ca2+ в астроцитах мозжечка крысы типа 1. Дж. Нейрохим. 100, 1188–1202. doi: 10.1111/j.1471-4159.2006.04303.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Роуз, Э. М., Ку, Дж. К., Антфлик, Дж. Э., Ахмед, С. М., Анже, С., и Хэмпсон, Д.Р. (2009). Связывание транспортера глутамата с Na,K-АТФазой. J. Neurosci. 29, 8143–8155. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1081-09.2009

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ротштейн, Дж. Д., Мартин, Л., Леви, А. И., Дайкс-Хоберг, М., Джин, Л., Ву, Д., и другие. (1994). Локализация нейрональных и глиальных транспортеров глутамата. Нейрон 13, 713–725. дои: 10.1016/0896-6273(94)-8

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ротштейн, Дж.D., Patel, S., Regan, M.R., Haenggeli, C., Huang, Y.H., Bergles, D.E., et al. (2005). Бета-лактамные антибиотики обеспечивают нейропротекцию, увеличивая экспрессию переносчика глутамата. Природа 433, 73–77. doi: 10.1038/nature03180

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ротштейн, Дж. Д., Ван Каммен, М., Леви, А. И., Мартин, Л. Дж., и Кункл, Р. В. (1995). Избирательная потеря глиального переносчика глутамата GLT-1 при боковом амиотрофическом склерозе. Энн.Нейрол. 38, 73–84. doi: 10.1002/ana.410380114

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Scholz, J., Finnerup, N.B., Attal, N., Aziz, Q., Baron, R., Bennett, M.I., et al. (2019). Классификация хронической боли IASP по МКБ-11: хроническая невропатическая боль. Боль 160, 53–59. doi: 10.1097/j.pain.0000000000001365

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Судзуки Ю., Мицухата Х., Юзурихара М.и Касе, Ю. (2012). Антиаллодинический эффект растительного лекарственного средства йокукансан на периферическую невропатию у крыс с хронической констрикционной травмой. Эвид. Основанный на. Дополнение. Альтернативный. Мед. 2012:953459. дои: 10.1155/2012/953459

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тан, Ф. Р., и Ли, В. Л. (2001). Экспрессия метаботропных глутаматных рецепторов группы II и III в гиппокампе больных мезиальной височной эпилепсией. J. Нейроцитол. 30, 137–143. doi: 10.1023/a:1011939223872

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тинг, Дж. Т., Дайгл, Т. Л., Чен, К., и Фэн, Г. (2014). Методы острых срезов головного мозга для взрослых и стареющих животных: применение целевого анализа пэтч-кламп и оптогенетики. Методы Мол. биол. 1183, 221–242. дои: 10.1007/978-1-4939-1096-0_14

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тронье, В. М., Раше, Д., Hamer, J., Kienle, A.L., и Kunze, S. (2001). Лечение идиопатической невралгии тройничного нерва: сравнение отдаленных результатов после радиочастотной ризотомии и микроваскулярной декомпрессии. Нейрохирургия 48, 1261–1267; обсуждение 1267–1268. дои: 10.1097/00006123-200106000-00014

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Цингунис, А.В., и Вадиче, Дж.И. (2007). Транспортеры глутамата: сдерживание безудержного возбуждения путем формирования синаптической передачи. Нац. Преподобный Нейроски. 8, 935–947. doi: 10.1038/nrn2274

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Воронин Л.Л. и Черубини Э. (2004). «Глухие, немые и шепчущие» молчащие синапсы: их роль в синаптической пластичности. J. Physiol. 557, 3–12. doi: 10.1113/jphysiol.2003.058966

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Вос, Б.П., Страссман, А.М., и Мациевич, Р.Дж. (1994). Поведенческие признаки нейропатической боли тройничного нерва после хронического сужения подглазничного нерва крысы. J. Neurosci. 14, 2708–2723. doi: 10.1523/jneurosci.14-05-02708.1994

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Wang, D.D., Li, Z., Chang, Y., Wang, R.R., Chen, X.F., Zhao, Z.Y., et al. (2010). Нейронные цепи и временная пластичность в представлении первичной соматосенсорной коры крысы задними конечностями: пересмотр с помощью многоэлектродной матрицы на срезах мозга. Неврологи. Бык. 26, 175–187. doi: 10.1007/s12264-010-0308-6

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ван Р.R., Wang Y., Guan S.M., Li Z., Kokane S., Cao F.L. и соавт. (2018). Синаптический гомеостаз и аллостаз в зубчатой ​​извилине, вызванные воспалительными и нейропатическими болевыми состояниями. Фронт. Синаптический. Неврологи. 10:1. doi: 10.3389/fnsyn.2018.00001

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Венг Х.Р., Гао М. и Макснер Д.В. (2014). Киназа гликогенсинтазы 3 бета регулирует экспрессию глиального белка-переносчика глутамата в задних рогах спинного мозга у крыс с невропатической болью. Экспл. Нейрол. 252, 18–27. doi: 10.1016/j.expneurol.2013.11.018

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Вульф, С.Дж., и Томпсон, С.В. (1991). Индукция и поддержание центральной сенсибилизации зависит от активации рецептора N-метил-D-аспарагиновой кислоты; Особенности лечения посттравматических состояний гиперчувствительности к боли. Боль 44, 293–299. дои: 10.1016/0304-3959(91)

-c

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ямада, К., Ватанабэ М., Шибата Т., Нагашима М., Танака К. и Иноуэ Ю. (1998). Транспортер глутамата GLT-1 временно локализуется на растущих аксонах спинного мозга мыши до установления астроцитарной экспрессии. J. Neurosci. 18, 5706–5713. doi: 10.1523/jneurosci.18-15-05706.1998

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Yan, L.H., Hou, J.F., Liu, M.G., Li, M.M., Cui, X.Y., Lu, Z.M., et al. (2009). Дисбаланс между возбуждающими и тормозными аминокислотами на уровне позвоночника связан с сохранением стойкого поведения, связанного с болью. Фармакол. Рез. 59, 290–299. doi: 10.1016/j.phrs.2009.01.012

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ян, X., Ядав, Р., Гао, М., и Венг, Х. Р. (2014). Интерлейкин-1 бета усиливает эндоцитоз глиальных переносчиков глутамата в задних рогах спинного мозга посредством активации протеинкиназы C. Glia 62, 1093–1109. doi: 10.1002/glia.22665

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Йошизуми, М., Eisenach, JC, and Hayashida, K. (2012). Рилузол и габапентиноиды активируют переносчики глутамата, чтобы облегчить вызванное глутаматом высвобождение глутамата из культивируемых астроцитов. евро. Дж. Фармакол. 677, 87–92. doi: 10.1016/j.ejphar.2011.12.015

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ю, Ф., Чжао, З. Ю., Хе, Т., Ю, Ю. К., Ли, З. и Чен, Дж. (2017). Временная и пространственная динамика периферической афферентно-вызванной активности в задних рогах, зарегистрированная на срезах спинного мозга крыс. Мозг Res. Бык. 131, 183–191. doi: 10.1016/j.brainresbull.2017.04.012

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чжао, С.Ю., Лю, М.Г., Юань, Д.Л., Ван, Ю., Хе, Ю., Ван, Д.Д., и соавт. (2009). Вызванная ноцицепцией пространственная и временная пластичность синаптической связи и функции в формировании гиппокампа крыс: запись с помощью многоэлектродной матрицы. Мол. Боль 5:55. дои: 10.1186/1744-8069-5-55

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Специальный отчет: Фермеры часто злоупотребляют мощным антибиотиком для коров

Майкл Эрман, Брайан Гроу

НЬЮ-ЙОРК/АТЛАНТА (Рейтер)S. скотоводы и молочные фермеры, ключевой компонент самой продаваемой линейки лекарств Zoetis, крупнейшей в мире компании по охране здоровья животных.

Некоторые коровы в стаде крупного рогатого скота на ферме Холлис едят в Луненбурге, штат Массачусетс, 26 июня 2013 г. REUTERS/Brian Snyder

создал угрозу для здоровья человека, которая может затмить эффективность препарата, показывает исследование Reuters.

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США предупредило в 2012 году, что цефтиофур может представлять «высокий риск для здоровья населения», отчасти потому, что препарат принадлежит к классу антибиотиков, которые считаются критически важными в медицине. Предупреждение — самый сильный вид FDA. Беспокойство вызывает то, что цефтиофур у животных может порождать устойчивые к антибиотикам бактерии, супербактерии, которые могут заражать людей и мешать обычному лечению, даже если препарат используется по назначению.

Анализ правительственных данных, проведенный агентством Рейтер, показывает, что риски для здоровья человека могут быть более значительными, чем считалось ранее.Записи, хранящиеся в Министерстве сельского хозяйства США с прошлого года, показывают, что следы цефтиофура обнаруживались в незаконных количествах у забитых животных чаще, чем у любого другого препарата. Данные показывают, что в 2013 году только на цефтиофур приходилось четвертая часть всех нарушений, зарегистрированных Министерством сельского хозяйства США.

Остатки цефтиофура сами по себе не считаются опасными для людей при проглатывании, поскольку правительство устанавливает свои стандарты значительно ниже опасного уровня.

Но следы служат предупредительным признаком того, что препарат был использован незадолго до того, как животное было убито, что увеличивает вероятность того, что мясо содержит супербактерий, сказал Гай Лонераган, ветеринарный эпидемиолог из Техасского технологического университета.Исследования показывают, что цефтиофур в большей степени, чем большинство других препаратов, может резко увеличить количество устойчивых к антибиотикам бактерий у животного.

«Он убивает более слабых жуков и позволяет более сильным выживать и размножаться», — сказал Лонераган. Эффект особенно выражен вскоре после применения препарата, показывают исследования.

Zoetis утверждает, что цефтиофур безопасен при использовании по назначению. «Использование цефтиофура по-прежнему целесообразно при использовании в соответствии с указаниями на этикетке для тех животных, которые находятся в ситуациях риска», — сказал Скотт Браун, вице-президент по глобальным терапевтическим исследованиям в Zoetis.

Ставки особенно высоки, потому что это лекарство является частью ключевого класса антибиотиков, называемых цефалоспоринами. По данным FDA, в этот класс входит цефтриаксон, препарат, жизненно важный для лечения пневмонии, менингита и сальмонеллезной инфекции у детей. Использование одного типа цефалоспоринов может поставить под угрозу эффективность других препаратов того же класса.

«Существует очень четкая связь между использованием цефтиофура и устойчивостью к цефтриаксону», — сказал Пол Фей, профессор микробиологии в Медицинском центре Университета Небраски.«Мы знаем, что устойчивые к цефтиофуру сальмонеллы явно устойчивы к цефтриаксону».

ЭКОНОМИЧЕСКИЕ СТИМУЛЫ

Несмотря на опасность, существуют экономические стимулы для злоупотребления цефтиофуром. Сильнодействующее лекарство может поддерживать жизнь больной коровы достаточно долго, чтобы молочный фермер мог продать животное на бойню. Курс лечения может стоить от 20 до более 100 долларов, что относительно дорого для ветеринарных антибиотиков. Но это гораздо меньше того, что может заработать фермер, если животное доживет до того момента, когда его можно будет продать на мясо.По данным фермеров и данных Министерства сельского хозяйства США, молочные коровы на убой в настоящее время стоят 1500 долларов и более.

Хью Байрон до 2011 года владел молочной фермой в Хиллсборо, штат Кентукки, и до этого года держал крупный рогатый скот. Он говорит, что часто использовал цефтиофур для лечения распространенных инфекций у своих коров. В июле 2010 года молочная корова, отправленная на убой с фермы Байрона, дала положительный результат на 5,61 миллиграмма остатка цефтиофура на килограмм образца ткани. Это в 14 раз превышает допустимый уровень в 0,4 миллиграмма на килограмм, установленный FDA.

Байрон признается, что вводил цефтиофур в конце жизни своих животных, надеясь, что они продержатся, чтобы скотобойня приняла коров и заплатила ему.

«Мы говорим о наших средствах к существованию, о наших деньгах. Мы пытаемся спасти корову, и если мы не можем спасти корову, мы пытаемся спасти ее», — сказал Байрон. — Другими словами, пошлите ее на скотный двор и что-нибудь оттуда вытащите. Так что есть соблазн схитрить».

Zoetis демонстрирует экономические преимущества препарата при его продаже фермерам и ветеринарам.Одной из особенностей цефтиофура является короткий период отмены — установленный FDA период между моментом, когда животное прекращает прием антибиотика, и моментом, когда в его молоке или мясе наверняка будет достаточно свободных остатков, чтобы пройти проверку.

Преимущество препарата во времени значительно. В случае с молоком, если корова принимает пенициллин, фермер должен отказаться от всего произведенного молока в течение как минимум двух дней и до 15 дней после последнего введения препарата. Для некоторых продуктов с цефтиофуром часто не существует периода отмены, поэтому корова может продолжать давать молоко во время приема.

«Отсутствие потерь молока обеспечивает более высокую окупаемость инвестиций», — говорится на веб-сайте Zoetis о препарате Excenel под торговой маркой цефтиофура.

ПЕРИОД ОТМЕНЫ

Предполагается, что программа проверки остатков поможет правительству гарантировать, что фермеры не злоупотребляют наркотиками. Однако в правилах есть пробел. Министерство сельского хозяйства США проверяет животных на наличие следов антибиотиков, чтобы предотвратить попадание избыточного количества лекарств, таких как цефтиофур, в продукты питания. Но остаточная программа не проверяет наличие резистентных бактерий.Исследования показывают, что в случае с цефтиофуром эти микробы могут выживать в животном после окончания необходимого периода отмены препарата.

Лонераган из Технологического института Техаса сказал, что его исследование предлагает FDA проанализировать, остаются ли высокие уровни устойчивых бактерий за периодом вывода. По его словам, может быть оправдан более длительный период, чтобы убедиться, что популяция резистентных бактерий уменьшена до того, как животное будет забито.

Причина роста нарушений цефтиофура не ясна.В 2012 году Министерство сельского хозяйства США внедрило новый тест, который, по его словам, лучше выявляет следы всех наркотиков. Но данные об остатках Министерства сельского хозяйства США не показывают такого большого увеличения нарушений для пенициллина и других антибиотиков, как для цефтиофура.

Представитель FDA Джули Патнэм заявила, что агентство «осведомлено об увеличении количества нарушений, связанных с остатками цефтиофура», и собирает дополнительную информацию, чтобы «лучше понять этот вопрос». Она сказала, что агентству также известны результаты исследований Лонерагана, «и мы продолжаем учитывать развивающуюся науку, связанную с влиянием использования противомикробных препаратов на популяции бактерий.

Zoetis заявила, что FDA оценило влияние цефтиофура на устойчивость бактерий к антибиотикам и одобрило препараты, содержащие это соединение, совсем недавно, в прошлом году.

Тех, кто пойман на злоупотреблении ветеринарными антибиотиками, ждут легкие последствия. Наказания включают осуждение животного. Инспекторы FDA проверяют действия нарушителей, что может привести к письмам-предупреждениям, предписывающим фермерам изменить способ применения лекарств. Дальнейшие действия крайне редки, как показывает изучение нормативных и судебных протоколов.

Программа тестирования остатков подверглась резкой критике со стороны федеральных аудиторов. В отчете Счетной палаты правительства за 2010 год говорится, что программа «не выполняет свою миссию по мониторингу пищевых продуктов на наличие вредных остатков». Одним из результатов аудита стало внедрение двумя годами позже новой методологии тестирования остатков, используемой в настоящее время USDA и FDA.

УСПЕШНОЕ ЛЕКАРСТВО

Широкое применение антибиотиков в ветеринарии создает огромные проблемы для органов здравоохранения.Сегодня 80 процентов всех антибиотиков, используемых в Соединенных Штатах, даются скоту, а не людям. В сентябре агентство Reuters задокументировало, как некоторые из крупнейших птицеводческих компаний Америки регулярно подмешивают низкие дозы антибиотиков в корм, который дают цыплятам, что, по мнению ученых, особенно способствует росту супербактерий.

Около 2 миллионов человек в Соединенных Штатах ежегодно заболевают бактериальными инфекциями, устойчивыми к обычным антибиотикам, и, по данным U.S.С. Центры по контролю и профилактике заболеваний. Всемирная организация здравоохранения назвала устойчивость к антибиотикам «проблемой настолько серьезной, что она угрожает достижениям современной медицины».

Несмотря на эти опасения, продажи антибиотиков для использования в животноводстве выросли на 16 процентов по объему с 2009 по 2012 год, как показывают правительственные данные. Продажи цефалоспоринов увеличились более чем в два раза.

Правительство предприняло некоторые усилия по ограничению использования цефтиофура из-за опасений по поводу устойчивости к антибиотикам.FDA требует, чтобы фермеры получали рецепт от ветеринара. В 2012 году агентство издало приказ, запрещающий большую часть использования препарата не по прямому назначению, указав на остатки как на один из факторов.

Рост использования цефтиофура является благом для его крупнейшего производителя, компании Zoetis из Флорхэма, штат Нью-Джерси, бывшего подразделения по производству лекарств для животных фармацевтического гиганта Pfizer Inc. выручка в год с 2011 года, согласно финансовой отчетности компании.

Zoetis продает свои бренды цефтиофура ветеринарам, которые должны прописывать препарат, и фермерам в видеороликах на YouTube, а также в ветеринарных и молочных публикациях. Препарат стал одним из самых популярных антибиотиков на американских животноводческих фермах. Ветеринары и фермеры высоко оценивают его эффективность, эффективность и способность лечить множество заболеваний, от гниения копыт до респираторных заболеваний крупного рогатого скота.

«ТАКИЙ ОГРОМНЫЙ ЭФФЕКТ»

«Нам пришлось использовать так мало для такого огромного эффекта», — сказал Х.Морган Скотт, ветеринарный эпидемиолог Колледжа ветеринарной медицины Техасского университета A&M.

Еще одним преимуществом является короткое время отмены препарата. Рекомендации FDA по отмене основаны на наличии остатков антибиотиков в мясе. По сравнению с другими антибиотиками цефтиофур быстро метаболизируется коровами, поэтому регуляторам требуется более короткий период ожидания. Сроки отмены препарата составляют от 0 до 3 дней для молока и от 4 до 13 дней для мяса. В случае с другими препаратами диапазон может составлять четыре недели и более для мяса.

Эти короткие окна оставляют потенциальную брешь в безопасности. Одно исследование 2007 года показывает, что даже когда цефтиофур используется в соответствии с одобрением, устойчивые к антибиотикам бактерии остаются в кишечнике крупного рогатого скота еще долгое время после того, как препарат был введен. FDA процитировало исследование, авторами которого являются Лонераган и Скотт, в приказе 2012 года об ограничении использования препарата.

Исследование, опубликованное в Американском журнале ветеринарных исследований, показало, что одна правильно введенная доза препарата на основе цефтиофура производства Zoetis привела к тому, что 40 процентов выживших штаммов E.coli у крупного рогатого скота с резистентностью к цефтиофуру через шесть дней после введения дозы. Популяция резистентных бактерий оставалась выше 20 процентов от общего числа в течение двух недель. Исследование показало, что резистентные бактерии не возвращались к уровням, типичным для необработанного крупного рогатого скота, в течение 28 дней после периода отмены цефтиофура.

В рамках Национальной программы по остаткам Министерства сельского хозяйства США органы по контролю за безопасностью пищевых продуктов проверяют мясо на наличие наркотиков и химикатов, которые могут оказаться опасными для потребителей. В 2012 году Министерство сельского хозяйства США проверило на наличие остатков наркотиков около 185 000 голов крупного рогатого скота, что составляет менее 1 процента из более чем 33 миллионов голов крупного рогатого скота, забитого в США в том же году.Процент свиней, домашней птицы и других проверенных животных ниже.

При обнаружении высоких остатков наркотиков результаты передаются в FDA для расследования и принудительного исполнения.

В 2013 году ни один остаток препарата не обнаруживался у убитых животных чаще, чем цефтиофур, как показывает анализ Reuters.

Количество нарушений, связанных с высокими уровнями цефтиофура в мясе, выросло на 323 процента в период с 2008 по 2013 год — с 98 нарушений до 415. Только в прошлом году более четверти всех 1634 нарушений остаточного содержания были связаны с цефтиофуром, что более чем в четыре раза превышает его долю нарушений. Анализ показывает, что в 2008 г.Нарушения, связанные с цефтиофуром, продолжались с той же скоростью в первой половине 2014 года.

Молочные коровы являются одним из основных источников говяжьего фарша в Америке, который, в свою очередь, является продуктом из говядины, наиболее подверженным бактериальным инфекциям. Молочные коровы также являются основным источником остатков цефтиофура, что составляет 76 процентов из 415 нарушений в 2013 году. В прошлом году 45 процентов из 1634 нарушений остатков для всех препаратов были обнаружены у молочных коров.

Компания Zoetis заявила, что ей известно о нарушениях, связанных с остатками, но их было немного, и большинство, а возможно, и все животные были изъяты из запасов корма при обнаружении остатков.

«Это животные, которые, вероятно, не должны были идти на убой, или были ошибки, и животные идут на убой, которые не следовали периодам отмены», — сказал Джон Холберг, директор отдела регулирования США в Zoetis.

«ВАШ РЕЗУЛЬТАТ»

Цефтиофур может сэкономить фермерам деньги, продлевая дойку коровы и сохраняя ее ценность на стадии убоя. В своих маркетинговых материалах Zoetis акцентирует внимание на части экономии.

В одной из презентаций говорится, что использование ее торговой марки Excede вместо пенициллина для лечения молочных коров с респираторными заболеваниями крупного рогатого скота может сэкономить фермеру более 30 долларов на животное с учетом стоимости производства молока, не теряемой при изъятии.

Аналогичный корпус компания делает для Excenel. «Защитите своих коров и свою прибыль с помощью EXCENEL», — говорится на его веб-сайте.

Есть также выгоды, которые можно получить в конце жизни. Из-за короткого времени вывода фермеры могут быстрее получать оплату после лечения животного.

«Укороченный вывод мяса. Вам придется ждать на 29 дней дольше», если вы используете конкурирующий препарат, говорится в рекламе Excede.

Время-деньги для фермера с тяжелобольной коровой на руках.Интервью с фермерами, ветеринарами и полевыми исследователями, а также обзор предупредительных писем FDA показывают, что цефтиофур вводили животным фермеры, стремящиеся сохранить больному животному жизнь достаточно долго, чтобы продать его.

Байрон, 66-летний молочник на пенсии из Кентукки, говорит, что цефтиофур — чудо-лекарство. Он обнаружил, что это один из наиболее эффективных антибиотиков, и пролеченных животных и их молоко не нужно долго удерживать с рынка.

«Большинство из нас считали, что если (цефтиофур) сработает, если он спасет корову, мы потратим деньги», — сказал Байрон.«Вы говорите о животном за тысячу долларов или больше».

После того, как Министерство сельского хозяйства США обнаружило высокие следы цефтиофура в корове, которую он продал на убой, Байрон получил письмо от Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA), в котором ему предлагалось улучшить свои процессы. Позднее в том же году агентство оценило его операцию, признало ее в порядке и закрыло дело. Других действий ведомство не предпринимало.

Дополнительный отчет Мими Дуайер из Нью-Йорка; под редакцией Блейка Моррисона и Майкла Уильямса

Советы клиницистам | Вспышка инфекции сальмонеллы в нескольких штатах, связанная с сырыми куриными продуктами | Октябрь 2018 | Salmonella

Большинству пациентов с диарейным заболеванием Salmonella требуется только поддерживающая терапия, включая восполнение жидкости.Однако лечение антибиотиками может быть целесообразным для некоторых пациентов, например, с тяжелой диареей, внекишечными инфекциями (например, инфекциями мочевыводящих путей) или другими факторами риска инвазивного заболевания (1, 2). Обычными пероральными антибиотиками первого ряда для восприимчивых инфекций Salmonella являются фторхинолоны (для взрослых) и азитромицин (для детей). Цефтриаксон является альтернативным препаратом первой линии лечения.

Штамм Salmonella Infantis в этой вспышке обладает множественной лекарственной устойчивостью и не чувствителен к обычным антибиотикам первой линии ципрофлоксацину и цефтриаксону, а также к ряду других антибиотиков (см. ниже).У многих пациентов в этой вспышке были инфекции мочевыводящих путей с посевами мочи, которые дали Salmonella Infantis.

Если вы рассматриваете возможность лечения антибиотиками пациента с известной или подозреваемой инфекцией Salmonella , рассмотрите следующее:

Диагностика
  • Получите соответствующие культуры (например, стул, моча, кровь).
  • Закажите тестирование на чувствительность к противомикробным препаратам изолята Salmonella , чтобы определить выбор антибиотика.
  • Если Salmonella идентифицируется с помощью независимого от культуры диагностического теста (CIDT), запросите культуру для получения изолята для тестирования на чувствительность к противомикробным препаратам (это называется рефлекторной культурой).
Лечение
  • По возможности выбирайте антибиотик на основе результатов тестирования на чувствительность к противомикробным препаратам.
    • Штамм Salmonella Infantis в этой вспышке НЕ чувствителен к ципрофлоксацину, цефтриаксону или другим антибиотикам, включая ампициллин, хлорамфеникол, фосфомицин, гентамицин, канамицин, налидиксовую кислоту, стрептомицин, сульфизоксазол, триметоприм-сульфаметоксазол и тетрациклин.
    • Штамм чувствителен к азитромицину, амоксициллину-клавулановой кислоте и меропенему.
  • Рассмотрите возможность консультации со специалистом по инфекционным заболеваниям для ведения пациентов с полирезистентными или осложненными инфекциями Salmonella .
  • Напомните пациентам о тщательной гигиене рук после посещения туалета и перед приготовлением пищи, чтобы предотвратить передачу вируса другим людям.
  • Обратите внимание, что некоторые отделы здравоохранения требуют отрицательный анализ кала, прежде чем человек сможет вернуться к работе в условиях повышенного риска, например, в сфере приготовления пищи, ухода за детьми или здравоохранения.

Дополнительные рекомендации по лечению инфекции Salmonella можно найти на веб-сайте CDC Information for Healthcare Professionals and Laboratories.

Литература для врачей

Ceftriaxone и клавулановая кислота индуцирует антиальлодинию и антиклеза

Abraham Ochoa Aguara,

Abraham Ochoa-Aguara, 1,2 Rosa Ventura-Martinez, 1 Marco Antonio Sotomayor-Sobrino, 1 Ruth Jaimez, 1 Ulise Coffeen, 3 Ariadna Jiménez-González, 2 LUIS Gerardo Balcázar-Ochoa, 1 Rafael Pérez-Medina-Carballo, 2 Rodolfo Rodriguez, 1 RICARDO PLANCARTE-SANCHEZ 4

1 Отдел фармакологии, Медицинский факультет, Национальный автономный университет Мексики, Мехико, Мексика; 2 Исследовательский отдел, Мексиканский медицинский факультет, Университет Ла Саль, Мехико, Мексика; 3 Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente Muñiz, Мехико, Мексика; 4 Клиника боли, Национальный институт рака Мексики, Мехико, Мексика

Введение: Цефтриаксон (CFX) и клавулановая кислота (CA) представляют собой 2 молекулы β-лактама, широко используемые в качестве антибиотиков.Однако в последние годы было опубликовано несколько сообщений об их антиаллодинических свойствах. Хотя этот эффект считался главным образом следствием гиперэкспрессии GLT1, также было доказано, что эти молекулы вызывают прямую иммуномодуляцию. В этой работе мы определяем острый обезболивающий эффект CFX и CA в модели воспалительной боли и оцениваем, может ли их введение вызывать противовоспалительные эффекты.
Методы: В качестве модели воспалительной боли использовали тест с каррагинаном (Карра).Были проанализированы как механические, так и термические реакции после введения CFX и CA в разное время. Для определения воспаления использовали плетизмометр. Кроме того, с помощью иммуноферментного анализа определяли концентрацию ФНО-α и ИЛ-10 в сыворотке крови.
Результаты: Как CFX, так и CA вызывали значительный термический антиаллодинический эффект через 3 и 24 часа после введения. Кроме того, КА вызывал механический антиаллодинический эффект через 30, 60 и 90 мин после введения. Более того, через 24 ч после инъекции Карра для обеих молекул был обнаружен значительный противовоспалительный эффект.Кроме того, как CA, так и CFX модулировали концентрации TNF-α и IL-10 в сыворотке в разное время.
Заключение: Наши результаты свидетельствуют о том, что как CFX, так и CA вызывают анальгезирующий эффект на модели воспалительной боли Карра и что указанный анальгетический эффект различается между каждой молекулой β-лактама. Кроме того, этот эффект может быть связан с противовоспалительным действием обеих молекул и прямой модуляцией концентрации TNF-α и IL-10 в сыворотке.

Ключевые слова: цефтриаксон, клавулановая кислота, воспалительная боль, концентрация ФНО-α, молекулы β-лактама, обезболивающий эффект, антиаллодинические свойства

Введение

Цефтриаксон (CFX) и клавулановая кислота (CA) входят в группу препаратов, известных как β-лактамные молекулы (BLM), названных так из-за наличия ядра азетидинона, содержащего циклический амид с карбонилом β- лактамы, также известные как β-лактамное кольцо. 1 CFX и CA в настоящее время клинически используются в качестве антибиотиков; однако механизм действия СА рассматривается только как адъювант антибиотика (поскольку он ингибирует белки пенициллиназы на стенке бактериальной клетки) 2 и, как известно, сам по себе обладает незначительным антибиотическим эффектом. 3 Недавно было показано, что оба BLM индуцируют обезболивание в мышиных 2,4 и/или человеческих 5 протоколах.

Этот обезболивающий эффект в основном объясняется глутаматергической модуляцией, вызванной введением любого БЛМ, поскольку было показано, что это в значительной степени повышает экспрессию GLT1 в астроцитах человека. 6,7 Ранее было доказано, что эта активация проявляется не менее чем через 7 часов после введения CFX 5 у крыс. Тем не менее, наша группа ранее обнаружила острый антиаллодинический эффект в модели невропатической боли всего через 30 минут после введения CA или CFX, и что этот эффект был связан со снижением концентрации TNF-α в сыворотке. 8

С другой стороны, патофизиология воспалительной боли представляет собой сложный механизм, который включает изменение регуляции провоспалительных (таких как TNF-α) и противовоспалительных (IL-10) молекул. 9 Когда этот физиологический механизм активируется, он вызывает не только боль, но и увеличение объема ткани, известное как отек.

В отношении этого типа боли было также показано, что BLM обладают обезболивающим эффектом, поскольку было доказано, что CFX оказывает анальгезирующее и антигипералгезирующее действие при введении один раз в день в течение 7 дней перед интраплантарной инъекцией каррагинана (Carr). 4 Кроме того, было несколько клинических сообщений об успешном лечении долговременного регионарного болевого синдрома другим БЛМ, цефадроксилом. 11 Кроме того, было показано, что введение СА в высоких дозах вызывает противовоспалительный эффект в модели воспаления, вызванного Карром, 5 , что указывает на возможное влияние этой молекулы на этот тип боли.

БЛМ давно используются в клинической практике в качестве антибиотиков благодаря их безопасности и переносимости. 1 Новое потенциальное показание для коммерческого использования BLM может привести к очень быстрому внедрению в медицинских учреждениях с низкими затратами; кроме того, их относительно простая химическая структура может привести к разработке новых лекарств для облегчения боли.Однако важно сначала продемонстрировать их эффективность при нескольких типах боли и попытаться понять механизмы, участвующие в этом эффекте.

Учитывая эти данные, целью данного исследования было определение обезболивающего и противовоспалительного действия введения CFX и CA в модели карр-индуцированной воспалительной боли в остром периоде времени. Мы также изучили возможное влияние на уровни цитокинов и оценили, повлияет ли это на отек, вызванный введением Карра.

Методы и материалы

Эксперименты проводились в соответствии с правилами комитета по этике Международной ассоциации по изучению боли 13 и Официальными мексиканскими нормами по уходу за животными и обращению с ними. 14 Они также были одобрены Институциональными комиссиями по этике (Медицинский факультет UNAM, № 012-2015 и с одобрения этического комитета Национального института психиатрии Рамона де ла Фуэнте Муньиса [CONBIOETICA-09-CEI-010-20170316] ).Количество экспериментальных животных было сведено к минимуму (n=8 для каждой группы), а крыс умерщвляли передозировкой CO 2 или обескровливанием в случае тех, у которых был взят образец крови для измерения цитокинов (см. ниже). ).

Животные

Самцов крыс Wistar (200–250 г) выращивали, содержали и содержали в помещениях учреждения. Животных содержали в прозрачных акриловых индивидуальных клетках с циклами свет/темнота 12/12 часов, кормлением и увлажнением вволю.Для снижения стресса крыс подвергали 20-минутным сеансам привыкания в течение 5 дней подряд в экспериментальных акриловых клетках. Для всех ноцицептивных процедур крыс анестезировали изофлураном 2%.

Лекарственные препараты

Диклофенак (DIC, 10 мг/кг) (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США), клавуланат калия (CA, 10 мг/кг) (Sigma) и цефтриаксон (CFX, 200 мг/кг) (Пиза, Мехико, Мексика) растворяли в солевом растворе (0,9% NaCl). Все соединения готовили непосредственно перед внутрибрюшинным (IP) введением в конечном объеме 1 мл/кг массы тела.Дозы всех препаратов были окончательно определены в предыдущих исследованиях. 8

Воспалительные процедуры

До начала воспалительного процесса крыс содержали в наркозной камере и слегка анестезировали (2% изофлюран). Воспалительный процесс вызывали интраплантарным введением каррагинана лямбда (Sigma Chemical Co.; 1% Carr в физиологическом растворе, 250 мкл) в правую заднюю лапу. ДИК использовали в качестве положительного контроля из-за его широкого применения при воспалительной боли.

В день поведенческой оценки животным внутрибрюшинно вводили CFX (200 мг/кг), CA (10 мг/кг), DIC (10 мг/кг) или физиологический раствор (контрольная группа). После введения поведение, связанное с болью, оценивали каждые 30 минут в течение 180 минут для модели механической аллодинии и через 3 и 24 часа для модели тепловой ноцицепции. Исходную оценку проводили за 30 мин до введения лекарственного средства или физиологического раствора. Наконец, после последней поведенческой оценки случайным образом отбирали по 4 крысы из каждой группы и получали образец крови для оценки концентрации TNF-α и IL-10 (см. ниже).

Оценка поведения

Механическая аллодиния (тест нити фон Фрея)

Для оценки механической аллодинии применяли калиброванные нейлоновые моноволокна с увеличивающимся диапазоном силы изгиба (волосы фон Фрея; Stoelting, Wood Dale, IL, USA) приказ (сила 1–15 г) на подушечку правой задней лапы, чтобы вызвать реакцию отдергивания лапы с использованием модели Беннета. 15 Пороговое значение установлено на уровне 15 г, чтобы избежать повреждения тканей.

Крыс помещали в акриловые клетки поверх проволочной сетки, обеспечивающей доступ к нитям правой задней лапы.Начиная с наименьшей силы, нить помещали на кожу до тех пор, пока она слегка не изгибалась, при этом каждую нить предъявляли 5 раз со скоростью около 1 секунды. Реакцию распознавали, если крыса отдергивала заднюю лапу от нити в 3 из 5 случаев, и регистрировали величину усилия. Данные представлены в виде среднего ± стандартная ошибка среднего (SEM) порога отдергивания лапы (PWT) на экспериментальную группу, выраженного в граммах (г).

Термоноцицепция (Плантарный тест)

Термоноцицептивную реакцию вызывали точечным лучистым теплом в аппарате для подошвенного теста (Ugo Basile, mod7370, Gemonio VA, Италия) по методу Харгривза. 39 Задержка отдергивания лапы (PWL) определялась для правой лапы с точностью до 0,1 с с использованием электронного таймера в устройстве. Время отсечки составляло 20 секунд, чтобы избежать повреждения тканей. Каждое определение проводили в среднем по 3 испытаниям на заднюю лапу. Все группы были протестированы до индукции воспаления для определения ноцицептивного порога (острая боль). Кроме того, PWL измеряли в разное время после интраплантарной инъекции Карра.

Измерение отека

Для проверки развития воспалительной реакции, вызванной инъекцией Карра (см. выше), и для проверки потенциальных противовоспалительных или противоотечных свойств инъецируемых веществ мы использовали цифровой водный плетизмометр (Ugo Basile 37140).Блок управления плетизмометром определяет смещение воды, вызванное погружением лапы животного, и генерирует выходной сигнал на цифровой дисплей, показывающий измеренное смещение объема (разрешение 0,01 мл). Правую заднюю лапу каждого животного погружали до уровня пяточно-большеберцового сустава и регистрировали объемное смещение 3 раза для каждой крысы. Получали среднее значение для каждой крысы, и данные выражали как общий объем лапы (TPV).

Оценка цитокинов

Образцы крови были взяты под глубокой анестезией пентобарбиталом (36 мг/кг, внутрибрюшинно) из брюшной аорты в вакутайнере.Образцы цельной крови центрифугировали при 3000 об/мин в течение 20 мин; сыворотку отделяли и хранили при –20°С.

Уровни TNF-α и IL-10 в сыворотке определяли с помощью наборов для непрямого иммуноферментного анализа (TNF-α Abcam, ab46070 и IL-10 Abcam 100764; Кембридж, Массачусетс, США) в соответствии с инструкциями производителя. Содержание цитокинов в образцах выражали в пикограммах антигена на миллилитр сыворотки (пг/мл).

Статистический анализ

Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad 6 PRISM (GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния, США).Для статистического анализа поведенческих данных был проведен двухфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Даннета для определения значимых различий между группами в каждый момент времени (время 0, 30, 60, 90, 120). , 180 мин и 3, 24 и 48 ч). Временные кривые поведенческих результатов и данных TPV представлены как среднее ± SEM. Кроме того, для оценки различий в концентрациях цитокинов использовали двухфакторный дисперсионный анализ с последующим апостериорным тестом Даннетта. Данные представлены как среднее ± SEM.Значение p <0,05 считалось значимым для всех тестов.

Результаты

Механическая аллодиния

Все имитационные животные демонстрировали реакцию отдергивания при ранее установленной точке отсечки 15 г, аналогично предыдущим сообщениям на протяжении всего эксперимента. Через час после введения Карра наблюдалось значительное снижение PWT по сравнению с группой SHAM на протяжении всего эксперимента (3,71±0,68 г; p <0,05). Введение ДИК (положительный контроль) вызывало значительное увеличение PWT в течение первых 180 минут (максимальный эффект через 90 минут после введения, 8.5±0,36 г), а также через 24 (7,5±1,60 г) и 48 ч (9,4±1,60 г) после инъекции Карра (рис. 1А и Б).

Рисунок 1 Механическая аллодиния, индуцированная Карром, и обезболивающий эффект введения препарата.

Примечания: (А) Антиаллодинический эффект ДИК (10 мг/кг, внутрибрюшинно) в течение 180 мин; (B) антиаллодинический эффект ДИК (10 мг/кг, внутрибрюшинно) через 0, 24 и 48 ч; (C) антиаллодинический эффект CFX (200 мг/кг, внутрибрюшинно) в течение 180 мин; (D) антиаллодинический эффект CFX (200 мг/кг, внутрибрюшинно) через 3, 24 и 48 ч; (E) антиаллодинический эффект КА (10 мг/кг, внутрибрюшинно) в течение 180 мин; (F) антиаллодинический эффект СА (10 мг/кг, внутрибрюшинно) через 3, 24 и 48 часов.Значения представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для 8 крыс на группу. * p <0,05 по сравнению с группой Карра (двухфакторный дисперсионный анализ с последующим апостериорным тестом Даннета).

Сокращения: Дисперсионный анализ, дисперсионный анализ; СА, клавулановая кислота; Карр, каррагинан; CFX, цефтриаксон; ДИК, диклофенак; IP, внутрибрюшинно; PWT, порог отдергивания лапы; SEM, стандартная ошибка среднего.

Введение CFX (200 мг/кг) не вызывало какого-либо значимого острого антиаллодинического эффекта в любое время (30, 60, 90, 120, 150 и 180 мин) наблюдения (2.8±0,59, 2,2±0,28, 4,5±1,04, 4,2±0,52, 4,2±0,68 и 3,1±0,59 г соответственно; р >0,05). Однако продолжительное введение CFX вызывало такой эффект через 24 (11,2 ± 1,40 против 6,8 ± 0,73 г карр; p <0,05) и 48 ч (11,4 ± 0,92 против 6,5 ± 0,57 г карр; p <0,05) после инъекции Карра (рис. 1C и D).

С другой стороны, СА (10 мг/кг) действительно вызывала значительную антиаллодинию в 30 лет (7,5±1,34 против 2,5±0,36 г карра; p <0,05), 60 (8,0±0,87 против 2,05 г карра).8±0,40 г Карр; p <0,05) и 90 мин (6,2±0,68 против 2,5±0,36 г Carr; p <0,05) после введения. Кроме того, этот эффект также был обнаружен при 24 (11,2 ± 1,14 против 6,8 ± 0,73 г Карра; p <0,05) и 48 ч (10,8 ± 1,12 против 6,5 ± 0,57 г Карра; p <0,05) наблюдений ( Рисунок 1E и F).

Термическая аллодиния

Как описано в разделе «Методы и материалы», мы провели первоначальное наблюдение до введения Карра.Не было существенной разницы между ДВС-синдромом, CFX и CA с Carr (7,6 ± 0,18, 7,7 ± 0,28 и 7,8 ± 0,27 против 7,9 ± 0,64 с соответственно) (рис. 2). После введения Карра наблюдалась значительная разница в PWL в группе Карра через 3 (4,4 ± 0,29 против 7,9 ± 0,64 с; p <0,05) и 24 ч (4,3 ± 0,29 против 7,9 ± 0,64 с; p < 0,05) временных точек. С другой стороны, введение ДИК вызывало увеличение PWL через 3 часа (6,2 ± 0,58 против 4,4 ± 0,29 с; p <0,05) и через 24 часа (6,05).0±0,47 против 4,3±0,29 с; p <0,05) по сравнению с Карром в соответствующее время (рис. 2А). В то же время введение CFX вызывало значительное увеличение PWL через 3 (6,5±0,29 против 4,4±0,29 с; p <0,05) и 24 ч (6,5±0,62 против 4,3±0,29 с; p <0,05) по сравнению с Карр в соответствующее время (рис. 2B). Кроме того, после введения СА также наблюдалось значительное увеличение PWT через 3 (5,9 ± 0,26 против 2,2 ± 0,29 с; p <0,05) и 24 ч (6,05).8±0,34 против 4,3±0,29 с; p <0,05) по сравнению с Карром в соответствующее время (рис. 2С). Рис. 2

Примечания: (А) Антиаллодинический эффект ДИК (10 мг/кг, внутрибрюшинно) через 3 и 24 ч; (B) антиаллодинический эффект CFX (200 мг/кг, внутрибрюшинно) через 3 и 24 ч; (C) антиаллодинический эффект СА (10 мг/кг, внутрибрюшинно) через 3 и 24 ч.Значения представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для 8 крыс на группу. * p <0,05 по сравнению с группой Карра (двухфакторный дисперсионный анализ с последующим апостериорным тестом Даннета).

Сокращения: Дисперсионный анализ, дисперсионный анализ; СА, клавулановая кислота; Карр, каррагинан; CFX, цефтриаксон; ДИК, диклофенак; IP, внутрибрюшинно; PWL, задержка отдергивания лапы; SEM, стандартная ошибка среднего.

Отек лапы

Группа SHAM не показала каких-либо существенных различий в TPV в любое время наблюдения (0, 3 и 24 часа) (1.1±0,02, 1,0±0,02 и 1,1±0,01 см 3 соответственно). После введения Карра наблюдалось значительное увеличение TPV через 3 (2,2±0,08 против 1,0±0,02 см 3 ; p <0,05) и 24 ч (2,0±0,09 против 1,1±0,01 см 3 ; p ). <0,05) после интраплантарного введения Карра. С другой стороны, введение ДИК вызывало значительное снижение TPV через 3 (1,9±0,10 против 2,2±0,08 см 3 ; p <0,05) и 24 ч (1,3±0,03 против 2,0±0,09 см 3 ; р <0.05) по сравнению с Карром в соответствующее время (рис. 3). Между тем, хотя введение CFX не вызывало какого-либо эффекта в TPV через 3 часа наблюдения (2,4±0,08 против 2,2±0,08 см 3 ; p >0,05), в этой группе наблюдалось значительное снижение через 24 часа (1,5±0,04 см). против 2,0±0,09 Carr см 3 ; p <0,05). Кроме того, введение СА вызывало значительное снижение TVP как через 3 (1,9 ± 0,02 против 2,2 ± 0,08 см 3 ; p <0,05), так и через 24 часа (1.2±0,02 против 2,0±0,09 см 3 ; p <0,05) по сравнению с Карром в соответствующие сроки (рис. 3). Рис. 3

Примечания: Значения представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для 8 крыс на группу. * p <0,05 по сравнению с группой Карра в соответствующее время (двухфакторный дисперсионный анализ с последующим апостериорным тестом Даннетта).

Сокращения: Дисперсионный анализ, дисперсионный анализ; СА, клавулановая кислота; Карр, каррагинан; CFX, цефтриаксон; ДИК, диклофенак; IP, внутрибрюшинно; SEM, стандартная ошибка среднего; TPV, общий объем лапы.

Концентрация цитокинов в сыворотке

Чтобы установить возможную системную модуляцию концентрации цитокинов, индуцированную введением CFX либо CFX, были проанализированы концентрации провоспалительных (TNF-α) или противовоспалительных (IL-10) молекул в сыворотке 3, 24 и через 48 ч после введения Карра и препаратов.Во-первых, мы установили единую исходную группу SHAM сывороточных концентраций TNF-α (21,9 ± 1,34 пг/мл) и IL-10 (372,1 ± 69,69 пг/мл). Через три часа после введения Карра наблюдалось значительное увеличение TNF-α (73,6±11,16 против 21,9±1,34 пг/мл; p <0,05), но не IL-10 (1329,2±526,03 против 372,1±69,69 пг/мл). ; p >0,05) уровней. Более того, при 24- и 48-часовом наблюдении не было обнаружено существенной разницы ни для TNF-α (17,9±2,51 и 16,7±2,29 против 21,9±1,34 пг/мл соответственно; p >0.05) или IL-10 (533,0±80,49 и 192,1±32,08 против 372,14±69,69 пг/мл соответственно; p >0,05) по сравнению с SHAM (рис. 4).

Рисунок 4 Концентрация цитокинов в сыворотке.

Примечания: (A) Концентрация TNF-α в сыворотке через 3, 24 и 48 ч после интраплантарного введения Carr. (B) Концентрация IL-10 в сыворотке через 3, 24 и 48 ч после интраплантарного введения Карра. Значения представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для 4 крыс на группу.* p <0,05 по сравнению с группой Карра в соответствующее время (двухфакторный дисперсионный анализ с последующим апостериорным тестом Даннетта).

Сокращения: Дисперсионный анализ, дисперсионный анализ; СА, клавулановая кислота; Карр, каррагинан; CFX, цефтриаксон; ДИК, диклофенак; IP, внутрибрюшинно; SEM, стандартная ошибка среднего.

Введение ДИК вызывало значительное снижение концентрации ФНО-α в сыворотке через 3 часа после введения (23,3±3,18 против 73,6±11,16 пг/мл; p <0.05), однако не было обнаружено существенной разницы в любой другой точке наблюдения через 24 часа (14,7±1,37 против 17,9±2,51 пг/мл, p >0,05) и 48 часов (15,8±2,58 против 16,7±2,29 пг/мл; ). р >0,05) по сравнению с Карром в соответствующее время. С другой стороны, мы не обнаружили никакой разницы в концентрации ИЛ-10 в сыворотке через 3 часа (1464,1±404,93 против 1329,2±526,03 пг/мл; p >0,05) или через 48 часов (489,4±294,39 против 192,1±32,08 пг/мл). мл, p >0,05) наблюдения; однако через 24 часа наблюдалось значительное увеличение концентрации ИЛ-10 в сыворотке крови (3919.6±903,20 против 533,0±80,49 пг/мл; p <0,05) момент времени по сравнению с Карром в соответствующий момент времени (рис. 4).

Между тем, введение CFX показало значительное снижение TNF-α через 3 ч (33,7±3,48 против 73,6±11,16 пг/мл; p <0,05) наблюдения, но не было значимой разницы ни через 24 часа (9,9±0,23 против 17,9±2,51 пг/мл; p >0,05) или 48 ч (13,3±1,80 против 16,7±2,29 пг/мл; p >0,05) по сравнению с Carr в соответствующее время.Кроме того, введение CFX не вызывало значительных различий в концентрации IL-10 в сыворотке в 3 (2094,7±307,38 против 1329,2±526,03 пг/мл; p >0,05), 24 (167,7±20,57 против 533,0±80,49 пг/мл; p >0,05), или 48 ч (612,0±95,74 против 192,1±32,08 пг/мл; p >0,05) по сравнению с Carr в соответствующее время (рис. 4).

С другой стороны, введение СА вызывало значительное снижение концентрации TNF-α через 3 часа после введения (38,1±5,98 против 73,6±11,16 пг/мл; p <0,05), но не через 24 (10,7±0,29 против 17,9±2,51 пг/мл; p >0,05) или 48 ч (14,5±1,82 против 16,7±2,29 пг/мл; p >0,05) в сравнение с Карром в соответствующее время. Кроме того, наблюдалось значительное увеличение концентрации ИЛ-10 через 3 часа после введения (2758,7±678,19 против 1329,2±526,03 пг/мл; p <0,05), но не через 24 часа (508,9±150,73 против 533,0±80,49 пг/мл; p >0,05) или 48 ч (137,7±5,25 против 192,1±32,0).08 пг/мл; p >0,05) по сравнению с Carr в соответствующее время (рис. 4).

Обсуждение

В этой работе мы представляем доказательства острого механического и термического антиаллодинического эффекта 2 BLM на модели карр-индуцированной воспалительной боли. Кроме того, мы показали, что этот эффект может быть связан с возможной прямой модуляцией сывороточных концентраций TNF-α и IL-10, вызванной введением как CA, так и CFX. Кроме того, мы обнаружили противовоспалительный эффект обоих БЛМ через 24 часа после введения.Чтобы подтвердить наш экспериментальный подход, мы определили, что Карр индуцирует механическую и термическую аллодинию, как сообщалось ранее, 16 , и подтвердили, что введение ДИК, нестероидного анальгетика, клинически используемого для лечения воспалительной боли, вызывает острый антиаллодинический эффект. 17

BLM, которые включают CFX и CA, в настоящее время представляют собой один из наиболее часто используемых терапевтических подходов в клинической области инфекционных заболеваний. 18 Однако Rothstein et al. 6 показали, что после 48 часов воздействия BLM в культурах астроцитов человека и крысы наблюдалось увеличение экспрессии транспортера глутамата GLT1.Хотя CA не тестировался, эти результаты могут быть распространены на эту молекулу, поскольку она имеет общую β-лактамную часть. 19 После этого открытия несколько групп сосредоточились на CFX и обнаружили, что он индуцирует нейропротекцию, 20 ингибирует восстановление поиска лекарств, 21 и проявляет противоэпилептические свойства. 22 В области исследования боли CFX индуцирует обезболивание как в моделях хронической невропатической 4 , так и в модели острой воспалительной 10 боли. В клинических условиях было также показано, что CFX вызывает обезболивание у пациентов с хроническим воспалительным артритом 23 и при послеоперационной боли. 5 С другой стороны, недавно было доказано, что СА вызывает обезболивание в модели невропатической боли после непрерывного ежедневного приема в течение как минимум 10 дней. 24 Однако в большинстве этих исследований результаты указывали на активацию GLT1 и, следовательно, на модуляцию глутаматергической нейротрансмиссии.

Наше исследование показало, что CFX не вызывает острого механического антиаллодинического эффекта. Тем не менее, он вызывал увеличение PWL через 3 часа после введения в модели подошвенного теста.Это открытие напоминает наш предыдущий отчет, поскольку мы также обнаружили, что введение CFX вызывало термическую анальгезию через 6 минут после внутрибрюшинного введения. 8 Мы предположили, что этот эффект может быть связан с дофаминергическим эффектом, индуцированным CFX, поскольку он блокируется при совместном применении с галоперидолом. Более того, острый антиаллодинический эффект CFX был ранее продемонстрирован Stepanovic-Petrovic et al., 10 на модели острой воспалительной боли, хотя они сообщили об умеренном антиаллодиническом эффекте CFX.Различие в эффекте в первые 3 ч по сравнению с таковым через 24 и 48 ч после введения ЦФХ можно объяснить плохим проникновением ЦФХ через интактный гематоэнцефалический барьер (ГЭБ). 25 Ранее было показано, что периферическое воспаление, вызванное Carr, изменяет спинной ГЭБ 26 и, следовательно, может увеличить проникновение CFX в ткани спинного мозга после нескольких часов индукции воспаления.

Кроме того, мы приводим доказательства острого антиаллодинического эффекта введения СА.CA используется в качестве адъюванта для других антибиотических эффектов BLM, поскольку он сам по себе оказывает незначительное антибиотическое действие, но ингибирует молекулы β-лактамазы, основной механизм резистентности для BLM. 19 Подобно CFX, CA индуцирует гиперэкспрессию GLT1, 7 , а также оказывает многочисленные эффекты на центральную нервную систему (ЦНС), например, вызывает высвобождение дофамина и серотонина, 27 оказывает нейропротекторное действие, 28,29 оказывает нейропротекторное действие анксиолитические свойства, 30 и проявляет медуллярную дофаминергическую модуляцию. 31 Также ранее сообщалось об остром антиаллодиническом эффекте на моделях воспалительной боли 32 , где сообщалось о значительном эффекте введения СА в острой фазе формалинового теста. Более того, у пациентов с болью в пояснице КА показал анальгезирующие свойства. 33

Опять же, подобно CFX, CA-опосредованные эффекты в нашей модели могут быть связаны с механизмами, отличными от гиперэкспрессии GLT1. Это утверждение связано с тем, что Rothstein et al. 6 продемонстрировали гиперэкспрессию GLT1 уже через 24 ч после введения КА в дозах, аналогичных использованной нами, а мы наблюдали тепловые антиаллодинические эффекты в первые 180 мин после его введения.Кроме того, как обсуждалось выше, те же самые дозы СА вызывают несколько других эффектов ЦНС.

Антиаллодинический эффект СА может быть связан с его концентрацией в ЦНС. На это указывает тот факт, что он обладает гораздо большей проницаемостью через интактный ГЭБ, 34 , а его кривая концентрация в сыворотке от времени имеет профиль, аналогичный нашим временным кривым PWT и PWL. 34,35 Действительно, мы наблюдали больший механический антиаллодинический эффект через 60 мин при дозе 10 мг/кг, что совпадает с максимальной концентрацией в сыворотке после введения дозы СА. 35

Наши результаты также показывают, что BLM могут обладать противовоспалительными свойствами, так как группы CFX и CA показали значительное уменьшение объема лапы через 24 часа после введения Carr. Кроме того, CA также индуцировала этот эффект через 3 часа после первоначального введения, что означает, что, хотя обе молекулы могут иметь сходные эффекты в качестве регуляторов экспрессии GLT1, их иммунологический эффект может быть различным. Более того, этот эффект напоминает анальгетические свойства СА (см. выше) и может быть связан также с облегчением прохождения через ГЭБ или другие ткани.

Наши данные предполагают механизм действия, отличный от индукции экспрессии генов, что объясняет антиаллодинический эффект CFX и CA. Мы посчитали, что это, вероятно, связано с прямой иммуномодуляцией, поскольку ранее было показано, что СА оказывает периферическое противовоспалительное действие. 12 Наши результаты показывают, что как CFX, так и CA уменьшают опосредованное Carr повышение концентрации TNF-α в сыворотке в той же степени, что и DIC. TNF-α, один из основных воспалительных цитокинов, может изменять ноцицепторную реакцию, увеличивая устойчивые к тетродотоксину Na+-каналы и снижая проводимость K+, усиливая передачу боли. 36 Кроме того, периферический TNF-α может транспортироваться ретроградно в задний рог спинного мозга, 37 таким образом потенцируя глутаматергическую передачу сигналов за счет подавления экспрессии субъединиц GluR2 рецепторов AMPA, которые вызывают рецептор AMPA. хорошо проницаем для кальция. 38 Это может указывать на то, что непрерывное введение либо CFX, либо CA при воспалительном заболевании может защитить пациента от развития хронической боли.

Кроме того, мы обнаружили, что СА вызывает значительное увеличение противовоспалительного цитокина IL-10 через 3 часа после введения.Это открытие открывает другую точку зрения на анальгетический эффект СА, поскольку он может быть связан с прямым иммуномодулирующим эффектом, а не только с дофаминергической модуляцией, как мы сообщали ранее. 7 Кроме того, повышение уровня IL-10 может объяснить острый противовоспалительный эффект, проявляемый введением СА (см. выше), тем самым подтверждая нашу предыдущую гипотезу. Более того, тот факт, что СА индуцирует более мощный эффект, чем CFX, при дозе в 100 раз меньшей и отсутствии антибиотического эффекта, делает его более подходящим для клинического применения.

Заключение

Таким образом, насколько нам известно, мы являемся первой группой, предоставившей доказательства того, что как CFX, так и CA вызывают анальгетический эффект на модели воспалительной боли Carr и что указанный обезболивающий эффект различается между каждым BLM. Кроме того, наши результаты свидетельствуют о противовоспалительном эффекте обеих молекул через 24 часа после введения и прямой модуляции концентрации TNF-α и IL-10 в сыворотке.

Благодарности

Эта работа была частью докторской диссертации Очоа-Агилар А. по биомедицинским наукам в Национальном автономном университете Мексики.Также эта работа была частично поддержана проектом UNAM-DGAPA-PAPIIT-IN204416.

Раскрытие информации

Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов в этой работе.

Ссылки

, , ,

1.

Kong KF, Schneper L, Mathee K. Бета-лактамные антибиотики: от антибиотиков к резистентности и бактериологии. АПМИС . 2010;118(1):1–36.

2.

Saudagar PS, Survase SA, Singhal RS.Клавулановая кислота: обзор. Биотехнолог Адв . 2008;26(4):335–351.

3.

Хайхашеми В., Дехдашти К. Антиноцицептивное действие клавулановой кислоты и ее профилактическая активность против развития толерантности к морфину и зависимости на животных моделях. Res Pharm Sci . 2014;9(5):315–321.

4.

Hu Y, Li W, Lu L, et al. Антиноцицептивная роль цефтриаксона при хронической нейропатической боли у крыс. Боль . 2010;148(2):284–301.

5.

Макалузо А., Бернабуччи М., Трабукко А. и др. Анальгетический эффект однократной предоперационной дозы антибиотика цефтриаксона у человека. Дж Боль . 2013;14(6):604–612.

6.

Rothstein JD, Patel S, Regan MR, et al. β-лактамные антибиотики обеспечивают нейропротекцию за счет увеличения экспрессии переносчика глутамата. Природа . 2005;433(7021):73–77.

7.

Ким Дж., Джон Дж., Лэнгфорд Д., Уокер Э., Уорд С., Ролз С.М. Клавулановая кислота усиливает экспрессию переносчика глутамата подтипа I (GLT-1) и снижает укрепляющую эффективность кокаина у мышей. Аминокислоты . 2016;48(3):689–696.

8.

Очоа-Агилар А., Сотомайор-Собрино М., Хаймес Р., Родригес Р., Планкарте-Санчес Р., Вентура-Мартинес Р.Антиаллодиническая активность цефтриаксона и клавулановой кислоты при однократном введении связана с модуляцией сывороточного ФНО-α и активацией дофаминергической и опиоидергической систем. Наркологический разработчик Res . 2017;78(2):105–115.

9.

Пиньо-Рибейро Ф.А., Верри В.А. мл., Чиу И.М. Взаимодействие ноцицепторного сенсорного нейрона с иммунитетом при боли и воспалении. Тренды Иммунол . 2017;38(1):5–19.

10.

Степанович-Петрович Р.М., Миков А.М., Томич М.А., Ковачевич Ю.М., Боскович Б.Д. Антигипералгетические/антиноцицептивные эффекты цефтриаксона и его синергетические взаимодействия с различными анальгетиками при воспалительной боли у грызунов. Анестезиология . 2014;120(3):737–750.

11.

Уэр М.А., Беннет Г.Дж. Описание клинического случая: длительно существующий комплексный регионарный болевой синдром, купированный цефалоспориновым антибиотиком. Боль . 2014;155(7):1412–1415.

12.

Banani A, Maleki-Dizaji N, Garjani A, Soraya H, Mostafalou S, Ziaee M. Клавулановая кислота оказывает противовоспалительное действие на каррагенин-индуцированную модель воспаления лапы при отеке крысы. Энн Биол Рез . 2012;3(7):3312–3320.

13.

Циммерманн М. Этические принципы исследования экспериментальной боли у животных, находящихся в сознании. Боль . 1983;16(2):109–110.

14.

НОМ-062-ЗОО-1999. Официальная мексиканская норма по уходу за животными и содержанию. Secretaría де Salud. Especificaciones técnicas para la producción, cuidado y uso de los animales de Laboratorio.

15.

Bennett GJ, Xie YK. Периферическая мононейропатия у крыс, вызывающая расстройства болевой чувствительности, подобные тем, которые наблюдаются у человека. Боль . 1988;33(1):87–107.

,
,

, 16. Мозг Res Protoc . 2004;13(1):37–44.

17.

Ku EC, Wsvary JM, Cash WD. Диклофенак натрия (GP 45840, Voltaren), мощный ингибитор синтетазы простагландинов. Биохим Фармакол . 1975;24(5):641–643.

18.

Paul M, Lador A, Grozinsky-Glasberg S, Leibovici L. Монотерапия бета-лактамными антибиотиками по сравнению с комбинированной терапией бета-лактамными и аминогликозидными антибиотиками при сепсисе. Кокрановская база данных Syst Rev . 2014;(1):CD003344.

19 . Антимикробные агенты Chemother . 1977; 11 (5): 852–857.

20.

Мимура К., Томимацу Т., Минато К. и др. Предварительное кондиционирование цефтриаксоном обеспечивает нейропротекцию у новорожденных крыс за счет активации транспортера 1 глутамата. Reprod Sci . 2011;18(12):1193–1201.

21.

Сари Ю., Смит К.Д., Али П.К., Ребек Г.В. Активация GLT1 ослабляет индуцированное сигналом восстановление поведения, связанного с поиском кокаина, у крыс. Дж Нейроски . 2009;29(29):9239–9243.

22.

Желенкович А.В., Йованович М.Д., Станимирович Д.Д., Боконич Д.Д., Оцич Г.Г., Бошкович Б.С. Благотворное влияние цефтриаксона на судороги, вызванные пентилентетразолом. Exp Biol Med (Maywood) . 2008;233(11):1389–1394.

23.

Капертон Э.М., Хайм-Дутой К.Л., Мацке Г.Р., Петерсон П.К., Джонсон Р.С. Цефтриаксоновая терапия хронического воспалительного артрита.Двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Медицинский стажер Arch . 1990; 150(8):1677–1682.

24.

Kristensen P, Gegelashvili G, Munro G, Heegaard A, Bjerrum O. β-лактамная клавулановая кислота опосредует чувствительное к транспорту глутамата облегчение боли в модели нейропатической крысы. Евр Джей Пейн . 2018;22(2):282–294.

25.

Нау Р., Зоргель Ф., Эйфферт Х.Проникновение лекарственных средств через гематоэнцефалический/гематоэнцефалический барьер для лечения инфекций центральной нервной системы. Clin Microbiol Rev . 2010;23(4):858–883.

26.

Хубер Д.Д., Хау В.С., Борг Л., Кампос К.Р., Эглетон Р.Д., Дэвис Т.П. Плотные соединения гематоэнцефалического барьера изменяются во время 72-часового воздействия воспалительной боли, вызванной λ-каррагинаном. Am J Physiol Heart Circ Physiol . 2002; 283(4):h2531–h2537.

27.

Кост Г.К., Селварадж С., Ли Ю.Б., Ким Д.Дж., Ан Ч., Сингх Б.Б. Клавулановая кислота увеличивает высвобождение дофамина в нервных клетках посредством механизма, включающего усиленный транспорт везикул. Neurosci Lett . 2011;504(2):170–175.

28.

Huh Y, Ju MS, Park H, et al. Клавулановая кислота защищает нейроны в фармакологических моделях нейродегенеративных заболеваний. Наркологический разработчик Res . 2010;71(6):351–357.

29.

Кост Г.К., Селварадж С., Ли Ю.Б., Ким Д.Дж., Ан Ч., Сингх Б.Б. Клавулановая кислота ингибирует MPP(+)-индуцированное образование АФК и последующую потерю дофаминергических клеток. Мозг Res . 2012;1469:129–135.

30.

Kim DJ, King JA, Zuccarelli L, et al. Клавулановая кислота: конкурентный ингибитор бета-лактамаз с новой анксиолитической активностью и минимальными побочными эффектами. Pharmacol Biochem Behav . 2009;93(2):112–120.

31.

Chan JS, Kim DJ, Ahn CH, Oosting RS, Olivier B. Клавулановая кислота стимулирует половое поведение у самцов крыс. Евро J Фармакол . 2009;609(1–3):69–73.

32.

Хайхашеми В., Дехдашти К. Антиноцицептивное действие клавулановой кислоты и ее профилактическая активность против развития толерантности к морфину и зависимости на животных моделях. Res Pharm Sci . 2014;9(5):315–321.

33.

Albert HB, Sorensen JS, Christensen BS, Manniche C. Антибиотикотерапия у пациентов с хронической болью в пояснице и отеком позвонков (изменения Modic типа 1): двойное слепое рандомизированное исследование клиническое контролируемое исследование эффективности. Позвоночник евро J . 2013;22(4):697–707.

34.

Мунк Р., Люти Р., Блейзер Дж., Зигенталер В.Фармакокинетика человека и проникновение клавулановой кислоты в ЦСЖ. J Антимикроб Chemother . 1981;8(1):29–37.

35.

Adam D, de Visser I, Koeppe P. Фармакокинетика амоксициллина и клавулановой кислоты, вводимых отдельно и в комбинации. Антимикробные агенты Chemother . 1982;22(3):353–357.

36.

Гудес С., Баркай О., Каспи Ю., Кац Б., Лев С., Биншток А.М.Роль медленных и персистирующих ТТХ-резистентных натриевых токов в остром повышении возбудимости ноцицепторов, опосредованном фактором некроза опухоли-α. J Нейрофизиол . 2015;113(2):601–619.

37.

Линь Ю.Т., Ро Л.С., Ван Х.Л., Чен Д.С. Повышающая регуляция рецепторов BDNF и trkB ганглиев задних корешков при воспалительной боли: исследование in vivo и in vitro. J Нейровоспаление . 2011;8:126.

38.

Копач О., Као С.К., Петралия Р.С., Белан П., Тао Ю.С., Войтенко Н. Воспаление изменяет трафик внесинаптических AMPA-рецепторов в тонически возбуждающихся нейронах пластинки II спинного рога крысы. Боль . 2011;152(4):912–923.

39.

Hargreaves K, Dubner R, Brown F, et al. Новый и чувствительный метод измерения тепловой ноцицепции при кожной гипералгезии. Боль . 1988; 32: 77–88.

В обновленной информации CDC рекомендует монотерапию цефтриаксоном при неосложненной гонорее

18 декабря 2020 г.

2 мин чтения

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ ПО ЭЛЕКТРОННОЙ ПОЧТЕ

Получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на

Пожалуйста, укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на .Подписывайся Нам не удалось обработать ваш запрос. Пожалуйста, повторите попытку позже. Если у вас по-прежнему возникает эта проблема, свяжитесь с нами по адресу [email protected]

Назад к Хелио

В обновленном руководстве, опубликованном в пятницу в MMWR , CDC рекомендовал внутримышечную дозу 500 мг цефтриаксона отдельно для лечения неосложненной гонореи.

С 2010 года CDC рекомендовал однократное внутримышечное введение 250 мг цефтриаксона и 1 г перорального азитромицина «в качестве стратегии предотвращения резистентности к цефтриаксону и лечения возможной коинфекции Chlamydia trachomatis », Sancta St.Cyr, MD, , и его коллеги из отдела профилактики ЗППП CDC.

«Растущая озабоченность по поводу рационального использования противомикробных препаратов и потенциального воздействия двойной терапии на комменсальные организмы и сопутствующие патогены в сочетании с продолжающейся низкой частотой резистентности к цефтриаксону и увеличением частоты резистентности к азитромицину привели к переоценке этой рекомендации», — написали они. .

Обновленное руководство теперь рекомендует добавлять 100 мг перорального доксициклина — не азитромицина — два раза в день в течение 7 дней, если не исключена коинфекция хламидий.

«Продолжение наблюдения за появлением резистентности к цефтриаксону путем эпиднадзора и сообщений медицинских работников о неэффективности лечения имеет важное значение для обеспечения постоянной эффективности рекомендуемых схем», — написали Сен-Сир и его коллеги.

Поддерживая обновленную рекомендацию, исследователи процитировали, среди прочих данных, данные исследования MORDOR, которые продемонстрировали повышенную устойчивость к антибиотикам среди детей, получавших дозы азитромицина два раза в год во время кампании массового дозирования в Африке.

«Хотя двойная лекарственная терапия с различными механизмами действия (цефтриаксон и азитромицин) могла бы смягчить появление сниженной чувствительности к цефтриаксону у N. gonorrhoeae , опасения относительно потенциального вреда для микробиома и влияния на другие патогены уменьшают преимущества поддержания двойная терапия в качестве рекомендуемой схемы лечения», — написали они.

Кроме того, St. Cyr и его коллеги сослались на фармакокинетические и фармакодинамические соображения для обновления, в том числе на то, что тесты показали, что предыдущая доза цефтриаксона в 250 мг была недостаточной для эрадикации чувствительных штаммов N.gonorrhoeae — и данные, показывающие изменения чувствительности к азитромицину.

Новая рекомендация однократной инъекции 500 мг предназначена для пациентов с массой тела менее 300 фунтов. Для пациентов с весом более 300 фунтов CDC рекомендует однократное внутримышечное введение 1 г цефтриаксона. St. Cyr и его коллеги говорят, что у пациентов с аллергией на цефалоспорины однократная внутримышечная доза 240 мг гентамицина плюс однократная пероральная доза 2 г азитромицина является вариантом.

«Постоянная поддержка усилий по профилактике и борьбе с гонореей остается фундаментальной, и предотвращение устойчивости к антибиотикам имеет решающее значение», — написали они.«Высокая частота фарингеальной гонореи со значительным недостаточным скринингом и более глубокое понимание широкой индивидуальной фармакокинетической и фармакодинамической изменчивости способствовали рекомендации по увеличению дозы цефтриаксона. Эти рекомендации также включают тест на излечение для людей с гонореей глотки, чтобы гарантировать эрадикацию или выявление возможной неэффективности лечения».

Перспектива

Вернуться к началу

Карлос дель Рио, Мэриленд

Обновленные рекомендации по лечению гонореи были разработаны после анализа фактических данных.Процент изолятов N. gonorreae со сниженной чувствительностью к азитромицину в настоящее время вызывает озабоченность и увеличился более чем в семь раз за последние 5 лет. Эта проблема особенно актуальна для мужчин, имеющих половые контакты с мужчинами, у которых почти 10% изолятов в настоящее время имеют пониженную чувствительность к азитромицину. В результате руководство CDC по лечению было изменено, и теперь рекомендуется вводить однократную внутримышечную дозу 500 мг цефтриаксона при неосложненной гонорее.Это в два раза превышает рекомендованную ранее дозу цефтриаксона. Совместное введение азитромицина по 100 мг перорально ежедневно в течение 7 дней по-прежнему рекомендуется для лечения коинфекции C. trachomatis .

Цефтриаксон в настоящее время является единственным доступным препаратом для лечения гонореи, и сохраняется возможность появления штаммов с пониженной чувствительностью к этому препарату. В будущем мы можем увидеть неизлечимую гонорею. По этой причине критически важны клинические испытания новых лекарств от гонореи.

Карлос дель Рио, Мэриленд

Член редколлегии журнала Infectious Disease News

Исполнительный заместитель декана

Медицинский факультет Университета Эмори

Раскрытие информации: Del Rio не сообщает о соответствующей финансовой информации.

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ ПО ЭЛЕКТРОННОЙ ПОЧТЕ

Получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на

Пожалуйста, укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на .Подписывайся Нам не удалось обработать ваш запрос. Пожалуйста, повторите попытку позже. Если у вас по-прежнему возникает эта проблема, свяжитесь с нами по адресу [email protected]

Назад к Хелио

Изменения фармакокинетики/фармакодинамики цефтриаксона на ранней стадии сепсиса: проспективное экспериментальное исследование на крысах | Journal of Translational Medicine

В этом исследовании использовались взрослые самцы крыс Sprague-Dawley (Harlan, Удине, Италия) весом 320–330 г.Протокол эксперимента был одобрен Комитетом по экспериментам на животных Министерства здравоохранения, Рим, Италия. Животных лечили в соответствии с итальянскими и европейскими рекомендациями по уходу за животными и экспериментам, DL 116/92, в соответствии с директивами Совета Европейского сообщества (86/609/EEC).

Крыс SD первоначально содержали по три в клетке в помещении с контролируемой температурой (18–22 °C) и влажностью при постоянном 12-часовом цикле свет/темнота и кормили стандартным крысиным кормом и водой без ограничений.После акклиматизации животных идентифицировали под номерами 1–36, а затем с помощью программы Microsoft Excel (Ломбардия, Италия) слепым оператором распределяли в одну из двух исследуемых групп. Восемнадцать крыс перенесли сепсис (вызванный перевязкой и пункцией слепой кишки («группа CLP»), а 18 крыс (получивших только лапаротомию) служили контролем («ложная группа»). В конце хирургической процедуры каждая крыса получала одинаковые количество СТХ внутрибрюшинно (внутрибрюшинно) (см. ниже). Схематическое изображение плана эксперимента показано на рис.1.

Рис. 1

Процедура CLP выполнялась, как описано ранее [12–14]. Вкратце, крысам, анестезированным пентобарбиталом натрия (65 мг/кг, внутрибрюшинно) и помещенным на гомоэотермическую грелку для поддержания температуры тела в диапазоне от 36,5 до 37,5 °C, сделали 3-сантиметровую срединную лапаротомию в передней части живота. Слепую кишку обнажали и перевязывали дистально к илеоцекальному клапану, не вызывая кишечной непроходимости, и пунктировали на антибрыжеечном крае 16G (1.игла диаметром 65 мм). Затем слепую кишку сжимали, чтобы вытолкнуть ее фекальное содержимое, и перемещали в брюшную полость; наконец, канюля 20 G была помещена в брюшную полость и прикреплена к брюшной стенке, чтобы впоследствии ввести CTX и/или собрать образцы брюшины. Переднюю стенку брюшины и кожу ушивают шелковыми швами 3-0. У «ложных» животных выполняли только лапаротомию и установку перитонеальной канюли. После операции всех крыс помещали индивидуально для сбора мочи в метаболические клетки в одинаковых условиях окружающей среды.

Для документирования развития сепсиса оценивали клиническую картину, смертность в течение экспериментального времени (6 ч) и рост микроорганизмов в брюшной полости. Для обнаружения и подсчета микроорганизмов образцы перитонеальной жидкости собирали в конце экспериментального времени (6 ч) и культивировали для роста грамположительных и грамотрицательных изолятов. Образцы инкубировали на маннитол-солевом агаре в течение 24 часов при 37 °C для грамположительных штаммов и наносили слоями на агар Мак-Конки III в течение 24 часов при 37 °C для грамотрицательных культур.Идентификацию видов определяли с помощью системы API (BioMerieux, Inc., Хейзелвуд, Миссури) с использованием панели грамположительных (GP) карт. Также изучалось влияние сепсиса на статус GBF и элиминацию CTX (см. ниже).

CTX был приобретен у Sigma-Aldricht Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Антимикробный раствор готовили ежедневно путем растворения порошка в стерильном физиологическом растворе. 100 мг/кг CTX вводили внутрибрюшинно через брюшную канюлю 20 G в объеме 1 мл; канюлю немедленно промывали 1 мл физиологического раствора.Доза CTX была выбрана в соответствии с предыдущими экспериментальными протоколами, чтобы имитировать человеческую дозу 1 г [15].

Концентрации в плазме и легких оценивали в течение первых 6 часов после введения CTX. Серийные образцы крови (взятые из хвостовой вены) собирали в следующие моменты времени: перед введением антибиотика (исходный образец) и через 1, 2, 4 и 6 ч (n = не менее четырех образцов каждый экспериментальный период). Кровь немедленно центрифугировали при 4000 об/мин в течение 15 минут при 4 °C, собирали плазму, делили на аликвоты и хранили при -80 °C до анализа.Образцы легких также собирали через 2, 4 и 6 ч после лечения антибиотиками для оценки проникновения антибиотиков в ткани легких. Наконец, образцы мочи были собраны из метаболической клетки после 6-часового интервала, чтобы измерить элиминацию CTX.

Концентрации CTX определяли в трех повторностях с помощью утвержденного метода диффузии в агар на больших чашках в соответствии со стандартами Good Laboratory Practice (GPL) с использованием агара Мюллера-Хинтона (Oxoid, Великобритания) в качестве культуральной среды и Escherichia coli K12. как тест-организм, с нижним пределом чувствительности 0.125 мг/л. Стандартные концентрации готовили ежедневно в объединенной плазме для образцов плазмы, в физиологическом растворе для образцов мочи и легких. Тестовый организм (1 × 10 6 КОЕ/мл) добавляли методом поверхностного слоя. После равномерного распределения культуры избыток жидкости удаляли пипеткой. Планшеты инкубировали при 37°C на воздухе в течение ночи. Наилучшие стандартные кривые были получены с помощью линейного регрессионного анализа. Коэффициент корреляции был не менее 0,99. Для всех образцов CTX точность внутри анализа варьировалась от 1.от 5 до 6,8%, а точность между анализами на уровне 0,75 мг/л варьировалась от 4,6 до 5,6%. Фильтры Amicon R 10 K (Sigma Aldrich, Милан, Италия) использовали для определения концентрации свободного лекарственного средства (пороговое значение фильтра составляет 10 000 номинального предела молекулярной массы). Короче говоря, 0,5 мл плазмы расслаивали на фильтрах и центрифугировали при 4000 g в течение 30 минут. Фильтрат собирали и анализировали с помощью того же биологического анализа, который описан выше.

У каждой крысы (не менее четырех крыс в каждой группе) измеряли диурез.Отмечали общую величину диуреза в интервале времени 0–6 ч. Мочу хранили при температуре -20 °C до исследования.

Изменения гликокаликса, связанного с GFB, в частности, в сиаловых компонентах, были выполнены с помощью гистохимии лектина. В конце экспериментального периода, после передозировки пентобарбитала, в брюшной полости был сделан срединный разрез, а образцы почек были зафиксированы в жидкости Карнуа и обработаны в обычном порядке для получения парафиновых срезов толщиной 6 мкм. Maackia amurensis агглютинин (MAA) и Sambucus nigra агглютинин (SNA) дигоксигенин (DIG), меченные лектины (Roche Diagnostic, Мангейм, Германия), использовали для идентификации сиаловых кислот, связанных α2–3 и α2–6 с галактозой или галактозамином, соответственно.Гистохимию лектина проводили, как описано ранее [16, 17]. Короче говоря, срезы обрабатывали 20% уксусной кислотой для ингибирования эндогенной щелочной фосфатазы, а затем обрабатывали 10% блокирующим реагентом в общем забуференном солевом растворе (TBS) для уменьшения фонового мечения. После этого срезы промывали в TBS и промывали в буфере 1, затем инкубировали в меченых DIG лектинах, разведенных в буфере 1 (1 и 5 мкл/мл для SNA и MAA соответственно) в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем срезы промывали в TBS, инкубировали с анти-дигоксигенином, конъюгировали с щелочной фосфатазой, разведенной в TBS, и промывали в TBS.Мечение участков, содержащих связанный лектин-дигоксигенин, получали путем инкубации предметных стекол с буфером 2, содержащим нитросиний тетразолий (NBT)/X-фосфат (Roche Diagnostics, Mannheim, Germany) [16, 18].

Контроль специфичности лектинов включал предварительную инкубацию лектинов с соответствующими гаптеновыми сахарами [16, 18]. Для оценки места окрашивания лектином с помощью световой микроскопии исследовали десять случайных полей (40× окуляр) в каждом срезе (пять срезов для каждого образца). Также был проведен денситометрический анализ интенсивности реактивности лектина путем измерения средней оптической плотности (OD) интересующей области (ROI, 40 мкм 2 площади) с использованием Национального института здоровья ImageJ (NIH, Бетесда, Мэриленд, США). программное обеспечение.Измеренные значения были нормализованы к фону [(OD-ODbkg)/ODbkg]. В каждом эксперименте анализировали не менее восьми областей интереса в десяти различных оптических полях.

Для анализа PD данные о концентрации CTX в плазме были использованы для разработки популяционной модели путем моделирования нелинейных смешанных эффектов (с использованием SAS 9.3 PROC NLMIXED).

Мы рассмотрели следующую компартментную модель первого порядка для этих

$$C_{it} = \frac{{Dk_{ei} k_{ai} }}{{Cl_{i} \left( {k_{ai} — k_{ei} } \right)}} \left[ {e^{{ — k_{ei} t}} — e^{{ — k_{ai} t}} } \right] + e_{it}$ $

где C это — наблюдаемая концентрация у i-го субъекта в момент времени t, D — доза цефтриаксона, k или — константа скорости элиминации для субъекта i , k и — константа скорости поглощения для субъекта i , Cl и это допуск для предмета и , а и это — нормальные ошибки.{{\beta_{3} }}$$

, где β s обозначают параметры фиксированных эффектов, а b равно обозначают параметры случайных эффектов с неизвестной ковариационной матрицей.

Для получения оценки эффекта и совместного распределения случайного эффекта был использован матричный двойной квазиньютоновский алгоритм для достижения сходимости.

Два режима дозирования (100 и 200 мг/кг, что соответствует 1 и 2 г для человека соответственно [15]) были смоделированы с использованием моделирования Монте-Карло на основе ФК-модели.Каждое моделирование генерировало профили концентрация-время от 10 000 крыс на режим дозирования. На основе этих данных были графически оценены T свободный  > MIC и вероятность достижения цели (PTA) для различных множителей MIC. Были рассмотрены значения МИК в соответствии с контрольными точками EUCAST, при которых чувствительность к CTX для E nterobacteriaceae составляла ≤1 мг/л.

Свободные концентрации (C свободный ) были оценены из общих концентраций ( C до ) с использованием параметров связывания СТХ in vivo и следующего уравнения, описанного Kodama et al.{2} + \frac{{4C_{{tot}} }}{{K_{{aff}} }}} \hfill \end{gathered} \right]$$

Использовалась следующая привязка CTX: общая концентрация сайтов связывания белка (nP) 517 мкмоль л -1 и константа аффинности связывания (K aff ) 0,0367 л мкмоль -1 .

Для оценки различий в непрерывных переменных между группами имитации и CLP использовали тест t или критерий Манна-Уитни. Выбор теста был сделан по результатам теста Шапиро-Уилка на нормальность распределения переменной в каждой группе.

Различие между группами имитации и CLP в фармакокинетических параметрах оценивали с помощью t-критерия Уэлча. Статистическая значимость была установлена ​​при значении p ниже 0,05.

Антигипералгезирующие/антиноцицептивные эффекты цефтриаксона и его синергические взаимодействия с различными анальгетиками при воспалительной боли у грызунов | Анестезиология

Наши результаты показывают, что цефтриаксон проявляет синергетическое взаимодействие с ибупрофеном, целекоксибом, парацетамолом или леветирацетамом, уменьшая вызванную каррагинаном механическую гипералгезию у крыс и корчи, вызванные уксусной кислотой, у мышей.Синергические фармакодинамические взаимодействия можно объяснить активацией различных дополнительных путей наблюдаемых действий. 49  Воспаление и повреждение, вызванное каррагинаном и уксусной кислотой, связаны не только с высвобождением глутамата и цитокинов (фактора некроза опухоли-α и интерлейкинов), но также с локальным высвобождением провоспалительных простагландинов, особенно серии Е, что приводит к активации и сенсибилизации соматических/висцеральных периферических ноцицептивных афферентов. 1,9,14,28,40  Гиперактивность и сенсибилизация афферентных волокон стимулируют высвобождение глутамата, цитокинов и простагландинов в спинном мозге, способствуя центральной сенсибилизации в нейронах задних рогов. 1,50–52 Ибупрофен, неселективный ингибитор ЦОГ-1/2, и целекоксиб, селективный ингибитор ЦОГ-2, проявляют антигипералгезическое/антиноцицептивное действие, блокируя синтез простагландинов на периферических и спинальных участках. 51,53–55  Удовлетворительный механизм действия парацетамола еще предстоит установить.Анальгетический эффект парацетамола можно объяснить его ингибирующим действием на периферическую и центральную ЦОГ-2, 19 , а также его активацией нисходящих опиоидных и серотонинергических путей. 56,57  На модели соматической воспалительной боли наша исследовательская группа показала, что леветирацетам оказывает антигипералгезирующее действие. Этот эффект, по крайней мере, частично опосредуется центральными рецепторами γ-аминомасляной кислоты типа А, периферическим аденозином, а также центральными и периферическими опиоидергическими, 5-гидрокситриптаминергическими и α 2 -адренергическими рецепторами. 21,22  Хотя мы впервые показали, что леветирацетам эффективен на модели висцеральной боли, наши результаты не проясняют механизм антиноцицептивного действия леветирацетама на этой модели. Тем не менее, можно предположить, что воспалительная природа ноцицепции в тесте корчей и индуцированная каррагинаном гипералгезия в тесте давления лапы, приводящая к состоянию облегчения, могут быть сходными. Повышенное поглощение глутамата и ослабленные уровни цитокинов, по крайней мере, в области позвоночника, способствуют антигипералгезии/антиноцицепции цефтриаксона в моделях воспалительной боли у грызунов. 11,13,37,38  Таким образом, синергические взаимодействия между цефтриаксоном и ибупрофеном, целекоксибом, парацетамолом или леветирацетамом можно объяснить вовлечением множества различных мишеней и участков в их антигипералгезивный/антиноцицептивный эффект в этих моделях воспалительной боли.

Фармакокинетические взаимодействия между цефтриаксоном и исследованными анальгетиками не входили в сферу нашей работы. Однако их нельзя исключить в комбинациях цефтриаксона с ибупрофеном и целекоксибом, проявляющих пролонгированное действие.В случае фармакокинетического взаимодействия, которое может привести к потенцированию фармакологических эффектов, вероятно, ожидается пролонгирование эффекта комбинации лекарственных средств. Таким образом, представляется, что может существовать более одного возможного механизма, объясняющего синергизм, наблюдаемый между цефтриаксоном и ибупрофеном/целекоксибом. Это пролонгирование эффектов препарата, в дополнение к их потенцированию, может быть полезным при потенциальном клиническом использовании этих комбинаций. Фармакокинетическое взаимодействие между цефтриаксоном и парацетамолом/леветирацетамом менее вероятно (длительность эффекта не изменилась).

Возникновение побочных эффектов при использовании всех этих комбинаций менее вероятно, поскольку дозы отдельных компонентов значительно ниже. Кроме того, поскольку компоненты имеют разные побочные эффекты, не ожидается добавления/потенцирования их индивидуальных эффектов.

В заключение, основные результаты нашего исследования: (1) цефтриаксон оказывает антигипералгезическое/антиноцицептивное действие как при соматической, так и при висцеральной воспалительной боли с более высокой эффективностью через 7 дней, чем после однократного введения; (2) цефтриаксон проявляет синергетическое взаимодействие с различными анальгетиками (ибупрофен, целекоксиб, парацетамол, леветирацетам) и превосходит монотерапию как при соматической, так и при висцеральной воспалительной боли.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.