Содержание

Живая дафния | Корм для рыб аквариумных

Здравствуйте читатели моего блога! Ветвистоусые рачки дафнии, с приходом холодов или пересыхания водоемов не завершают свою жизнь окончательно и в целях сохранения своей популяции они оставляют после себя покоящиеся яйца-эфиппии, чтобы жизнь, когда вернутся благоприятные условия вновь повторилась. Вот на этом месте более двадцати лет назад был водоем, в котором жила дафния.

Водоем пересох и сейчас здесь осталась только заросшая травой выемка, но в верхнем слое грунта должны сохраниться покоящиеся яйца дафнии-эфиппии. Расчищу небольшой участок от травы, наберу домой немного грунта в надежде на то что в земле все же остались эфиппии.

Теперь, чтобы вернуть рачков на свет божий нужно создать им благоприятные условия. Я наполню прозрачный пластиковый бачок водопроводной водой, осторожно высыплю грунт и оставлю бачок на подоконнике, чтобы родившиеся дафнии получали естественный солнечный свет.

В эти летние жаркие дни, вода в бачке хорошо прогревалась и уже на третий день я заметил первого родившегося рачка, количество дафний в последующие дни только увеличивалось. Я кормил дафний их естественной пищей и в этих целях я культивирую водоросль хлореллу.

Но создав наилучшие условия для дафний, я создал наилучшие условия и для сидячих коловраток. Эти многоклеточные организмы быстро расплодились и предпочитают не только плавать, но и сидеть на дафниях, облепив их плотным слоем. И если посмотреть через увеличительное стекло дафнии кажутся лохматыми.

Отяжелевшие и со скованным движением рачки дафнии валятся на дно, но даже в этом угнетенном состоянии они ведут борьбу за существование, продолжая не только жить, но и оставлять потомство. Чтобы избавиться от коловраток я пробовал менять воду, освещение и корм, но все оказалось напрасно и, наверное, избавиться от назойливых коловраток получится только тогда, когда дафнии разведутся в большом количестве и начнут доминировать в территории.

Во вторую неделю я переселил рачков в более просторный бачок, а еще через несколько дней в культиватор. Среди родившихся дафний моин родились и несколько рачков дафнии магна. Эти виды дафний миролюбивы, но при совместном содержании, более активные и плодовитые будут доминировать, ущемляя в территории менее активные виды.

Судя по небольшому количеству родившихся рачков магна, это видимо и происходило в водоеме. А чтобы подобное не произошло и в домашних условиях я решил отсадить дафний магна отдельно, а позже перенести в культиватор.

Вот так, забрав грунт из пересохшего водоема и создав благоприятные условия мы можем вернуть жизнь не только дафниям, но также и всему зоопланктону, который существовал в этом водоеме незадолго до гибели.

как разводить, как кормить рыб, где взять культуру

Дафния — довольно крупный род ветвистоусых, в котором насчитывается более 55 видов в фауне. За счёт своего роста (самка — до 5 мм, самцы — до 3) эти рачки получили второе название «водяная блоха».

Дафнию используют как живой корм для рыб. И если раньше для отлова ездили на реки и озёра, то сейчас этот вид можно разводить в домашних условиях.

Описание и разновидность водяных блох

Дафния относится к ракообразным планктонным существам, имеющих округлое тело и достаточное маленькие размеры. Этот вид вырастает до 6 мм, причём самка всегда крупнее самца. Их панцирь из хитина практически полностью обволакивает тельце. На голове у них расположен глаз и 2 своеобразные антенны, благодаря которым рачки могут делать резкие скачки в воде. Под глазом у дафнии расположен своеобразный клюв, под которым находятся обонятельные щетинки.

В природе количество самок в два раза превышает количество самцов.

Род дафнии имеет более 100 видов ракообразных, которые делятся на 10 различных семейств.

Название ракообразных Описание
Магна (Daphnia magna Straus) Самый крупный вид. Самки вырастают до 6 мм, самцы — до 2. Дают потомство каждые 14 дней, за один раз дают около 90 яиц. Продолжительность их жизни — от 15 до 21 недели.
Пулекс (Daphnia pulex De Geer) Вырастают до 5 мм. Откладывают яйца каждые 5 дней, за один раз дают около 25 яиц. Живут до 2 месяцев.
Лонгиспина (Daphnia longispina Muller) Бывают до 4 мм. В аквариумах не обитают.
Живородка (Моinа macrocopa, М. rectirostris) Самки достигают до 2 мм в длину, самцы — до 1 мм. Откладывают яйца каждые 2 дня, в одном помёте находится около 55 яиц. Проживает в среднем 3 недели.
Босмина (Bosmina) Самая малая разновидность дафнии, характерная особенность — ярко-чёрный цвет. В домашней среде не приживаются.

В таблице присутствуют самые распространённые и изученные виды, которые часто используют как живой корм для аквариумных рыб.

Как содержать дафнию в домашних условиях

Дафния достаточно неприхотлива в содержании, её можно выращивать в любой ёмкости. Лучше всего для этого подойдёт прозрачный резервуар, чтобы наблюдение за их развитием велось проще. Вода должна быть отстояна как минимум сутки, это требуется от очищения жидкости от хлора, который может быть губителен для ракообразных. Жёсткость воды большой роли не играет, а вот температурный режим стоит соблюдать. Температура не должна превышать 21 градус, это требуется для более быстрого размножения.

Заменять воду необходимо каждые 3 дня на воду с такой же температурой, но не более 25% от объёма. Дополнительно следует проводить чистку дна для избавления от мусора, который может испортить воду.

Также рекомендуют разместить в аквариуме улиток, которые способны проводить очистку резервуара и убирать остатки корма. Нелишним будет и установление аэрации, который обеспечит свежесть воды.

Чем и как кормить дафнию

Для дафний не существует специализированного корма и запретов на какой-либо ингредиент. Однако не стоит применять для кормления продукты, которые могут вызвать загноение или разложение в воде. К таким продуктам относят:

  • банановую кожуру;
  • кусочки бекона или форели;
  • кусочки мяса.

Оптимальный корм для ракообразных представлен в таблице.

Название корма Где взять?
Водоросли в порошкообразном состоянии Специализированные магазины
Сухие корма для личинок креветок Специализированные магазины
Сухие дрожжи с добавлением муки из расклада 1:1 Любой продовольственный магазин
Варёный яичный желток Домашнее приготовление
Кусочки яблок или огурца (использовать как подкормку, убирать остатки) Домашнее приготовление

Не стоит забывать, что нельзя перекармливать дафний. Корм необходимо высыпать в аквариум и перемешать в воде. Следите за тем, через сколько времени вода полностью очистится. Если вода стала прозрачной за несколько часов, это означает, что корма была мало. Но если вода на следующий день останется мутной — корма слишком много.

Кормить ракообразных рекомендуется 1-2 раза в день.

Где взять дафнию для размножения

Приобрести дафнию для разведения не составит большого труда, однако при каждом способе есть свои риски. Существуют такие способы получения ракообразных:

  1. Покупка в специализированных магазинах. Это один из самых безопасных способов получения здоровых ветвистоусых, при котором риск получения больных дафний или различных бактерий сводится к минимуму. К тоже там вы сможете купить всё необходимое для их содержания и получить консультацию.
  2. Заказать по интернету. Есть риск получить мёртвых дафний или не получить их совсем, поэтому внимательно отнеситесь к выбору магазина.
  3. Купить у опытного аквариумиста. Если вам попадётся честный и действительно опытный человек, то потери могут быть минимальные, как и в первом случае.
  4. Самостоятельный отлов. В летнее время практически во всех водоёмах дафнии водятся в больших количествах. Однако существует риск отловить вместе с ракообразными различные бактерии, которые смогут причинить вред не только ракообразным, но и вашим рыбам в дальнейшем.

Если вы хотите начать разведение дафний, то лучше приобретать их у проверенных источников, это сможет не только снизить расходы, но и создать благоприятную обстановку в аквариумах.

Как развести дафнию в домашних условиях

Для размножения дафний в домашних условиях подойдёт любая посуда, кроме пластика и нержавеющей стали, так как такая ёмкость может выделять токсичные вещества при взаимодействии с водой. Для успешного разведения необходимо выполнять такие условия:

  1. Соблюдение температуры от 18 до 22 градусов. Слишком высокая температура может замедлить процесс размножения.
  2. Пресная вода. Этот вид планктонов — пресноводный вид, и большая солёность может убить дафнию.
  3. Маленькая кислотность и отсутствие аммиака. Присутствие аммиака губительно не только для дафний, но и для всех живых организмов. Оптимальный водородный показатель — 6-10.
  4. Соблюдение режима аэрации. Слишком большие и интенсивные пузыри воздуха могут убить обитателей, а недостаток кислорода может спровоцировать развитие бактерий и паразитов в воде и на её поверхности.

Рекомендуется также на дно положить немного перегнивших листьев и посадить водоросли, отростками которых рачки будут питаться. Дополнительным подкормом могут послужить ещё дрожжи. Однако внимательно следите за цветом воды. Ярко-коричневый цвет может свидетельствовать о развитии бактерий. Количество выведенного потомства, а также частота выведения зависит от вида дафнии и ухода.

Как приготовить из дафнии корм для рыб

Заготавливать сухой корм необходимо в яркий солнечный день, вооружившись сачком, поверхностью для сушки и марлей. Необходимо следовать такому алгоритму:

  1. Вылавливаем дафнию сачком в ёмкость, не отжимая при этом, а просто даём воде стечь.
  2. Когда ёмкость заполнится наполовину, необходимо остальную половину разбавить водой.
  3. Вылавливать планктонов из ёмкости необходимо кружкой, постоянно зачерпывая воду снизу вверх быстрыми движениями. Это делается для того, чтобы рачки не осели на дно.
  4. Выливать воду следует на заранее расположенную раму, покрытую слоем марли.
  5. Сушка должна осуществлять против солнца. Лучи должны попадать перпендикулярно.

При правильной и равномерной сушке этот процесс осуществляется в течение 2-3 часов.

Хранить дафнию необходимо в картонной или деревянной коробке. Срок хранения такого корма от 6 месяцев до 1 года.

Как кормить рыб дафнией

Главное правило кормления — не перестараться с количеством корма, так как дафния способна очень быстро разлагаться, тем самым загрязняя воду и давая возможность развиваться бактериям, которые могут привести к болезням рыб. Также следует придерживаться таких советов:

  • всегда растирать корм в порошок перед употреблением — так как большие частицы не успевают разбухнуть в воде, а это чревато разбуханием корма в животе у рыбы;
  • перед употреблением залить корм кипятком и дать настояться, затем прополоскать путём отстаивания;
  • рекомендуется смешивать с гаммарусом для улучшения питательности корма.

Сухую дафнию можно использовать как основной корм, так и для прикормки.

Таким образом, дафния — идеальный живой и сухой корм для рыб, который лёгок в размножении, а также не требует особого ухода и затрат на содержание. Благодаря питательным свойствам этих рачков ваши рыбки станут здоровее и счастливее.

Живой корм для рыбок: дафния моина

Если у вас дома стоит собственный аквариум с рыбками, то вы, наверное, знакомы с дафнией. Она представляет собой живой корм для рыб и обладает огромным количеством полезных микроэлементов.

Если вам по какой-либо причине понадобились яйца дафнии, то купить яйца дафнии моины не составит особого труда. На сегодняшний день найти такой товар можно в интернете через обычных людей, которые занимаются разведением и продают их. Очень часто продают специальный песок, в котором содержатся эфиппии. Он реализуется буквально по 50 граммов, и если вы не найдете поставщика в вашем городе, то можно воспользоваться доставкой через почту. За время пересылки дафния моина никак не испортится. Срок годности в этом случае неограничен, а концентрация яиц очень высока, что позволяет использовать пакетик несколько раз.

 

Что представляет собой дафния моина?

Дафния – организм, который может быть представлен 3 видами, имеющими следующие размеры:

  • Личинка – до 0,8 мм.

  • Самец – до 2,0 мм.

  • Самка – до 5 мм.

Созревание яиц продолжается от 4 до 14 дней, а взрослые особи каждые 12 дней откладывают до 80 яиц. Но живут особи недолго – до 5 месяцев.

Если говорить об условиях обитания, то дафнии привередливы к окружающей среде. Оптимальной температурой для их нормальной жизнедеятельности является диапазон от 6 до 18 градусов тепла, а также продолжительность освещения – от 14 до 16 часов в сутки. Если вы прибегаете к выращиванию дома, то можно использовать минеральные удобрения для улучшения их жизнедеятельности. Подкормка должна обеспечиваться каждый день хлореллой или обычными дрожжами. Помимо этого, если у вас есть доступ к конскому навозу, также можно добавлять в воду. Ну и не стоит забывать про водоросли и микроорганизмы, которые делают среду обитания дафнии более привычной и естественной.

Где можно встретить дафнию моину

Чаще всего этот вид корма для рыбок обитает на стоячих водоемах. Ими могут являться лужи, озера, ямы с водой и многое другое. Очень часто они дают знать о себе при помощи окрашивания воды в грязно-зеленый или бордовый цвет. Питаются они обычно бактериями или растениями в самом водоеме.

Как самостоятельно вырастить дафнию моину

Если вы самостоятельно производите отлов дафнии моины, то, стоит учитывать, что она очень резко реагирует на освещение. Если оно очень яркое, то дафния уходит вглубь ко дну, а если слабое, то наоборот – стремится вверх или к источнику освещения.

Не смог пройти мимо :). Дафния.

На заглавной странице Википедии уже несколько дней показывают фото Дафнии в профиль.
Поскольку живая Дафния — любимый и наиболее часто покупаемый летом на Птичке корм для моей аквариумной скотины — помещаю это фото.

Оказывается, геном Дафнии содержит рекордное среди животных число генов, и треть из них не имеют аналогов у других организмов.
Дафнии (лат. Daphnia) — род планктонных ракообразных (ветвистоусых) размером от 0,2 до 6 мм в длину.
Населяют все типы стоячих континентальных водоемов, встречаются также во многих реках с медленным течением. Дафнии — типичные планктонные рачки, имеющие высокую численность и биомассу в лужах, прудах и озерах.
Большую часть времени проводят в толще воды, передвигаясь резкими скачками за счет взмахов вторых антенн, которые покрыты специальными оперенными щетинками (отсюда их обычное название — «водяные блохи», часто относимое ко всем ветвистоусым).
Основной пищей для дафний служат бактерии и одноклеточные водоросли. Суточное потребление пищи взрослой Дафнии может достигать 600 % от веса ее тела.
На грудных ножках расположены мешковидные дыхательные придатки — жабры. Некоторые виды (например, D. pulex, D. magna) при пониженном содержании кислорода в воде начинают синтезировать гемоглобин, так что их гемолимфа и всё тело окрашивается в красный цвет.
Геном дафнии состоит из 200 миллионов нуклеотидов, но при этом содержит минимум 30,9 тысяч генов — больше, чем у других до сих пор изученных многоклеточных животных (например в геноме человека около 20-25 тысяч генов) и более трети генов, обнаруженных в геноме дафнии, не имеют аналогов в других организмах.

Вот такая водяная блоха — супермен получается. И очень полезная.
Живые, сушеные и замороженные дафнии используются как корм для аквариумных рыбок или насекомых, содержимых в террариумах.
Дафнии — один из стандартных объектов для тестирования токсичности водных растворов химических соединений, применяемых в исследовании загрязнений водной среды. Дафнии чувствительны даже к небольшим концентрациям некоторых солей, например, добавление солей меди в концентрации 0,01 мг/л вызывает замедление движений рачков, они либо опускаются на дно, либо замирают у поверхностной плёнки воды.
Широкий общественный резонанс получил эксперимент с гибелью дафний в воде, пропущенный через фильтр Петрика.

Сумка для живых дафний | Водный корм для животных

Информация о доставке

Мы верим в необходимость заранее сообщать о стоимости доставки.

  • Стоимость доставки рассчитывается на кассе и зависит от содержимого корзины и почтового индекса.
  • Мы группируем товары вместе, чтобы вы могли получить скидку.
  • При оформлении заказа отображается общая стоимость доставки.
  • Заказы на сумму более 99 фунтов стерлингов имеют право на БЕСПЛАТНУЮ доставку.

Информация об отправке

  • Заказы отправляются с понедельника по пятницу, за исключением государственных праздников.
  • Заказы, оформленные до 12:00, будут отправлены в тот же день
  • Заказы, размещенные после 12:00, не гарантируются к отправке в тот же день.
  • Замороженные продукты не будут отправлены в пятницу, если не указана доставка в субботу.
  • Диспетчерские электронные письма и информация об отслеживании отправляются в течение дня.

Кто доставит мой заказ?

В зависимости от веса/размера вашего заказа и вашего почтового индекса вам будут предложены соответствующие варианты доставки на кассе.

  • Королевская почта
    • Royal Mail 24 — служба 1-го класса, целью которой является доставка в течение 1 дня после отправки (не гарантируется).
    • Royal Mail 24 Tracked — служба 1-го класса, целью которой является доставка в течение 1 дня после отправки (не гарантируется).
  • БТР
    • Материковая Великобритания — курьер на следующий день с доставкой до 12 или до 16 часов (за исключением некоторых почтовых индексов Шотландии).
    • Суббота — доставка до 12:00 субботы на материковую часть Великобритании, если заказ размещен до 12:00 пятницы (за исключением некоторых почтовых индексов Шотландии).
  • ДС
    • Материковая Великобритания — курьер на следующий день с доставкой до 13:00 или до 18:00 (за исключением некоторых почтовых индексов Шотландии).
    • Суббота — доставка в субботу на материковую часть Великобритании, если заказ размещен до 12:00 пятницы (за исключением некоторых почтовых индексов Шотландии).
  • Кингз/Таффнеллс
    • Некоторые тяжелые предметы, возможно, потребуется переместить из выбранной вами службы доставки в службу доставки на поддонах со сроком доставки 1–2 рабочих дня.

Оффшорная/удаленная доставка в Великобританию:

Заказы через Royal Mail не затрагиваются.Заказы, которые должны быть доставлены через курьера, могут (но не всегда) нести дополнительную плату за доставку, если вы живете в одном из следующих почтовых индексов; AB30-56, IV, HS, KA27-28, кВт, PA20-49, PA60-78, Ph27-26, Ph40-50, ZE, IM, BT и TR21-25.

Пожалуйста, разместите свой заказ как обычно, и мы свяжемся с вами перед отправкой вашего заказа, если это необходимо.


Оффшорная доставка за пределами Великобритании:

В настоящее время мы не принимаем заказы из-за пределов Великобритании.

Культура дафнии для живого корма

Делиться заботой!

Дафнии, широко известные как водяные блохи, являются отличным источником пищи для молоди и взрослых рыб. Их легко культивировать, и для поддержания колонии требуется очень мало ухода. Сбор урожая очень прост, так как это полностью водный живой корм, а это означает, что вам не нужно убирать, если вы случайно перекормили, как в случае с другими живыми кормами, такими как гриндальные черви.

Если у вас есть засаженный аквариум, в котором много остатков обрезков, которые вы не продаете, или просто остатки овощей, таких как салат, то это, вероятно, идеальная живая культура для вас.


Это руководство по выращиванию живых дафний является гостевым постом Джесси из Aquatic Mag!


Строительство колонии дафний

С помощью этого метода вы должны убедиться, что у вас есть место для нескольких ведер размером более 5 галлонов, которые будут получать достаточно солнечного света (обычно утром или днем). Когда вы найдете место, вам понадобится одно или несколько ведер с крышками. После этого все готово для выращивания живой дафнии!

Как сделать напольное ведерко для дафний

Для крышки ведра вырежьте два достаточно больших отверстия канцелярским ножом, чтобы обеспечить вентиляцию.Затем приклейте на отверстия тонкую сетку, например москитную сетку, чтобы не допустить проникновения жуков или мусора, которые вам не нужны. аэрация в толще воды, на которой процветают дафнии.

После этого вы можете добавить дехлорированную воду, а также растительный материал, который вы хотите оставить разлагаться. Вы можете поэкспериментировать с тем, какие растения вы хотите оставить там — обычно это водные растения или салат, но если у вас есть что-то еще в частоколе, попробуйте!

Через несколько дней можно засеять культуру (здесь можно приобрести дафнию).Это поможет вам начать работу, и как только ваша колония вырастет, вы сможете перенести их в другое ведро для большей производительности и безопасности в случае сбоя одного ведра.

Сбор урожая

Добыча дафний так же проста, как установка сети для ловли рыбы и выбор их. Они плавают медленно, отрывисто, поэтому вытащить хороший подсчет дафний довольно просто одним взмахом.

Вы сможете собирать урожай дафнии почти каждый день, не затрагивая популяцию, особенно при наличии 2+ ведер.Конечно, для больших аквариумов или большого поголовья рыб потребуется больше корма, поэтому масштабируйте его в соответствии с вашими потребностями.

Рыба-дискус, как показано на видео ниже, ежедневно получает от рыбоводов дафнию от ювенильной до взрослой стадии.



Рецепт еды для дафний

Так что же едят дафнии? Что ж, они фильтраторы, так что, помимо зеленой воды, которая поступает из разлагающихся растений, аэрации и солнечного света — вы хотите попробовать кормить их чем-то дополнительным, что даст достаточно питательных веществ и белка; потому что, конечно, ваши рыбы собираются их съесть, а это то, что им нужно.Я обнаружил, что использование смеси из 1 части сухих дрожжей/соевой муки и 1 части порошка спирулины отлично работает, но вы всегда можете поэкспериментировать.

  • Сухие дрожжи (или) соевая мука
  • Порошок спирулины
    • Высокое содержание белка
    • Антиоксиданты
    • Витамины группы В
    • Медь
    • Железо

Если у вас есть еще вопросы по созданию собственной колонии дафний или вы хотите поделиться своими советами и рекомендациями, обязательно оставьте комментарий ниже.Удачного рыболовства!

Фото на обложке: Vannlopper (Daphnia magna) от NTNU


Делиться заботой!

границ | Визуализация формальдегида в живых клетках и Daphnia magna с помощью реакции Aza-Cope с использованием флуоресцентного зонда с большими стоксовыми сдвигами

Введение

Формальдегид (FA) является распространенным экологическим токсином, но также эндогенно вырабатывается в результате метаболизма аминокислот или ксенобиотиков, катализируемого деметилазами и оксидазами, такими как лизин-специфическая деметилаза 1 (LDS1) (Shi et al., 2004) и чувствительной к семикарбазиду аминоксидазы (SSAO) (O’Sullivan, 2004). Физиологические уровни FA варьируются от 0,1 мМ в крови до 0,4 мМ внутриклеточно (Andersen et al., 2010; Tong et al., 2013b), и это хорошо зарекомендовавший себя нейротоксин, влияющий на память, обучение и поведение (Tong et al., 2013a; Тулпуле и Дринген, 2013). Однако из-за быстрорастущего списка оснований модифицированной ДНК (Jones, 2012; Kohli and Zhang, 2013) и РНК (Jia et al., 2011) повышенное содержание ЖК связано с многочисленными патологическими состояниями, включая нейродегенеративные заболевания (Tong и другие., 2011, 2013b) диабет, сердечные заболевания (Tulpule and Dringen, 2013) и болезнь Альцгеймера (Unzeta et al., 2007). Следовательно, разработка эффективного метода обнаружения ЖК в биосистеме является актуальной для понимания роли и процесса метаболизма ЖК.

По сравнению с обычным подходом к обнаружению, включая колориметрический анализ (Luo et al., 2001), ГХ-анализ (Bagheri et al., 2009; Chen et al., 2009), ВЭЖХ (Nash, 1953; Soman et al., 2008) , флуоресцентные зонды считаются одним из самых мощных инструментов из-за их упрощенной работы, высокой селективности и чувствительности, возможности обнаружения в реальном времени и биосовместимости (Tang et al., 2015; Чжоу и др., 2015; Брюммер и др., 2017а; Сюй и др., 2017). На сегодняшний день известно о ряде флуоресцентных зондов для визуализации ЖК на основе флуорофоров кремнийродола, 1,8-нафталимида, резоруфина и др. (Brewer, Chang, 2015; Roth et al., 2015; He et al. , 2016; Bruemmer et al., 2017b; Liu et al., 2017; Xie et al., 2017a,b; Bi et al., 2018; Zhou et al., 2018). Однако некоторые из них страдали недостатками, включая длительную и строгую процедуру синтеза, высокую фоновую флуоресценцию и небольшие стоксовы сдвиги, которые ограничивали их широкое применение в биологических системах.В присутствии FA парциальные зонды сталкиваются с относительно небольшими стоксовыми сдвигами, что не способствует разделению полос возбуждения и излучения, в свою очередь, не может эффективно минимизировать помехи, вызванные самопоглощением или автофлуоресценцией (Abeywickrama et al., 2017; Chen и др., 2017). Между тем, низкая фоновая флуоресценция полезна для улучшения отношения сигнал/шум (SNR), что позволяет четко визуализировать FA в сложной биологической среде. Следовательно, необходимо срочно разработать FA-селективный флуоресцентный зонд с большими стоксовыми сдвигами и низкой базальной флуоресценцией.

Здесь мы сообщаем о флуоресцентном зонде на основе реакции Aza-Cope ( BD-CHO ) для FA (рис. 1). Сердцевиной зонда был бенз-2-окса-1,3-диазол ( BD ), отличный флуорофор с легкой модификацией и хорошей стабильностью, который широко использовался для разработки флуоресцентных сенсоров (Taliani et al., 2007; Liu et al., 2011; Chen et al., 2012; Jiang et al., 2017), и гомоаллиловый амин в качестве группы, распознаваемой FA. BD-CHO демонстрирует хорошую селективность и чувствительность к FA по сравнению с другими реактивными карбонильными частицами (RCS) in vitro и впоследствии применяется для визуализации эндогенных или экзогенных FA в живых клетках и тканях.Примечательно, что, насколько нам известно, BD-CHO является первым флуоресцентным зондом для визуализации FA в Daphnia magna .

Рисунок 1 . Конструкция формальдегидного зонда БД-ЧО.

Экспериментальная секция

Материалы и инструменты

Если не указано иное, все химические вещества были приобретены у коммерческих поставщиков и использованы без дополнительной очистки. Перед использованием растворители очищали обычными методами.Все аналиты были получены традиционными методами. 4-Хлор-2,1,3-бензоксадиазол был приобретен у компании TCI Chemical. Силикагель (200–300 меш), используемый для колоночной флэш-хроматографии, был приобретен у Qingdao Haiyang Chemical Co., Ltd. 1 HNMR и 13 CNMR спектры определяли при 400 МГц и 100 МГц с использованием ЯМР-спектрометров Bruker. Химические сдвиги (δ) выражали в частях на миллион (частей на миллион, в CDCl 3 или ДМСО, с ТМС в качестве внутреннего стандарта). Между тем, масс-спектрометрия с высоким разрешением была достигнута с помощью приборов ESI-TOF и FTMS-ESI.Измерения флуоресценции проводили на флуоресцентном спектрофотометре CARY Eclipse компании Agilent Technologies, а спектры поглощения — на спектрофотометре PerkinElmer Lambda 35 UV-vis. Значения рН растворов проб измеряли прецизионным рН-метром рНС-3С. Квантовый выход флуоресценции получали на спектрометре квантового выхода C11347-11 Absolute PL. Анализы МТТ проводили на многорежимном считывателе микропланшетов Varioskan LUX. Инструментом, используемым для визуализации живых клеток и тканей мышей, была конфокальная микроскопия Olympus FV 1000, приобретенная у Olympus.

Определение пределов обнаружения

По данным флуоресцентного титрования наблюдалась линейная зависимость между интенсивностью флуоресценции (F 578 нм ) и концентрациями ЖК, предел обнаружения рассчитывали по следующей формуле: Предел обнаружения = 3σ/k. Где σ — стандартное отклонение холостых измерений ( n = 10), k — наклон между интенсивностью флуоресценции и концентрациями FA.

Анализы цитотоксичности

Метод МТТ использовали для оценки клеточной цитотоксичности BD-CHO .Перед экспериментом клетки MCF-7 с плотностью 1 ? Затем свежая культура содержала BD-CHO в диапазоне концентраций (0–30 мкМ) ( n = 6) для замены предыдущей среды и дальнейшая инкубация в течение 24 часов. После этого в каждую лунку добавляли по 10 мкл МТТ (5 мг/мл в PBS) и инкубировали еще 4 часа. Наконец, затем добавляли 100 мкл ДМСО для растворения формазана. Поглощение при 490 и 570 нм измеряли в устройстве для считывания микропланшетов, а жизнеспособность клеток (%) рассчитывали в соответствии со следующим уравнением: Жизнеспособность клеток (%) = [ОП570 (образец) — ОП490 (образец)] / [ОП570 (образец)] контроль) — OD490 (контроль)] × 100.

Инкубация и визуализация живых клеток

клетки MCF-7, клетки HepG2 и клетки HeLa были приобретены в Институте фундаментальных медицинских наук (IBMS) Китайской академии медицинских наук. Клетки MCF-7 культивировали в 90% среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM, Gibico) с добавлением 10% FBS (Gibico) и 1% антибиотиков (100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, Hyclone) в атмосфере 37°С. °C и 5% CO 2 . За день до визуализации клетки отделяли и пересаживали на чашки со стеклянным дном и оставляли для прилипания на 24 часа.Для визуализации экзогенной FA культуральную среду клеток HepG2 заменяли 2 мл бессывороточной DMEM, содержащей 10 мкМ флуоресцентного зонда (из исходного раствора 2 мМ в ДМСО), и клетки инкубировали в течение 30 мин. Затем клетки один раз промывали 2 мл PBS, а затем дополнительно инкубировали с FA (0,5 мМ) в течение 3 ч перед визуализацией. Для тестов на ингибирование клетки, обработанные FA, инкубировали с DMEM, содержащей бисульфит натрия (1 мМ), и промывали PBS, затем инкубировали с 10 мкМ флуоресцентным зондом в течение 3 часов перед визуализацией.Для эндогенной визуализации клетки MCF-7 предварительно обрабатывали ингибитором транилципромином (TCP) или GSK-LSD 1 или без него (контроль) в течение 20 часов с последующим обменом на DMEM без сыворотки, содержащую 10 мкМ флуоресцентного зонда, в течение 3 часов.

Флуоресцентная визуализация срезов почек

Срезы почек были подвергнуты хирургическому вмешательству у мышей Balb/c, что было одобрено Комитетом по уходу и использованию животных Даляньского медицинского университета. Свежие ткани почек инкубировали с 10 мкМ BD-CHO в течение 30 мин, затем добавляли 1 мМ ФК еще на 3 ч.Перед визуализацией ткани трижды промывали PBS. Для флуоресцентной визуализации использовали конфокальную микроскопию Olympus FV 1000 с 20-кратным объективом. Все эти эксперименты проводились в соответствии с соответствующими законами и руководящими принципами.

Флуоресцентная визуализация в

Daphnia magna

D. magna (возраст <72 ч) культивировали в чистой нехлорированной водопроводной воде при холодно-белом флуоресцентном свете со светлым (14 ч)-темным (10 ч) фотопериодом (Du et al., 2018). Животных инкубировали с BD-CHO (10 мкМ) в течение 1 ч, затем дважды промывали PBS, а затем инкубировали с ФК или без нее в течение 3 ч. Для флуоресцентной визуализации использовали конфокальную микроскопию Olympus FV 1000 с 4-кратным объективом.

Синтез BD-CHO

Процедура синтеза показана на рисунке 2. Соединение 1 : 4-хлор-2,1,3-бензоксадиазол (1,0 г, 6,5 ммоль), этанол (10 мл), гидрохлорид диметиламина (3,0 г, 36,7 ммоль), и триэтиламин (6.0 мл) смешивали в автоклаве на 25 мл при комнатной температуре и быстро закрывали. Затем бомбу нагревали при перемешивании при 150°С в течение 48 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и растворитель удаляли при пониженном давлении. После добавления к остатку раствора NaOH (2 М, 20 мл) смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили безводным сульфатом магния. После удаления растворителя продукт очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя смесь дихлорметан:петролейный эфир (1:1) в качестве элюента, с получением желаемого продукта и выходом твердого вещества красного цвета (965 мг, 91.0%). 1 H ЯМР (400 МГц, CDCl 3 ) δ (м.д.): δ 7,18 (д, Дж = 7,3 Гц, 1H), 7,02 (с, 1H), 6,06 (с, 1H), 3,25 ( с, 6Н). 13 C ЯМР (101 МГц, CDCl 3 ) δ (м.д.): 150,87, 145,72, 139,87, 133,36, 104,86, 102,13, 41,99, 1,01. МС (ESI-TOF): вычислено для C 8 H 10 N 3 O + , [M+H] + , m/z, 164,08, найдено: 164,05.

Рисунок 2 . Синтетическая процедура BD-CHO.

Соединение 2: POCl 3 (2 мл, 21 ммоль) и безводный ДМФ (10 мл, 128 ммоль) медленно смешивают при перемешивании в круглодонной колбе при 0°С.Затем к смеси добавляли безводный ДМФА (5 мл), содержащий соединение 1 (960 мг, 5,9 ммоль). Наконец, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре около 6 часов. Реакцию гасили, выливая смесь в воду со льдом (50 мл). После доведения рН до ~ 9 с помощью 10% NaOH смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили безводным сульфатом магния. После удаления растворителя продукт очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя петролейный эфир:этилацетат (1:1) в качестве элюента, с получением желаемого продукта и выходом твердого вещества красного цвета (743 мг, 65.8%). 1 H ЯМР (400 МГц, CDCl 3 ) δ (м.д.): 10,03 (с, 1H), 7,89 (д, J = 8,2 Гц, 1H), 6,15 (д, J = 8,2 Гц , 1Н), 3,58 (с, 6Н). 13 C ЯМР (101 МГц, CDCl 3 ) δ (м.д.): 185,93, 147,71, 145,08, 144,87, 142,15, 111,46, 102,35, 42,90, 1,01. HRMS (ESI-TOF): рассчитано для C 9 H 10 N 3 O2+, [M+H] + , m/z, 192,0773, найдено: 192,0767.

БД-ЧО

К раствору, содержащему соединение 2 (192 мг, 1.0 ммоль) в 20 мл CH 3 OH, 6 мл раствора NH 3 (7,0 М в CH 3 OH, 42 ммоль) добавляли при 0°C в атмосфере аргона и перемешивали 30 мин. После этого добавляли пинаколовый эфир аллилбороновой кислоты (0,48 мл, 2,5 ммоль), смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение ночи. Растворитель удаляли при пониженном давлении, а остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя смесь дихлорметан:метанол (50:1) в качестве элюента, с получением зонда BD-CHO в виде желтого твердого вещества (101 мг, 43.4%). 1 H ЯМР (400 МГц, CDCl 3 ) δ (м.д.): 7,06 (д, J = 7,5 Гц, 1H), 5,94 (д, J = 7,6 Гц, 1H), 5,68 (дд , J = 17,0, 9,7 Гц, 1H), 4,99 (дд, J = 19,8, 13,8 Гц, 2H), 4,20 (т, J = 6,6 Гц, 1H), 3,19 (с, 6H), 2,71–2,54 (м, 1Н), 2,48 (дд, Дж = 14,2, 7,2 Гц, 1Н), 2,09 (с, 2Н). 13 C ЯМР (101 МГц, CDCl 3 ) δ (м.д.) 149,25, 146,08, 138,78, 135,27, 129,21, 120,35, 117,72, 105,15, 52.63, 41,94, 41,81. HRMS (ESI-TOF): рассчитано для C 12 H 12 N 3 O , [M-NH 2 ] , m/z, 216,1137.1, найдено: 1 32,1137.1

Результаты и обсуждение

Дизайн и синтез BD-CHO

Чтобы разработать селективный и чувствительный флуоресцентный зонд для обнаружения FA, мы сосредоточились на гомоаллиламиновом триггере, который может особым образом реагировать с FA и образовывать электроноакцепторную альдегидную группу посредством реакции перегруппировки Aza-Cope.Бенз-2-окса-1,3-диазол ( BD ) был выбран в качестве ядра флуорофора из-за легко регулируемого внутримолекулярного переноса заряда (ICT) и превосходных фотофизических свойств. В этом зонде диметиламинная группа была введена в качестве электронодонорной группы (EDG) и гомоаллиловый амин в качестве группы, распознаваемой FA. Исходный BD-CHO почти не проявляет флуоресценции из-за плохой электроноакцепторной способности гомоаллиламинового фрагмента. После добавления FA амин селективно реагирует с FA с образованием промежуточного соединения имина, которое одновременно подвергается перегруппировке 2-аза-копа и окончательному гидролизу с образованием альдегидной группы с сильной электроноакцепторной способностью (рис. 1) (Brewer et al., 2017; Доу и др., 2017). В результате процесс внутримолекулярного переноса заряда (ICT) от π-сопряженного донора электронов (группа диметиламина) к альдегидной группе открывается, демонстрируя реакцию «включения» флуоресценции.

Зонд BD-CHO был легко приготовлен сочетанием соединения 2 с пинаколовым эфиром аллилбороновой кислоты в присутствии раствора NH 3 . Промежуточные продукты и целевое соединение были хорошо охарактеризованы с помощью 1 H ЯМР, 13 C ЯМР, HR-MS (рис. S11–S16).

Спектральные свойства BD-CHO

Все спектры BD-CHO исследовали в буфере HEPES, содержащем ДМСО (об./об. = 1:1, 20 мМ, рН 7,4). При добавлении FA максимальная длина волны поглощения сместилась с 450 до 460 нм (рис. S1). Зонд практически не флуоресцировал в отсутствие ФА, что делало BD-CHO более подходящим зондом для высокочувствительного детектирования ФА. Однако в присутствии 5 мМ FA интенсивность флуоресценции резко увеличилась примерно в 55 раз при 578 нм с возбуждением при 460 нм (рис. 3А), а квантовый выход флуоресценции увеличился с 0.015 до 0,080. Важно отметить, что BD-CHO продемонстрировал большие стоксовы сдвиги (118 нм) в ответ на FA (рис. S2), что полезно для флуоресцентного обнаружения ввиду уменьшения самопоглощения. При добавлении 5 мМ FA интенсивность флуоресценции BD-CHO резко увеличилась в течение 50 минут и достигла плато примерно через 3 часа (рис. S3). Был линейный зависящий от концентрации флуоресцентный ответ с BD-CHO по отношению к FA в диапазоне от 0 до 0,8 мМ с высоким коэффициентом корреляции R 2 = 0.991 (рис. 3В). Таким образом, был рассчитан предел обнаружения около 9,7 мкМ, что позволяет использовать его для обнаружения внутриклеточных ЖК (100–400 мкМ) (Andersen et al., 2010).

Рис. 3. (A) Спектры флуоресценции 10 мкМ BD-CHO после добавления ФК в буфер HEPES (20 мМ, pH 7,4, 50% ДМСО). (B) Линейная зависимость между интенсивностью флуоресценции BD-CHO (10 мкМ) и концентрацией ЖК (0–800 мкМ) в буфере HEPES (20 мМ, рН 7,4, 50% ДМСО).λ ex = 460 нм, щель: 10/10 нм.

Селективность и влияние pH

Высокая селективность необходима и имеет решающее значение для оценки применимости флуоресцентного зонда. Поэтому мы исследовали способность BD-CHO отличать ЖК от различных соответствующих видов, включая бензальдегид (БА), ацетальдегид (АА), глутаральдегид (ГА), o -фталевый альдегид (ОПА), глиоксаль (ГО), метилглиоксаль (MGO), биотиолы (Cys, Hcy и GSH), H 2 O 2 , HClO.Как показано на рисунке 4A, незначительные изменения интенсивности флуоресценции BD-CHO были получены в присутствии возможных мешающих аналитов, но 55-кратное усиление флуоресценции с FA. Изменение флуоресценции также можно наблюдать невооруженным глазом при освещении УФ-лампой 365 нм (рис. 4С). Для дальнейшей оценки селективности были проведены конкурентные эксперименты в присутствии 5 мМ FA и различных других видов (рис. 4B). BD-CHO по-прежнему реагировал на FA сигналом включения флуоресценции в присутствии конкурирующих видов.Эти результаты демонстрируют способность BD-CHO специфически распознавать ЖК по сравнению с другими родственными аналитами в сложной биологической системе. Впоследствии мы исследовали влияние pH на распознавание FA. Как показано на рисунке 5A, флуоресцентный ответ BD-CHO на FA не зависит от pH в диапазоне 5,0–8,0, что указывает на его пригодность для визуализации в физиологических условиях.

Рисунок 4. (A) Спектры флуоресценции 10 мкМ BD-CHO в присутствии FA (5 мМ) и других различных аналитов (5 мМ) в буфере HEPES (20 мМ, pH 7.4, 50% ДМСО). (B) Интенсивность флуоресценции BD-CHO (при 578 нм) в присутствии различных аналитов (черный) или в присутствии как FA, так и соответствующего аналита (красный): формальдегид (FA), бензальдегид (BA), ацетальдегид (AA), глутаровый альдегид (GA), o -фталевый альдегид (OPA), глиоксаль (GO), глутатион (GSH), цистеин (Cys), гомоцистеин (Hcy), H 2 O 2 , HClO , Метилглиоксаль (MGO) в буфере HEPES (20 мМ, pH 7,4, 50% ДМСО). λ ex = 460 нм, щель: 10/10 нм. (C) Цветные флуоресцентные изображения BD-CHO в FA и других аналитах при освещении УФ-лампой с длиной волны 365 нм.

Рис. 5. (A) Флуоресцентные ответы BD-CHO (10 мкМ) в присутствии (красный) и в отсутствие (пробел) FA в буфере HEPES (20 мМ, pH 7,4, 50% ДМСО) с различными значениями pH . λ ex = 460 нм, щель: 10/10 нм (B) Клеточная цитотоксичность BD-CHO в клетках MCF-7 и HepG2.

Распознанный механизм

Возможный механизм обнаружения показан на рисунке 1.Сначала гомоаллиламиновый фрагмент в BD-CHO реагировал с FA с образованием 2-аза-1,5-диенов, а затем происходила перегруппировка 2-аза-копа путем [3,3]-миграции с образованием α, β-ена. , который гидролизовали в водном растворе с выделением сильно флуоресцентного соединения 2 . Для проверки предложенной гипотезы мы сравнили спектры поглощения и флуоресценции BD-CHO в присутствии ФК со спектрами соединения 2. Как показано на рисунке S4, спектры поглощения и флуоресценции BD-CHO + FA были почти идентичны соединению 2 , что указывает на то, что соединение 2 может быть конечным продуктом реакции BD-CHO с FA.Между тем, анализ ВЭЖХ использовали для дальнейшего подтверждения обнаруженного продукта. Как показано на фиг. 6, хроматографические пики соединений 2 и BD-CHO были обнаружены при 10,27 и 11,85 мин соответственно. Кроме того, при добавлении FA (5 мМ) и инкубации с BD-CHO в течение 2 ч продукт реакции проявлял хроматографический пик при 10,27 мин, который полностью соответствовал соединению 2; также наблюдался слабый пик на 11,85 мин, соответствующий зонду BD-CHO .Кроме того, HR-MS подтвердил этот результат, где заметный пик сигнала при m/z = 214,0584 был отнесен к [M + Na] + (соединение 2 , рассчитано для 214,0592) (рис. S5). Это согласуется с ранее описанным механизмом (Xu et al., 2016; Yang et al., 2018).

Рисунок 6 . ВЭЖХ-анализ соединения 2, зонд BD-CHO до (черный) и после (красный) инкубации с FA (5 мМ) при 37°C в течение 2 часов.

Флуоресцентная визуализация экзогенных и эндогенных ЖК в живых клетках

Вдохновленные превосходными фотофизическими свойствами BD-CHO и его селективной реакцией на FA in vitro , мы попытались оценить пригодность BD-CHO для мониторинга FA в живых клетках.Соответственно, цитотоксичность BD-CHO была установлена ​​с использованием анализов МТТ с клетками MCF-7 и клетками HepG 2. Было обнаружено, что жизнеспособность клеток превышает 94% при инкубации клеток в течение 24 часов с 10 мкМ BD-CHO , демонстрируя низкую цитотоксичность BD-CHO (рис. 5B). Зонд имеет хорошую стабильность в биологической среде (рис. S6).

Впоследствии мы оценили способность BD-CHO визуализировать изменения ЖК в живых клетках с помощью конфокальной микроскопии.Клетки HepG2 обрабатывали 10 мкМ BD-CHO в течение 30 минут при 37 ° C, при возбуждении на длине волны 488 нм он демонстрировал почти невидимый сигнал флуоресценции (рис. S7a–c). Когда загруженные зондом клетки обрабатывали 0,5 мМ FA еще в течение 3 часов, наблюдался явный сигнал зеленой флуоресценции (рис. S7d-f). NaHSO 3 использовали для негативных экспериментов, так как он может эффективно реагировать с FA для разрушения центральной карбонильной группы (Tang et al., 2016). Когда клетки были предварительно обработаны 0,5 мМ FA и 1 мМ NaHSO 3 в течение 30 минут, а затем культивированы с BD-CHO в течение 3 часов, зеленая флуоресценция стала слабой (рис. S7g-i).Известно, что из-за сверхэкспрессии LSD1 клетки MCF-7 демонстрируют повышенные уровни FA (Liu et al., 2013). При фармакологическом ингибировании LSD1 уровни FA значительно снижались (Brewer and Chang, 2015). Клетки MCF-7 обрабатывали BD-CHO , и клетки демонстрировали сильный сигнал зеленой флуоресценции (рис. 7Ab), что указывало на высокий уровень FA в клетках MCF-7. Однако, когда клетки MCF-7 инкубировали с 1 мкМ GSK-LSD1 (Munoz, 2015) (ингибитор LSD1 с IC 50 42 нМ), а затем с BD-CHO , снижение BD-CHO Наблюдался сигнал флуоресценции по сравнению с контрольными клетками (фиг. 7Ae).Кроме того, обработка 20 мкМ транилципромина (Lee et al., 2006) (TCP, ингибитор LSD1 с IC 50 2 мкМ) также ослабляла флуоресценцию BD-CHO (рис. 7Ah, B). Между тем, также было проведено обнаружение эндогенных изменений FA в клетках HeLa (рис. S8). В совокупности данные показали, что BD-CHO способен обнаруживать экзогенно и эндогенно продуцируемые ЖК в живых клетках.

Рис. 7. (A) Изображение флуоресценции для BD-CHO в клетках MCF-7, обработанных GSK-LSD1 и TCP.(a-c) пустой, (d-f) Клетки были предварительно обработаны 1 мкМ GSK-LSD1 в течение 20 часов, а затем BD-CHO (10 мкМ) в течение 3 часов, (g-i) Клетки были предварительно обработаны 20 мкМ TCP в течение 20 часов. ч, а затем с BD-CHO (10 мкМ) в течение 3 ч. λ ex = 488 нм, собрано 550–600 нм. (B) Средняя интенсивность флуоресценции клеток MCF-7, обработанных холостой пробой, GSK-LSD1 и TCP. Масштабная линейка: 20 мкм.

Флуоресцентная визуализация тканей почек

Далее мы исследовали, может ли BD-CHO отображать жирные кислоты в срезах живой почечной ткани.Срезы ткани почек, пропитанные только раствором 10 мкМ BD-CHO в течение 3 ч, показали незначительный сигнал флуоресценции (рис. 8а, рис. S9). Напротив, когда срезы ткани почек мышей вымачивали в 10 мкМ растворе BD-CHO в течение 30 минут, а затем вымачивали в растворе FA еще в течение 3 часов, наблюдались сильные сигналы зеленой флуоресценции (рис. 8b, c) с глубина проникновения составляет примерно до 100 мкм (рис. 8d, рис. S10). Эти результаты показали, что BD-CHO способен визуализировать FA в срезах почечной ткани.

Рисунок 8 . Флуоресцентное изображение срезов свежей ткани почки, окрашенных 10 мкМ BD-CHO в течение 1 часа, а затем обработанных без (а) и с (б) 0,5 мМ (в) 1 мМ FA в течение следующих 3 часов. (d) Флуоресцентное изображение срезов ткани почки, инкубированных с BD-CHO и FA на разной глубине (0–100 мкм). λ ex = 488 нм, собрано 550–600 нм. Масштабная линейка: 100 мкм.

Флуоресцентная визуализация в

Daphnia magna

Способность BD-CHO обнаруживать FA in vivo была оценена на живом Daphnia magna , широко используемом животном в качестве стандартного тестового организма Агентства по охране окружающей среды (Lovern and Klaper, 2006), с использованием флуоресцентной визуализации.Необработанная и обработанная FA Daphnia magna не показала сигнала флуоресценции (рис. 9a–f). Он демонстрирует слабый зеленый сигнал флуоресценции, когда Daphnia magna инкубировали с 10 мкМ BD-CHO в течение 3 ч при 25 °C (рис. 9g–i). Напротив, при последовательной обработке BD-CHO и другой концентрации FA, Daphnia magna демонстрирует заметное усиление флуоресценции в зеленом канале (рис. 9j–o), указывая на то, что BD-CHO можно использовать для флуоресцентная визуализация FA у живых Daphnia magna .

Рисунок 9 . Флуоресцентная визуализация живых Daphnia magna. Daphnia magna , обработанная PBS (a–c) , FA (d–f) и зондом (g–i) независимо. Daphnia magna инкубировали с 10 мкМ BD-CHO в течение 1 часа, а затем с 0,5 мМ (j–l) и 1 мМ (m–o) FA еще в течение 3 часов перед визуализацией. λ ex = 488 нм, собрано 550–600 нм. Масштабная линейка: 300 мкм.

Выводы

Таким образом, был разработан и синтезирован эффективный флуоресцентный зонд BD-CHO для селективного обнаружения FA посредством реакции 2-Aza-Cope с большими сдвигами Стокса.В присутствии ФК интенсивность флуоресценции значительно увеличивалась (примерно в 55 раз) и демонстрировала большие стоксовы сдвиги (около 118 нм). Механизм распознавания BD-CHO FA был подтвержден анализами ВЭЖХ и МС. Зонд использовали для флуоресцентной визуализации экзогенных и эндогенных ЖК в живых клетках с низкой цитотоксичностью и аутофлуоресценцией. Кроме того, BD-CHO также может обнаруживать ЖК в срезах живой почечной ткани с глубиной проникновения примерно до 100 мкм.Что еще более важно, BD-CHO впервые был успешно применен для мониторинга экзогенных изменений ЖК у Daphnia magna . Все результаты показали, что BD-CHO потенциально может служить полезным инструментом для изучения патологоанатомической и физиологической роли ЖК в сложной биосистеме.

Заявление об этике

Это исследование было проведено в соответствии с рекомендациями Комитета по уходу и использованию животных Даляньского медицинского университета. Протокол был одобрен Комитетом по уходу и использованию животных Даляньского медицинского университета.

Вклад авторов

MY отвечал за разработку и проведение экспериментов. JD и SL отвечали за характеристику соединений. JF, JW и XP отвечали за обсуждение и редактирование статьи.

Финансирование

Работа выполнена при финансовой поддержке Национального научного фонда Китая (21576037, 21676047, 21421005, 21703025), NSFC-Liaoning United Fund (U1608222).

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fchem.2018.00488/full#supplementary-material

.

Ссылки

Abeywickrama, C.S., Wijesinghe, KJ, Stahelin, R.V., and Pang, Y. (2017). Ярко-красные производные пирена с большим стоксовым сдвигом для окрашивания ядер. Хим. коммун. 53, 5886–5889. дои: 10.1039/c7cc03417b

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Андерсен, М.E., Clewell, H.J.III., Bermudez, E., Dodd, D.E., Willson, G.A., Campbell, J.L., et al. (2010). Формальдегид: интеграция дозиметрии, цитотоксичности и геномики для понимания дозозависимых переходов для эндогенного соединения. Токсикол. науч. 118, 716–731. doi: 10.1093/toxsci/kfq303

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Багери, Х., Гамбарян, М., Салеми, А., и Эс-Хаги, А. (2009). Следовое определение свободного формальдегида в вакцинах АКДС и АКДС и дифтерийно-столбнячного антигена методами однокапельной микроэкстракции и хромато-масс-спектрометрии. Дж. Фарм. Биомед. Анальный. 50, 287–292. doi: 10.1016/j.jpba.2009.04.039

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Bi, A., Gao, T., Cao, X., Dong, J., Liu, M., Ding, N., et al. (2018). Новый зонд на основе нафталимида для сверхбыстрого, высокоселективного и чувствительного обнаружения формальдегида. Сенсорные приводы B Chem. 255, 3292–3297. doi: 10.1016/j.snb.2017.09.156

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Брюэр, Т.Ф., Бургос-Барраган Г., Вит Н., Патель К.Дж. и Чанг К.Дж. (2017). Основанная на реактивности 2-aza-Cope платформа для логометрической флуоресцентной визуализации формальдегида в живых клетках. Хим. науч. 8, 4073–4081. дои: 10.1039/c7sc00748e

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Брюэр, Т. Ф., и Чанг, К. Дж. (2015). Флуоресцентный зонд на основе реактивности азакопа для визуализации формальдегида в живых клетках. Дж. Ам. хим. соц. 137, 10886–10889.doi: 10.1021/jacs.5b05340

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Брюммер, К. Дж., Брюэр, Т. Ф., и Чанг, К. Дж. (2017a). Флуоресцентные зонды для визуализации формальдегида в биологических системах. Курс. мнение хим. биол. 39, 17–23. doi: 10.1016/j.cbpa.2017.04.010

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Bruemmer, K.J., Walvoord, R.R., Brewer, T.F., Burgos-Barragan, G., Wit, N., Pontel, L.B., et al.(2017б). Разработка триггера общей реакции азакопа применительно к флуоресцентной визуализации формальдегида в живых клетках. Дж. Ам. хим. соц. 139, 5338–5350. doi: 10.1021/jacs.6b12460

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чен, М.Л., Йе, М.Л., Цзэн, С.Л., Фань, Ю.К., и Ян, З. (2009). Определение анионов серы с помощью ионной хроматографии – постколоночное определение и УФ-детектирование. Подбородок. хим. лат. 20, 1241–1244. дои: 10.1016/j.cclet.2009.05.003

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Chen, W., Yue, X., Li, W., Hao, Y., Zhang, L., Zhu, L., et al. (2017). Красноизлучающий флуоресцентный зонд на основе фенотиазинового кумарина для наномолярного обнаружения тиофенола с большим стоксовым сдвигом. Сенсорные приводы B Chem. 245, 702–710. doi: 10.1016/j.snb.2017.01.167

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Chen, Y., Zhu, C., Yang, Z., Li, J., Jiao, Y., He, W., et al. (2012).Новый хемодозиметр «включения» для Hg2+: образование флуорофора ICT за счет индуцированного Hg(2+) извлечения карбальдегида из 1,3-дитиана. Хим. коммун. 48, 5094–5096. дои: 10.1039/c2cc31217d

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Dou, K., Chen, G., Yu, F., Liu, Y., Chen, L., Cao, Z., et al. (2017). Яркий и чувствительный логометрический флуоресцентный зонд, позволяющий визуализировать эндогенные жирные кислоты и исследовать механизмы непрямого окислительного повреждения, вызываемого жирными кислотами, в различных живых системах. Хим. науч. 8, 7851–7861. дои: 10.1039/c7sc03719h

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Du, Z., Song, B., Zhang, W., Duan, C., Wang, Y.L., Liu, C., et al. (2018). Количественный мониторинг и визуализация сероводорода in vivo с помощью люминесцентного зонда на основе комплекса рутения(II). Анжю. хим. Междунар. Эд Энгл . 57, 3999–4004. doi: 10.1002/anie.201800540

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Он, Л., Yang, X., Ren, M., Kong, X., Liu, Y. и Lin, W. (2016). Сверхбыстродействующий флуоресцентный зонд для мониторинга формальдегида в живых клетках, грибах шиитаке и в помещении. Хим. коммун. 52, 9582–9585. дои: 10.1039/c6cc04254f

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Цзя Г., Фу Ю., Чжао X., Дай К., Чжэн Г., Ян Ю. и др. (2011). N6-метиладенозин в ядерной РНК является основным субстратом FTO, ассоциированного с ожирением. Нац.хим. биол. 7, 885–887. doi: 10.1038/nchembio.687

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Jiang, Y., Zheng, G., Cai, N., Zhang, H., Tan, Y., Huang, M., et al. (2017). Быстродействующий флуоресцентный зонд для обнаружения хлорноватистой кислоты и его применение для визуализации экзогенных и эндогенных HOCl живых клеток. Хим. коммун. 53, 12349–12352. дои: 10.1039/c7cc07373a

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ли, М.Г., Виндер, К., Шмидт, Д.М., Маккафферти, Д.Г., и Шихаттар, Р. (2006). Деметилирование лизина 4 гистона h4 является мишенью неселективных антидепрессантов. Хим. биол. 13, 563–567. doi: 10.1016/j.chembiol.2006.05.004

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лю, К., Цзяо, X., Хэ, С., Чжао, Л., и Цзэн, X. (2017). Реактивный флуоресцентный зонд для селективного обнаружения формальдегида и метилглиоксаля с помощью различных схем излучения. Красители Пигменты 138, 23–29. doi: 10.1016/j.dyepig.2016.11.020

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Liu, J., Liu, F.Y., Tong, Z.Q., Li, Z.H., Chen, W., Luo, W.H., et al. (2013). Лизин-специфическая деметилаза 1 в клетках рака молочной железы способствует выработке эндогенного формальдегида в модели боли при метастатическом раке кости у крыс. PLoS ONE 8:e58957. doi: 10.1371/journal.pone.0058957

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лю, З., Ван, X., Ян, З., и Хэ, В. (2011). Рациональный дизайн двойного хемосенсора для определения цианид-анионов на основе дициановинилзамещенного бензофуразана. Дж. Орг. хим. 76, 10286–10290. дои: 10.1021/jo201878k

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ловерн, С. Б., и Клапер, Р. (2006). Смертность Daphnia magna при воздействии наночастиц диоксида титана и фуллерена (C-60). Окружающая среда. Токсикол. хим. 25, 1132–1137. дои: 10.1897/05-278р.1

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Луо В., Ли Х., Чжан Ю. и Анг К. (2001). Определение формальдегида в плазме крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуоресцентным детектированием. Ж. Хроматогр. В 753, 253–257. doi: 10.1016/S0378-4347(00)00552-1

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Муньос, О. (2015). Соединения (гетеро)арилциклопропиламина в качестве ингибиторов LSD1 . патент США. 20150025054.

Рот, А., Ли, Х., Анорма, К., и Чан, Дж. (2015). Реактивный флуоресцентный зонд для визуализации формальдегида в живых клетках. Дж. Ам. хим. соц. 137, 10890–10893. doi: 10.1021/jacs.5b05339

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ши, Ю., Лан, Ф., Мэтсон, К., Маллиган, П., Уетстин, Дж. Р., Коул, П. А., и соавт. (2004). Деметилирование гистонов, опосредованное гомологом ядерной аминоксидазы LSD1. Сотовый 119, 941–953.doi: 10.1016/j.cell.2004.12.012

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Соман, А., Цю, Ю., и Ли, К. (2008). Разработка и валидация метода ВЭЖХ-УФ для определения низкого содержания формальдегида в фармацевтической субстанции. Ж. Хроматогр. науч. 46, 461–465. doi: 10.1093/chromsci/46.6.461

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Талиани, С., Симорини, Ф., Серджианни, В., Ла Мотта, К., Да Сеттимо, Ф., Козимелли, Б., и другие. (2007). Новые флуоресцентные производные 2-фенилиндолглиоксиламида в качестве зондов, нацеленных на бензодиазепиновый рецептор периферического типа: дизайн, синтез и биологическая оценка. J. Med. хим. 50, 404–407. дои: 10.1021/jm061137o

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тан Ю., Конг Х., Сюй А., Донг Б. и Линь В. (2016). Разработка двухфотонного флуоресцентного зонда для визуализации эндогенного формальдегида в живых тканях. Анжю.хим. Междунар. Эд Энгл . 55, 3356–3359. doi: 10.1002/anie.201510373

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тан, Ю., Ли, Д., Ван, Дж., Ли, Г., Ю, Дж., Лин, В., и др. (2015). Разработка флуоресцентных зондов на основе защиты-снятия защиты ключевых функциональных групп для биологической визуализации. Хим. соц. Ред. 44, 5003–5015. дои: 10.1039/c5cs00103j

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тонг, З., Han, C., Luo, W., Li, H., Luo, H., Qiang, M., et al. (2013а). Связанный со старением избыток формальдегида приводит к дефициту пространственной памяти. Науч. Реп. 3:1807. дои: 10.1038/srep01807

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Tong, Z., Han, C., Luo, W., Wang, X., Li, H., Luo, H., et al. (2013б). Накопленный в гиппокампе формальдегид вызывает возрастное ухудшение памяти. Возраст 35, 583–596. doi: 10.1007/s11357-012-9388-8

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тонг, З., Zhang, J., Luo, W., Wang, W., Li, F., Li, H., et al. (2011). Уровень формальдегида в моче обратно коррелирует с минимальными показателями обследования психического состояния при старческой деменции. Нейробиол. Старение 32, 31–41. doi: 10.1016/j.neurobiolaging.2009.07.013

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Унзета, М., Соле, М., Боада, М., и Эрнандес, М. (2007). Семикарбазидчувствительная аминоксидаза (SSAO) и ее возможный вклад в повреждение сосудов при болезни Альцгеймера. Дж. Нейрал. Трансм. 114, 857–862. doi: 10.1007/s00702-007-0701-0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Xie X., Tang F., Shangguan X., Che S., Niu J., Xiao Y. и др. (2017а). Двухфотонная визуализация формальдегида в живых клетках и животных с использованием нацеливаемого на лизосомы и активируемого кислым рН флуоресцентного зонда. Хим. коммун. 53, 6520–6523. дои: 10.1039/c7cc03050a

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Се, З., Ge, J., Zhang, H., Bai, T., He, S., Ling, J., et al. (2017б). Высокоселективный двухфотонный флуорогенный зонд для определения формальдегида и его применения в биовизуализации клеток и рыбок данио. Сенсорные приводы B Chem. 241, 1050–1056. doi: 10.1016/j.snb.2016.10.039

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Сюй Дж., Чжан Ю., Цзэн Л., Лю Дж., Кинселла Дж. М. и Шэн Р. (2016). Простой флуоресцентный зонд на основе нафталина для высокоселективного обнаружения формальдегида в ирисках и клетках HeLa с помощью реакции аза-Коупа. Таланта 160, 645–652. doi: 10.1016/j.talanta.2016.08.010

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Сюй З., Чен Дж., Ху Л.-Л., Тан Ю., Лю С.-Х. и Инь Дж. (2017). Последние достижения в области чувствительных к формальдегиду флуоресцентных зондов. Китайский хим. лат. 28, 1935–1942 гг. doi: 10.1016/j.cclet.2017.07.018

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ян Х., Фанг Г., Го М., Нин П., Фэн Ю., Ю Х. и др. (2018).Рационометрический двухфотонный флуоресцентный зонд для селективного обнаружения эндогенного формальдегида с помощью реакции Аза-Коупа. Сенсорные приводы B Chem. 270, 318–326. doi: 10.1016/j.snb.2018.05.069

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Чжоу Ю., Ян Дж., Чжан Н., Ли Д., Сяо С. и Чжэн К. (2018). Рационометрический флуоресцентный зонд для формальдегида в водном растворе, сыворотке крови и воздухе с использованием реакции азакопирования. Сенсорные приводы B Chem. 258, 156–162. дои: 10.1016/ж.снб.2017.11.043

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Где живут дафнии?

Вопрос задан: Мэнли Ауфдерхар
Оценка: 4,5/5 (33 голоса)

Популяции дафний можно найти в различных водоемах, от огромных озер до очень небольших временных водоемов , таких как каменные лужи (рис. 2.18 и 2.19) и весенние лужи (сезонно затопляемые впадины). Часто они являются доминирующим зоопланктором и как таковые составляют важную часть пищевой сети в озерах и прудах.

В каких условиях живут дафнии?

Дафнию можно найти практически в любом постоянном водоеме , даже в залитых дождем колеях шин или в нескольких метрах от земли, растущих во мху деревьев в тропических лесах. Они в основном пресноводные, и самые высокие концентрации популяций дафний встречаются в растительности большинства озер и прудов.

Живут ли дафнии в соленой воде?

Дафнии, как правило, держатся в водоемах с пресной водой, но некоторые виды дафний могут выжить в морской воде с высокой соленостью до 20 процентов .Обычно дафнии обитают в воде с соленостью не более 5 процентов.

Дафнии живут в пресной или морской воде?

Установка аквариума с дафниями. Дафния — это пресноводных существ, которых можно содержать в аквариуме объемом от 5 или 6 галлонов до 360 галлонов!

Какая вода нужна дафнии для жизни?

Слейте 10-20% воды из контейнера и залейте новую воду.Используйте зеленую воду с высоким содержанием водорослей . Дафния прекрасно себя чувствует в зеленой воде с водорослями, поэтому не удаляйте ее, если она начинает формироваться в вашем контейнере или аквариуме. Дафния питается водорослями в воде и может использовать их в качестве источника пищи.

Найдено 32 похожих вопроса

Как приготовить зеленую воду для дафнии?

Добавьте чайную ложку растворимого удобрения для растений и добавьте чашку зеленой воды . Перемешивайте каждый день или два, чтобы водоросли оставались взвешенными.Раз в неделю выливаю примерно 2/3 ведра в свои бассейны с дафниями. Наполните ведро свежей водой и добавьте еще немного удобрений.

Может ли дафния жить в пруду?

Живая дафния — один из самых популярных живых кормов. Дафнии являются фильтраторами и могут быть очень полезны в прудах и аквариумах, поскольку они помогают очищать зеленую воду, а также обеспечивают вкусную еду для большинства пресноводных рыб.

В какой среде обитают дафнии?

Популяции дафний можно найти в различных водоемах, от огромных озер до очень небольших временных водоемов , таких как каменные лужи (рис. 2.18 и 2.19) и весенние лужи (сезонно затопляемые впадины). Часто они являются доминирующим зоопланктором и как таковые составляют важную часть пищевой сети в озерах и прудах.

Подходит ли дафния для морских рыб?

Дафния зр., широко известные как водяные блохи, едва ли являются новичками в аквариумистике. Причина этого проста: дафнии чрезвычайно питательны, и рыбы их любят . …

Каков диапазон солености для дафний?

Daphnia обитает при оптимальных уровнях солености от 1,5 до 3,9 ppt , оптимальных температурах 18 – 22 o C и pH от 6,5 до 9,5. Эти условия позволяют ему развиваться и размножаться с критической скоростью, чтобы обеспечить длительное выживание не только отдельных особей, но и популяции.

Где живут водяные блохи?

Большинство форм встречается в пресноводных местообитаниях , но некоторые встречаются в морской среде. Самый известный род — Daphnia, повсеместно распространенный в прудах и ручьях Европы и Северной Америки. Водяная блоха имеет микроскопический размер, обычно ее длина составляет всего от 0,2 до 3,0 миллиметров (от 0,01 до 0,12 дюйма).

Какие рыбы могут съесть дафнию?

Что такое дафния? Это мелкие блохи водной разновидности.Они очень питательны для петушка , действуют как помощник пищеварения, а также как слабительное для петушка. Многие петушки, даже выращенные на ферме, с удовольствием поедают дафнию.

При какой температуре живут дафнии?

Температура является одним из наиболее важных факторов окружающей среды для дафний и должна оставаться около 70°F для успешного размножения. Кроме того, рН воды должен поддерживаться на уровне 7-8.5.

В каком биоме обитает Daphnia magna?

Daphnia magna — мелкое планктонные ракообразные (длина взрослой особи 1,5–5,0 мм), принадлежащее к подклассу Phyllopoda. Он обитает в различных пресноводных средах , от кислых болот до рек, состоящих из снежного стока, и широко распространен в Северном полушарии и Южной Африке.

Что такое особая адаптация Дафнии?

Первая важная адаптация Д.pulex и все остальные дафнии приобрели свой панцирь . … Поскольку плотность Daphnia pulex выше, чем плотность воды, в которой она живет, она выработала уникальный способ передвижения, чтобы не опускаться на дно своей пресноводной среды.

Что съест дафния?

Дафнии свободно плавают, передвигаясь с удивительной скоростью, учитывая, что для плавания они используют пару модифицированных усиков.Во время путешествия они отфильтровывают из воды еще более мелкие организмы. Они питаются 90 864 одноклеточными водорослями, дрожжами и 90 865 бактериями. Дафнии, в свою очередь, поедают рыбы и водные насекомые.

Как избавиться от дафний в аквариуме?

Смените воду в резервуаре

Они толстеют и рожают детей. Смена воды в аквариуме убьет блох напрямую, а также удалит запасы пищи, которые позволили бы им заселиться.Вы можете откачать блох и заменить текущую воду, наполненную кормом, новой водой, чистой и свободной от частиц.

Чем вы кормите дафний?

Кормление. Дафнии являются фильтраторами. Они отфильтровывают микроскопические частицы пищи из воды. Гранулы дафнии, источник пищи для водорослей, и суспензия пекарских или пивных дрожжей — все это хорошие варианты подкормки для культур.

Как выращивать дафнию?

Подсказки для выращивания дафний

  1. Дафнию можно выращивать практически в любом контейнере. …
  2. Всегда состаривайте воду в контейнере перед добавлением живой культуры дафнии. …
  3. pH воды может варьироваться от 6,2 до 8,9. …
  4. Подменять 20 % воды не реже одного раза в 2 недели. …
  5. Идеальная температура для выращивания дафний обычно составляет от 72 до 85 градусов.

Дафния чувствует боль?

Эковер не согласен с этим утверждением, поскольку дафнии являются беспозвоночными, а это означает, что у них нет центральной нервной системы, и поэтому не могут чувствовать боль .

Сколько живут дафнии в пруду?

Срок службы. Продолжительность жизни дафнии не превышает одного года и в значительной степени зависит от температуры.Например, отдельные организмы могут жить до 108 дней при 3°C, в то время как некоторые организмы живут только 29 дней при 28°C.

Должен ли я поместить дафнию в мой пруд с дикой природой?

Пруды привлекают стаи птиц, таких как скворцы, чтобы купаться, лисы, чтобы пить, а воробьи и летучие мыши-нетопыри, чтобы питаться многочисленными насекомыми. … Водяных блох дафний поедают взрослые и личиночные тритоны , а также другие водные насекомые.Они фильтруют водоросли из воды и тем самым помогают поддерживать чистоту пруда.

1000+ Live Daphnia Magna (чистая комнатная культура) БЕСПЛАТНАЯ ПРИОРИТЕТНАЯ ДОСТАВКА

Описание продукта:

Продам более 1000 дафний для использования в качестве корма для живых рыб или для создания собственного разведения. Дафнии — маленькие водные ракообразные и отличный источник пищи для водных питомцев, особенно привередливых в еде! Они являются отличным живым кормом для пресноводных аквариумов и не загрязняют воду в вашем аквариуме.
Вы получите три мешка по ~2 фунта воды с дафниями в каждом мешке.

Уход: мы подкармливаем нашу дафнию пивными дрожжами, и их подкармливают ежедневно из-за огромного размера культур. Все культуры получают подмену 50% воды каждые несколько дней, и используется только выдержанная водопроводная вода. По желанию покупателя мы с удовольствием предоставим советы и рекомендации по содержанию и уходу за вашей культурой дафний.
Я использую выдержанную водопроводную воду, аэрированную с помощью канистрового фильтра с УФ-стерилизатором, что гарантирует, что дафния, которую вы получаете, не содержит бактерий и патогенов.Я также выращиваю червей Tubifex вместе с дафниями, так что вы можете получить червя или двух в пакете.

Доставка: Хотя мы стремимся обеспечить наилучшую доставку и обработку, мы отправим повторно, если предоставим изображения дафнии DOA в течение 4 часов после подтверждения доставки.

Из-за большого объема воды, необходимого для отправки более 1000 дафний, мы не можем предложить доставку в пакете первого класса USPS. Все заказы отправляются почтой USPS Priority.

Ниже перечислены основные процессы ухода за культурами дафний:
Обслуживание: подмены воды выполняются не реже одного раза в два дня, заменяя не менее 50% воды.Сифонирование дна резервуара или контейнера, в котором живут дафнии, так как пища, которую вы им кормите, будет собираться там. Я использую выдержанную воду, а не аквариумную воду (из-за возможности бактерий в наших аквариумах, которые могут распространиться на клиентов — если вы не планируете продавать, вы, безусловно, можете использовать свою собственную аквариумную воду).
Примечание: не используйте обычную пресную воду или пресную воду, обработанную праймом, так как это может убить культуру. Кормление:
Я кормлю их пивными дрожжами один раз в день.Их пора кормить, когда вода станет прозрачной. Если вода не очистится максимум через пару дней, вы, вероятно, перекармливаете их. Я использую сетку для артемии, чтобы отфильтровать более крупные частицы дрожжей при кормлении (держите сетку над культурой и выливайте в нее дрожжевую смесь). Смешайте дрожжи в небольшой емкости с отстоянной водой или аквариумной водой. Хорошо перемешать. На самом деле я не использую соотношение дрожжей и воды, но буду кормить до тех пор, пока не перестану видеть дно контейнера с дафниями. Начните с малого и добавляйте больше дрожжей по мере необходимости, чтобы соответствовать вышеуказанной спецификации.
Дополнительные советы: не используйте только одну культуру. Безопаснее поддерживать как минимум 2 на случай, если один выйдет из строя. Очень часто случается так, что культуры терпят крах. Большее количество воды лучше для выживания культуры (мы держим нашу воду в резервуарах и контейнерах объемом более 20 галлонов). Не обязательно, но полезно: по моему опыту, слегка аэрированная вода способствует размножению дафний.

Дафния для петушков: что нужно знать

Одним из наиболее важных аспектов выращивания здоровых петушков или любой другой рыбы, если на то пошло, является воспроизведение условий, в которых они процветают в дикой природе в своей среде обитания в неволе.Это включает в себя такие аспекты, как температура и pH воды, растения и приспособления для аквариума и, конечно же, еда. Бойцовая рыбка любит охотиться на живую добычу, и один из лучших способов воспроизвести это в неволе — это дафния.

Дафния — одно из самых полезных лакомств для петушков и одно из самых простых в добыче. Тем не менее, у некоторых аквариумистов возникает некоторая путаница, поэтому читайте дальше, чтобы узнать все о дафниях и кормлении ими ваших петушков!

Что такое дафния?

Дафнии — род мелких планктонных ракообразных, более известных как водяные блохи из-за того, что их плавание напоминает движения блох.Различные виды дафний живут как в соленой, так и в пресной воде, и петушки, скорее всего, наткнутся на них в дикой природе и будут охотиться на них в качестве источника пищи. Их длина варьируется от 1 до 5 миллиметров, что является идеальным размером для вашей бетты, и их можно найти как в замороженном, так и в живом виде в качестве корма в большинстве водных магазинов.

Изображение предоставлено: paisalphoto, Shutterstock

Полезна ли дафния для петушков?

Поскольку дафния, скорее всего, встречается в естественной среде обитания петушков и является чем-то, чем они могли бы питаться в естественных условиях, имеет смысл кормить ею вашу петушковую петушку.Вы можете купить дафний замороженными или живыми и даже разводить их дома, если у вас есть место. Они богаты белком, важным питательным веществом для бойцовой рыбки.

Дафния может помочь петушкам с пищеварением, а это означает, что они могут легче переваривать свою обычную пищу, а добавка белка даст им массу дополнительной энергии. Кормление ваших петушков живой дафнией стимулирует их охотничий инстинкт. Поскольку дафнии могут выжить в аквариуме, если их сразу не съедят, они не будут загрязнять аквариумную воду.

Изображение предоставлено: Rifkong, Shutterstock

Frozen vs. Live Daphnia

Так как дафнии очень полезны для петушков, имеет смысл кормить ими петушков как можно чаще. Но что лучше, живая или замороженная дафния?

Живая дафния

Многие владельцы аквариумов утверждают, что живая дафния – лучший выбор для петушков, и на то есть веские причины. Разведение дафний довольно просто, поэтому вы можете рассмотреть их разведение как более долгосрочное решение для вашего аквариума. Если разведение не для вас, дафнии легко доступны и недороги, потому что их очень легко разводить.Кроме того, охота на живую дафнию принесет вашей петушке пользу, так как это стимулирует ее естественные охотничьи инстинкты.

Однако есть и пара недостатков. Перекармливание все еще возможно, так как любая оставшаяся дафния будет просто съедена вашими петушками позже. Кроме того, вы должны убедиться, что получаете их от авторитетного заводчика, чтобы избежать химикатов, паразитов и потенциальных болезней.

Изображение предоставлено: airdone, Shutterstock

Лиофилизированная и замороженная дафния

Самым большим преимуществом лиофилизированной дафнии является удобство.Вы можете просто купить большой запас и хранить их в морозильной камере. Они по-прежнему дадут вашим петушкам все преимущества для здоровья живых дафний без риска заражения паразитами, и вы также можете покрыть их лекарствами или поливитаминами. Конечно, сублимированная дафния не подарит вашим петушкам того же «охотничьего азарта», как живая дафния!

Вы также можете приобрести замороженную дафнию, которая обычно поставляется в виде небольших блоков. Это здорово, потому что это очень удобно, но будьте осторожны, чтобы не перекормить. Убедитесь, что вы разрезали блоки на более мелкие кусочки и разморозили их перед кормлением.

Изображение предоставлено: Pras1107, Shutterstock

Полезна ли дафния при запорах?

Одним из часто рекламируемых полезных свойств дафнии для петушков является средство от запоров. Оказывается, это правда, и рыбоводы уже давно используют дафнию как лекарство от запоров. Запоры довольно распространены у петушков, вызванных в основном перекармливанием и неправильным питанием с недостатком клетчатки. Дафния известна как мягкое слабительное, и небольшие количества могут помочь устранить вздутие живота и запоры у петушков.

Сколько дафний нужно кормить петушка?

Изображение предоставлено Александром Гейгером, Shutterstock

. Правильное количество дафнии для вашей петушиной рыбки зависит от размера и возраста вашей рыбы, хотя хорошим эмпирическим правилом является не более 1,8 грамма на петушковую рыбку в день. Лучше всего разделить это на две порции или половину порции в сочетании с обычным кормом вашей петушки. Некоторые петушки могут есть больше или меньше, поэтому следите за тем, чтобы лучше оценить порции для вашей петушки.

Читайте по теме: 10 лучших живых кормов для петушков — обзоры и лучший выбор

Заключение

Дафния является отличным источником белка для петушков, а живая дафния особенно хороша, поскольку стимулирует охотничьи инстинкты петушков.Дафния легко доступна в большинстве магазинов аквариумистики, и разведение ее в домашних условиях также является простым процессом, если вы хотите сэкономить деньги. Как простой и недорогой источник белка для бойцовой рыбки, дафния является отличным вариантом кормления.

Вас также может заинтересовать: Почему моя петушковая рыбка выплевывает пищу?


Авторы избранных изображений: лучшие фотографии, Shutterstock

Выращивание дафний – MJV Aquatics

на Майкл Формвальд


Daphnia — еще один высококачественный живой корм, очень питательный для рыб.Существует много видов дафний (Pulex, Magna и др.), я обнаружил, что красные русские дафнии Magna являются самыми крупными и кажутся очень выносливыми. Однако культуры дафний могут давать сбои по неизвестным/невидимым причинам. Вообще дафнии очень чувствительны к качеству воды. Иногда их используют для проверки качества воды (как канарейки в шахте). Они также могут не переносить кондиционеры для воды, нейтрализующие хлор/хлорамин. Это может представлять собой проблему, и самым безопасным подходом может быть использование использованной аквариумной воды, полученной в результате подмены воды в аквариуме.

Резервная культура

Первым шагом в культивировании дафний является всегда наличие резервной культуры (или двух). Это может быть галлонная банка или 5-граммовое ведро в подвале. Это лучше гарантирует, что в случае сбоя основной культуры вы сможете восстановиться. Теперь резервная культура может получать достаточно еды только для поддержания популяции, но на самом деле не увеличивает популяцию, как в производственном бункере или ведре.

Контейнер

Как и в случае с аквариумом, самый большой контейнер, который вы можете предоставить, обеспечивает более стабильное качество воды и предотвращает проблему дольше, чем в случае с меньшим контейнером с водой.Вы можете использовать запасной аквариум, но пластиковые контейнеры или 5-граммовые ведра подойдут лучше, и их будет легче транспортировать, если/когда требуется серьезная очистка.

Вода

Как уже упоминалось, дафнии могут быть очень чувствительны к качеству воды. Регулярные частичные подмены воды могут иметь большое значение для долгосрочного успеха. Если подумать, то, как и в аквариуме, со временем вода загрязняется и может выделяться токсичный аммиак, что может означать катастрофу для культуры.Опять же, вода не должна содержать хлор/хлорамин, и лучше не использовать химические кондиционеры для воды. Самый безопасный подход — использовать использованную аквариумную воду. (У меня неочищенная колодезная вода, так что мне повезло). Еженедельной подмены воды на 50 % может быть достаточно.

Примечание: как написано выше, за некоторыми исключениями, мои уличные контейнеры в основном просто увидят изменения с дождем.

Температура

Дафния предпочитает более прохладную воду с температурой 60–70°F. В прошлом мои уличные контейнеры сильно страдали, если в течение длительного периода стояла жара.Это может быть связано со значительным снижением содержания кислорода в очень теплой воде и/или повышенным разложением органических веществ с образованием большего количества аммиака. Мои крытые подвальные бункеры обычно работают нормально (55–70 °F), но, как ни странно, не так продуктивны, как наружные.

Фильтрация

Биологическая фильтрация может быть очень полезна для контроля уровня аммиака. Обычные фильтры не работают, потому что дафния попадет в ловушку. Некоторым нравится использовать губчатый фильтр, но я считаю, что губчатый фильтр быстро «загружается» и удаляет корм, которым вы пытаетесь кормить дафнию.Теперь маленькие контейнеры могут рассчитывать на подмены воды, а большие контейнеры выигрывают от биофильтрации. В больших бункерах мы использовали простую воздушную линию, удерживаемую мешком с керамической биосредой. Это должно обеспечить необходимый кислород и некоторый уровень биофильтрации.

Хорошо задокументировано, что если/когда используется аэрация, образуются только крупные пузырьки, так как мелкие пузырьки могут проникать в панцирь, вызывая всплывание дафний и их гибель. Хотя у нас были крупные пузыри, мы заметили, что дафний привлекала струя пузырей, и мы заметили несколько плавающих мертвых дафний.Мы отключили воздух в этих внешних баках.

Кормление

Некоторым нравится «кормить» зеленую воду (водоросли), однако в долгосрочной перспективе может быть проблемой иметь достаточное количество зеленой воды. Другим нравится проверять дрожжи и регулярно кормить. Раньше я кормил смесью муки и порошка спирулины, но мука слишком быстро загрязняла воду. Теперь дафния также будет потреблять бактерии, поэтому разложение органического вещества может быть полезным. Это может быть мульма из существующего аквариума.Для внешних мусорных ведер я добавлю листья и обрезки травы, чтобы служить этой цели. Вы также можете добавить растительные вещества, но будьте осторожны при этом во внутренних контейнерах, так как они могут пахнуть болотом.

В настоящее время я обычно кормлю смесью порошка спирулины и горохового порошка. Кажется, это работает хорошо. Многие будут кормить дрожжами, устойчивыми к дафниям. Кроме того, дафнии будут потреблять бактерии, поэтому некоторые разлагающиеся органические вещества могут дополнять питание. В моих мусорных баках на улице есть листья, и я бросаю куски арбузной корки или кабачка.В помещении я экспериментирую с кусочками банана и гранулами из кролика (на основе тимофеевки). Улитки отлично справляются с домашним хозяйством и косвенно добавляют к доступной пище.

Одно предостережение — не перекармливать, так как это может загрязнить воду и привести к гибели культуры… при самых лучших намерениях слишком легко перекормить. Добавляйте корм только тогда, когда вода станет очень прозрачной, и то небольшими порциями. Это тот случай, когда меньше значит больше.

Сбор урожая

После того, как культура станет достаточно многочисленной, важно регулярно собирать урожай, чтобы держать популяцию под контролем.В отличие от некоторых других культур и в природе, слишком скученные культуры дафний часто могут привести к краху культуры.

Если происходит крах культуры дафний, подождите 4-7 дней, так как довольно часто яйца вылупляются и популяция восстанавливается. Вы можете заметить плавающие черные точки (яйца) на поверхности.

Опять же, очень важно иметь более одной культуры И иметь одну или две небольшие резервные культуры для восстановления после любого сбоя.

Так КОРМ, ПОДМЕНА ВОДЫ, УРОЖАЙ, ПОВТОР.

Зимовка

В этом году я экспериментирую, оставляя на зиму уличные баки полными воды. Я на северо-востоке США, поэтому они полностью замерзнут. Однако я слышал, что дафния вернется (из вылупившихся яиц) весной. Если нет, буду сеять из своих комнатных культур.

В этом году я экспериментировал, устроив пятифутовый детский бассейн (вверху). Я не думал, что это будет хорошо в летнюю жару. Я разместил его там, где он будет видеть утреннее солнце, с полуденной тенью.Я ежедневно собирал (как дафний, так и личинок комаров) из этого бассейна, и, к моему удивлению, он намного превзошел мои другие бункеры. Это было даже при том, что у нас была волна жары в течение недели или больше! Весной думаю добавить еще один детский бассейн!

В другом эксперименте для резервных культур в помещении я оставляю свет включенным круглосуточно и без выходных. Это может сделать их более активными и создать водоросли в качестве еще одного источника пищи.

Примечание: см. Дафнию Take 2


Несколько советов с Youtube по выращиванию дафний

Несколько советов с Youtube по выращиванию дафний:


Другая живая культура Похожие посты:

><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   > <((((º>   ><((((º>

Copyright © 2020 – 2021 MJV Aquatics, Все права защищены

><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   ><((((º>   > <((((º>   ><((((º>


Copyright © 2020 – 2021 MJV Aquatics, Все права защищены

Пользователи могут загружать, распечатывать, фотокопировать, распространять сообщения блога MJV Aquatics, защищенные авторским правом, ТОЛЬКО в том случае, если они являются полными и неизмененными каким-либо образом, однако их нельзя копировать на другой веб-сайт или использовать в коммерческих целях без письменного разрешения.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.